聚合酶链反应(PCR)是生命科学实验室中广为人知的方法之一。
PCR平板是由一流塑料生产的,用于对样品的出色处理和分析或收集的结果分析。
它们具有薄而均匀的壁,可提供精确的热传递。
为了准备实时应用,DNA或RNA的微小部分被隔离并存储在PCR板上。
PCR板在热密封方面高效,也限制了热量的流动。
但是,作为有效和可靠的PCR平板,在处理样品时,误差和不准确的侧面很容易。
因此,如果您有兴趣获得高质量PCR板。与可靠的PCR板制造商联系是理想的选择。因此,您可以确保获得最好的交易。
以下是一些预防措施,以避免试剂或样品的污染,并防止不准确性蔓延到结果中。
对周围环境进行消毒
由于存在杂质而导致不正确的积极因素或负面因素,这使您怀疑结果。
杂质和污染物以各种形式发生,例如无关的DNA或化学添加剂,最终降低了反应的效率和有效性。
有很多方法可以大大降低PCR板的污染速度。
使用消毒过滤尖端是防止杂质通过移液器蔓延到样品中的另一种有用方法。
专用于PCR的完全干净的设备,包括移液器和机架。这将保证可以忽略的实验室周围杂质或污染物的转移。
利用漂白剂,移液器上的乙醇,架子和长凳上擦除污染物。
为所有PCR反应分配保留空间,以进一步最大程度地减少颗粒污染。
在每个步骤都使用干净的手套,并经常更换它们。
PCR板
检查模板的浓度和纯度。
使用PCR分析样品时使用的长凳和设备的清洁度应保持。在分析和处理之前,必须验证样品的纯度程度。
通常,分析仪考虑DNA样品的浓度和纯度水平。
努力260nm/280nm的吸光度比不得小于1.8。随后的波长在230nm至320nm之间用于识别杂质。
在一个例子中,以230nm的吸光度率检测到了肉体盐和其他有机化合物。虽然还以320nm的吸光度检测并验证了DNA样品中的浊度。
避免使用产品过载PCR板
尽管希望同时运行多种产品,但它会导致PCR板的交叉污染。
将PCR板超载与不同的产品废物,使确定样品非常困难。
保留等分试剂的记录
连续冻结/解冻周期和频繁使用等分试样可能会通过重结晶损害PCR试剂,酶和DNTP。
在准备要分析的样品时,始终努力监视使用的等分试样速率。
更可取的LIMS更适合控制库存和样品冻结或解冻的库存量。
选择最佳的退火温度。
选择和使用错误的退火温度是另一种方法PCR结果包含错误。
有时,反应不会按计划进行。希望降低退火温度以促进成功反应。
但是,降低温度会增加假阳性和底漆二聚体外观的机会。
使用PCR板时,确认熔融曲线的分析非常重要,因为它是选择正确退火温度的良好指标。
底漆设计软件可帮助设计,提供正确的退火温度,直接减少PCR板中的误差。
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发布时间:10月30日至2021年