如何密封 PCR 板

介绍

PCR板多年来，作为实验室的主要内容，随着实验室扩大吞吐量并在其工作流程中越来越多地采用自动化，它在现代环境中变得更加普遍。在保持实验的准确性和完整性的同时实现这些目标可能很困难。容易出现错误的常见领域之一是密封PCR板技术较差，导致样品蒸发，改变 pH 值，从而破坏酶功能，并引发污染。学习如何密封PCR板正确消除这些风险并确保结果可重复。

找到适合您 PCR 板的密封件

板盖与薄膜密封与盖子
帽子是紧密密封板的好方法，同时仍然让您可以根据需要灵活地轻松启封和重新密封板，而不会造成任何浪费。然而，上限确实有几个主要缺点。

首先，您必须购买兼容的特定盖子，这使得它们不通用。您必须确保您选择的盖子适合板，这取决于其制造商，并根据您使用的热循环仪选择圆顶盖或平顶盖。

其次，将盖子盖到板上可能会非常重复和乏味，如果您将错误的盖子放在错误的孔上，则存在交叉污染的风险。

虽然薄膜密封件在拆卸和更换方面不太灵活，但它们用途非常广泛，因为它们适合任何类型的 PCR 板，无论制造商是谁。它们可以简单地切割成适当的尺寸，从而非常有效。

另一种选择是板盖。与盖子和密封件相比，它们提供的保护较少，并且主要仅用于短期覆盖以防止污染。

光学密封与箔膜密封

无论您需要光学、透明密封还是铝箔薄膜密封你的板是由你的实验形式决定的。光学密封膜透明，可以让您观察样品，同时仍然保护它们并防止蒸发。它们在 qPCR 实验中也特别有用，这些实验涉及直接从板进行荧光的高精度测量，在这种情况下，您将需要一个密封膜来滤除尽可能少的荧光。重要的是要确保您使用的密封件或盖子具有足够高的光学透明度，以确保读数准确。

铝箔薄膜适用于任何对光敏感或需要在 80°C 以下储存的样品。因此，大多数用于长期储存的样品都需要箔膜。箔膜也是可刺穿的，这对于检查单个孔或通过针转移样品非常有用。这可以手动进行或作为机器人平台的一部分进行。

还要考虑到包括酸、碱或溶剂在内的腐蚀性物质需要能够承受它们的密封件，在这种情况下，箔密封件可能更合适。

粘合剂与热封膜
粘合膜密封非常简单且易于应用。用户所需要做的就是将密封件涂抹到板上，然后使用简单的涂抹工具向下压并形成紧密的密封。

热封更先进，提供更持久的密封，与传统的粘合密封相比，蒸发率更低。如果您希望长期存储样品，则此选项是合适的，尽管这确实对板密封设备提出了额外要求。

如何密封 PCR 板

板封法

自粘式

1. 确保您在平坦且稳定的工作表面上工作

2. 从包装中取出薄膜，然后除去背衬

3. 小心地将密封件放在板上，同时确保所有孔都被覆盖

4. 使用涂抹工具在板上施加压力。从一端开始，均匀地按压到另一端

5.重复多次

6. 在外部孔周围运行涂药器，以确保这些孔也正确密封。

热封

热封的工作原理是在板封口机的帮助下将薄膜熔化到每个孔的边缘。要操作热封机，请参阅设备制造商提供的说明。确保您采购设备的制造商信誉良好，因为密封正确、有效且防水非常重要。

板密封顶部提示

一个。对密封件施加压力时，请沿水平和垂直方向施加压力，以确保正确密封

b.无论您正在做什么，进行测试运行始终是一个好习惯，这与板密封没有什么不同。在使用装有样品的平板之前先用空平板进行测试。

c.测试时，取下密封条，查看粘合剂是否正确粘贴，没有间隙。第一个参考文档中有对此的直观表示。如果您没有正确密封板，当您拆下密封件时，就会出现粘合剂未完全粘合到板上的间隙。

d.对于样品的运输和运输，您可能会发现在铝箔密封件顶部应用塑料密封件以提供额外保护（尤其是防止刺穿）很有帮助。

e.贴膜时务必确保没有凹凸或皱纹——这些会导致泄漏和蒸发