聚合酶链式反应 (PCR) 是生命科学实验室中广泛使用的方法之一。
PCR 板由一流的塑料制成，可对收集的样品或结果进行出色的处理和分析。
它们具有薄而均匀的壁，可提供精确的热传递。
为了准备实时应用，DNA 或 RNA 的微小片段被隔离并储存在 PCR 板中。
PCR 板的热封效率很高，并能限制热量的流动。
然而，尽管 PCR 板有效且可靠，但在处理样品时很容易出现错误和不准确的情况。
因此，如果您有兴趣获得优质的产品PCR 板。最好联系可靠的 PCR 板制造商。这样您就可以确保获得最优惠的价格。
以下是一些需要遵循的预防措施，以避免试剂或样品污染并防止结果出现误差。
环境消毒
由于杂质的存在，会出现不正确的阳性或阴性结果，这使您对结果产生怀疑。
杂质和污染物以各种形式出现，例如不相关的 DNA 或化学添加剂，最终降低反应的效率和有效性。
有多种方法可以大大降低 PCR 板的污染率。
使用无菌过滤吸头是防止杂质通过移液器渗入样品的另一种有用方法。
配备一套完全干净的设备，包括移液器和架子，专门用于 PCR。这将保证实验室周围的杂质或污染物的转移可以忽略不计。
在移液器、架子和工作台上使用漂白剂、乙醇擦去污染物。
为所有 PCR 反应分配预留空间，以进一步减少颗粒污染。
每一步都使用干净的手套并经常更换。
PCR板
检查模板的浓度和纯度。
应保持 PCR 分析样品时所用工作台和设备的清洁度。在分析和处理之前验证样品的纯度至关重要。
一般来说，分析仪会考虑 DNA 样品的浓度和纯度水平。
力争260nm/280nm吸光度之比不得小于1.8。而随后的230nm和320nm之间的波长用于识别杂质。
例如，离液盐和其他有机化合物在 230nm 吸光度下被检测到。同时还可以在 320nm 吸光度下检测和验证 DNA 样品中的浊度。
避免 PCR 板中的产品超载
尽管希望同时运行多个产品，但这会导致 PCR 板的交叉污染。
PCR 板超载不同的产物会造成浪费，并且使确定样本变得极其困难。
保留等分 PCR 试剂的记录
连续冷冻/解冻循环和频繁使用等分试样可能会因重结晶而损坏 PCR 试剂、酶和 DNTP。
在准备待分析样品时，始终尽力监控所用等分试样的比率。
优选LIMS更适合控制试剂和样品冷冻或解冻的库存和数量。
选择最佳退火温度。
选择和使用错误的退火温度是 PCR 结果出现错误的另一种方法。
有时，反应不会按计划进行。需要降低退火温度以促进成功的反应。
然而，降低温度会增加假阳性和引物二聚体出现的机会。
使用 PCR 板时确认熔解曲线分析具有重要意义，因为它是选择正确退火温度的良好指标。
引物设计软件有助于设计、提供正确的退火温度，并直接减少 PCR 板中的错误。
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发布时间：2021年10月30日