Awọn aati polymerase pq (PCR) jẹ ọkan ninu awọn ọna ti a mọ ni ibigbogbo ti a lo ninu awọn ile-iṣẹ imọ-jinlẹ igbesi aye.
Awọn awo PCR ni a ṣe lati awọn pilasitik kilasi akọkọ fun sisẹ to dara julọ ati itupalẹ awọn ayẹwo tabi awọn abajade ti a gba.
Wọn ni awọn odi tinrin ati isokan lati pese gbigbe igbona deede.
Ni igbaradi fun awọn ohun elo akoko gidi, apakan iṣẹju ti DNA tabi RNA ti wa ni ipamọ ati fipamọ sinu awọn awo PCR.
Awọn awo PCR jẹ daradara daradara ni didimu ooru ati ni ihamọ sisan ti ooru daradara.
Bibẹẹkọ, bi imunadoko ati igbẹkẹle awọn awo PCR jẹ, aṣiṣe ati awọn aiṣedeede sidle ni irọrun lakoko ṣiṣe awọn ayẹwo.
Nitorinaa, ti o ba nifẹ si gbigba didara to dara ati gigaPCR farahan.O ti wa ni bojumu lati kan si a gbẹkẹle PCR awo olupese. Pẹlu eyi o ni idaniloju gbigba adehun ti o dara julọ.
Eyi ni diẹ ninu awọn iṣọra lati tẹle lati yago fun awọn idoti ti awọn reagents tabi awọn ayẹwo ati ṣe idiwọ awọn aiṣedeede lati wọ inu awọn abajade.
Sterilizing The Ayika
Awọn idaniloju ti ko tọ tabi awọn odi waye nitori wiwa awọn aimọ, eyiti o jẹ ki o ṣiyemeji awọn abajade.
Awọn aimọ ati awọn idoti waye ni awọn ọna oriṣiriṣi bii DNA ti ko ni ibatan tabi awọn afikun kemikali eyiti o dinku ṣiṣe ati imunadoko ti iṣesi naa.
Awọn ọna lọpọlọpọ lo wa lati dinku oṣuwọn ibajẹ ti awo PCR pupọ.
Lilo awọn imọran àlẹmọ sterilized jẹ ọna miiran ti o wulo lati ṣe idiwọ awọn idoti lati wọ inu awọn ayẹwo rẹ nipasẹ awọn pipettes.
Ṣe iyasọtọ ohun elo ti o mọ patapata, ti o ni awọn pipettes ati awọn agbeko, iyasọtọ fun lilo PCR. Eyi yoo ṣe iṣeduro gbigbe aifiyesi ti awọn idoti tabi awọn idoti ni ayika yàrá-yàrá.
Lo awọn bleaches, ethanol lori pipettes, awọn agbeko ati awọn ijoko lati nu kuro.
Yatọ aaye ti a fi pamọ fun gbogbo awọn aati PCR rẹ lati dinku siwaju si idoti patiku.
Lo awọn ibọwọ mimọ ni gbogbo igbesẹ ki o rọpo wọn nigbagbogbo.
PCR farahan
Ṣayẹwo ifọkansi ati Iwa mimọ ti Awoṣe naa.
Iwa mimọ ti ibujoko ati ohun elo ti a lo nigba itupalẹ awọn ayẹwo pẹlu PCR yẹ ki o ṣetọju. O ṣe pataki lati fọwọsi iwọn mimọ ti awọn ayẹwo ṣaaju itupalẹ ati sisẹ.
Ni gbogbogbo, awọn atunnkanka ṣe akiyesi ifọkansi ati ipele mimọ ti awọn ayẹwo DNA.
Gbiyanju ipin gbigba fun 260nm/280nm ko gbọdọ kere ju 1.8. Lakoko ti igbi ti o tẹle laarin 230nm ati 320nm ni a lo lati ṣe idanimọ awọn aimọ.
Ni apẹẹrẹ, awọn iyọ rudurudu ati awọn agbo ogun Organic miiran ni a rii ni oṣuwọn gbigba 230nm. Lakoko ti turbidity ninu awọn ayẹwo DNA tun rii ati rii daju ni oṣuwọn gbigba ti 320nm.
Yago fun apọju PCR Plates pẹlu ọja
Niwọn bi o ti fẹ lati ṣiṣe awọn ọja lọpọlọpọ nigbakanna, o ni abajade ni ibajẹ-agbelebu ti awọn awo PCR.
Ikojọpọ awọn awo PCR pẹlu awọn egbin ọja oriṣiriṣi ati jẹ ki o nira pupọ lati rii daju awọn ayẹwo naa.
Jeki Awọn igbasilẹ ti Aliquot PCR Reagents
Ilọsiwaju didi/awọn iyipo gbigbẹ ati lilo loorekoore ti aliquot le ba awọn reagents PCR jẹ, awọn enzymu ati awọn DNTP nipasẹ isọdọtun.
Gbiyanju nigbagbogbo lati ṣe atẹle oṣuwọn aliquot ti a lo lakoko ṣiṣe awọn ayẹwo lati ṣe itupalẹ.
LIMS ti o wuyi jẹ ibamu diẹ sii lati ṣakoso akojo oja ati iye awọn reagents ati awọn ayẹwo di didi tabi yo.
Yan Iwọn otutu Annealing Ti o dara julọ.
Yiyan ati lilo iwọn otutu annealing ti ko tọ jẹ ọna miiran awọn abajade PCR ni aṣiṣe ninu.
Nigba miiran, iṣesi ko lọ bi a ti pinnu. O fẹ lati dinku iwọn otutu annealing lati le dẹrọ iṣesi aṣeyọri kan.
Sibẹsibẹ, sokale awọn iwọn otutu mu ki awọn Iseese ti eke positives ati alakoko dimers irisi.
O ṣe pataki lati jẹrisi igbekale ti tẹ yo nigba lilo awọn awo PCR bi o ṣe jẹ afihan ti o dara ti yiyan iwọn otutu annealing to pe.
Awọn iranlọwọ sọfitiwia apẹrẹ alakoko pẹlu apẹrẹ, ipese iwọn otutu annealing ti o tọ pẹlu idinku taara aṣiṣe ni awọn awo PCR.
Ṣe o nilo awo PCR ti o ga julọ?
Ni irú ti o ti a ti considering ibi ti lati wa a gbẹkẹle olupese tiPCR farahan. Ma ṣe wa mọ nitori pe o wa ni aye to tọ.
Inúuretẹ ibi lati kan si wafun awọn ọja didara ati iṣẹ ni idiyele ti kii yoo fọ banki naa.
Akoko ifiweranṣẹ: Oṣu Kẹwa-30-2021