קריאָוויאַלסקאַמאַנלי געניצט פֿאַר די קריכעניק סטאָרידזש פון צעל שורות און אנדערע קריטיש בייאַלאַדזשיקאַל מאַטעריאַלס, אין דעוואַרס אָנגעפילט מיט פליסיק ניטראָגען.

עס זענען עטלעכע סטאַגעס ינוואַלווד אין די מצליח פּרעזערוויישאַן פון סעלז אין פליסיק ניטראָגען. די יקערדיק פּרינציפּ איז אַ פּאַמעלעך פרירן, די פּינטלעך טעכניק באטייטיק דעפּענדס אויף די צעל טיפּ און קריאָפּראָטעקטאַנט געוויינט. עס זענען עטלעכע זיכערקייַט קאַנסידעריישאַנז און בעסטער פּראַקטיסיז צו נעמען אין חשבון ווען סטאָרידזש סעלז אין אַזאַ נידעריק טעמפּעראַטורעס.

דעם פּאָסטן יימז צו געבן אַן איבערבליק פון ווי קריאָוויאַלס זענען סטאָרד אין פליסיק ניטראָגען.

וואָס זענען קריאָוויאַלז

קריאָטיס זענען קליין, קאַפּט ווייאַלז דיזיינד פֿאַר סטאָרינג פליסיק סאַמפּאַלז אין גאָר נידעריק טעמפּעראַטורעס. זיי ענשור אַז סעלז אפגעהיט אין קריאָפּראַטעקטאַנט טאָן ניט קומען אין דירעקט קאָנטאַקט מיט די פליסיק ניטראָגען, מינימיזעד די ריזיקירן פון סעליאַלער בראָך בשעת די עקסטראַדינג נידינג ווירקונג פון פליסיק ניצל ווירקונג פון פליסיק ניצל ווירקונג פון פליסיק ניצל ווירקונג פון פליסיק ניצל ווירקונג פון פליסיק ניטראָגען.

די ווייאַלז זענען יוזשאַוואַלי בנימצא אין אַ פאַרשיידנקייַט פון וואַליומז און דיזיינז - זיי קענען זיין ינעווייניק אָדער ויסווייניק טרעדיד מיט פלאַך אָדער ראַונדיד באַטאַמז. סטערילע און ניט-סטערילע פֿאָרמאַטירונגען זענען אויך בנימצא.

ווער ניצטסיראָוויאַלסצו קראָם סעלז אין פליסיק ניטראָגען

א קייט פון NHS און פּריוואַט לאַבאָראַטאָריעס, ווי געזונט ווי פאָרשונג אינסטיטוציעס וואָס ספּעשאַלייזיז אין שנור בלוט באַנקינג, עפּיטעליאַל סעלל ביאָלאָגי, ימימאָלאָגי און סטעם צעל ביאָלאָגי נוצן קריאָטיאַלס צו קריאָטיוואַלז צו קריאָטיוואַלז.

סעלז אפגעהיט אין דעם וועג אַרייַננעמען ב און ה סעלז, טשאַראַטאָפּאָועטיק סטעם און פּראָגנאַטאָר, ינטעסטאַנאַל סעלז, מאַקראָפאַגעס, נק סעלז און פּלוריפּאָטענט סטאַמז.

איבערבליק ווי צו קראָם קריאָוויאַלס אין פליסיק ניטראָגען

קריפּרעססערוואַטיאָן איז אַ פּראָצעס וואָס ייַנגעמאַכץ סעלז און אנדערע בייאַלאַדזשיקאַל קאַנסטראַקץ דורך קאָאָלינג זיי צו זייער נידעריק טעמפּעראַטורעס. סעלז קענען זיין סטאָרד אין פליסיק ניטראָגען פֿאַר יאָרן אָן אָנווער פון צעל ווייאַבילאַטי. דאָס איז אַ אַוטליין פון די פּראָוסידזשערז.

קאַמפּרעשאָן פון צעל

די פּינטלעך אופֿן פֿאַר פּריפּערינג סאַמפּאַלז וועט בייַטן דיפּענדינג אויף די צעל טיפּ, אָבער אין אַלגעמיין, די סעלז זענען געזאמלט און סענטריפוגעד צו אַנטוויקלען אַ צעל-רייַך שרייטל. דעם שרייטל איז דערנאָך ריסאַספּענדיד אין די סופּערנאַטאַנט געמישט מיט קריאָפּראָטעקטאַנט אָדער אַ קריפּרעססערווער מיטל.

קריאָפּרעססערוואַטיאָן מעדיום

דעם מיטל איז אָנגעשטעלט צו ופהיטן סעלז אין נידעריק טעמפּעראַטור ינווייראַנמאַנץ, זיי וועלן זיין אונטערטעניק צו דורך ינכיבאַטינג די פאָרמירונג פון ינטראַ און עקסטראַסעללולאַר קריסטאַלז און דערפאר צעל טויט. זייער ראָלע איז צו צושטעלן אַ זיכער, פּראַטעקטיוו סוויווע פֿאַר סעלז און געוועבן בעשאַס די ייַז קאַלט, סטאָרידזש און טאָוינג פּראַסעסאַז.

A medium such as fresh frozen plasma (FFP), heparinised plasmalyte solution or serum-free, animal component-free solutions is mixed with cryoprotectants such as dimethyl sulphoxide (DMSO) or glycerol.

די שייַעך-ליקוויסיאַפייד מוסטער שרייטל איז אַלאַקווייט אין פּאָליפּראָפּילענע קריאָוויאַלס אַזאַ וויסוזשאָו אַסיס בייאָמעדיקאַל פירמע Crygenic Storage Vials.

עס איז וויכטיק נישט צו אָוווערפילד די קריאָוויאַלס, ווייַל דאָס וועט פאַרגרעסערן די ריזיקירן פון קראַקינג און די מעגלעך מעלדונג פון אינהאַלט (1).

קאַנטראָולד פרירן קורס

אין אַלגעמיין, אַ פּאַמעלעך קאַנטראָולד פרירן קורס איז אָנגעשטעלט פֿאַר די געראָטן קריפערסערוויישאַן פון סעלז.

נאָך סאַמפּאַלז זענען אַלאַקוואַקאַט אין קריאָגעניק ווייאַלז, זיי זענען געשטעלט אויף אייז אָדער אין אַ 4 ℃ פרידזשידער און די ייַז קאַלט פּראָצעדור איז סטאַרטעד ין 5 מינוט. ווי אַ גענעראַל פירער, סעלז זענען קולד אין אַ קורס פון -1 צו -3 פּער מינוט (2). דאָס איז אַטשיווד מיט אַ פּראָגראַממאַבלע קולער אָדער דורך פּלייסינג ווייאַלז אין אַ ינסאַלייטיד קעסטל געשטעלט אין אַ ינסאַלייטיד קעסטל געשטעלט אין אַ ינסאַלייטיד קעסטל געשטעלט אין אַ ינסאַלייטיד קעסטל געשטעלט אין אַ -70 ° C צו -90 ° C קאַנטראָולד קורס פריזער.

אַריבערפירן צו פליסיק ניטראָגען

די פאַרפרוירן קריאָגעניק ווייאַלז זענען דעמאָלט טראַנספערד צו אַ פליסיק ניטראָגען טאַנק פֿאַר ינדעפאַנאַט פּיריאַדז צוגעשטעלט אַ טעמפּעראַטור פון ווייניקער ווי -135 ℃ איז מיינטיינד.

די הינטער-נידעריק טעמפּעראַטורעס קענען זיין באקומען דורך טבילה אין די פליסיק אָדער פארע פאַסע ניטראָגען.

פליסיק אָדער פארע פאַסע?

סטאָרידזש אין פליסיק פאַסע ניטראָגען איז באַוווסט צו האַלטן די קאַלט טעמפּעראַטור מיט אַבסאָלוט קאָנסיסטענסי, אָבער איז אָפט נישט רעקאַמענדיד פֿאַר די פאלגענדע סיבות:

• די נויט פֿאַר גרויס וואַליומז (טיפקייַט) פון פליסיק ניטראָגען וואָס איז אַ פּאָטענציעל ריזיקירן. ברענט אָדער אַספיקסיאַטיאָן רעכט צו דעם איז אַ פאַקטיש ריזיקירן.
• דאַקיומענטאַד קאַסעס פון קרייַז-קאַנטאַמאַניישאַן דורך ינפעקטיאָוס אגענטן, אַזאַ ווי AsperGillus, HEP B און וויראַל פאַרשפּרייטן דורך די פליסיק ניטראָגען מעדיום (2,3)
• די פּאָטענציעל פֿאַר פליסיק ניטראָגען צו רינען אין די ווייאַלז בעשאַס טבילה. ווען אַוועקגענומען פון סטאָרידזש און וואָרמד צו צימער טעמפּעראַטור, די ניטראָגען ראַפּאַדלי יקספּאַנדז. דעריבער, די וויאַל קען צעשמעטערן ווען אַוועקגענומען פון פליסיק ניטראָגען סטאָרידזש, קריייטינג אַ ריזיקירן פון ביידע פליענדיק דעבריס און ויסשטעלן צו די אינהאַלט (1, 4).

פֿאַר די סיבות, די אַלטראַ טעמפּעראַטור סטאָרידזש איז מערסט קאַמאַנלי אין פארע פייז ניטראָגען. ווען סאַמפּאַלז מוזן זיין סטאָרד אין די פליסיק פאַסע, ספּעשאַלייזד קריאָפלעקס טובינג זאָל זיין געוויינט.

די כיסאָרן פון די פארע איז אַז אַ ווערטיקאַל טעמפּעראַטור גראַדיענט קענען פּאַסירן ריזאַלטינג אין טעמפּעראַטור פלאַקטשויישאַנז צווישן -135 ℃ און -190 ℃. דאָס נעסעססאַטעס אָפּגעהיט און פלייַסיק מאָניטאָרינג פון פליסיק ניטראָגען לעוועלס און טעמפּעראַטור ווערייישאַנז (5).

פילע מאַניאַפאַקטשערערז רעקאָמענדירן אַז קריאָטיאַלז זענען פּאַסיק פֿאַר סטאָרידזש אַראָפּ צו -135 ℃ אָדער פֿאַר נוצן אין די פארע פאַסע.

טאָינג דיין קריאָפּרעססערווד סעלז

די טאָינג פּראָצעדור איז סטרעספאַל פֿאַר אַ פאַרפרוירן קולטור, און געהעריק האַנדלינג און טעכניק איז פארלאנגט צו ענשור אָפּטימאַל ווייאַבילאַטי, אָפּזוך און פאַנגקשאַנאַליטי פון די סעלז. די פּינטלעך טאָינג פּראָטאָקאָלס דעפּענדס אויף ספּעציפיש צעל טייפּס. אָבער, גיך טאָינג איז געהאלטן נאָרמאַל צו:

• פאַרמינערן קיין פּראַל אויף סעליאַלער אָפּזוך
• הילף צו רעדוצירן די ויסשטעלן צייט צו די סאָליעס פאָרשטעלן אין די ייַז קאַלט מעדיע
• מינאַמייז קיין שעדיקן דורך אייז רעקריסטאַלליסאַטיאָן

וואַסער באַטס, קרעל באַטעס, אָדער ספּעשאַלייזד אָטאַמייטיד ינסטראַמאַנץ זענען אָפט געניצט צו טאַ סאַמפּאַלז.

רובֿ אָפט 1 צעל שורה איז טאָד אין אַ מאָל פֿאַר 1-2 מינוט, דורך דזשענטלי סווערלינג אין אַ 37 ℃ וואַסער וואַנע ביז עס איז נאָר אַ קליין ביסל פון אייז לינקס אין די וויאַל איידער זיי זענען געוואשן אין אַ פּרעוואַרמד וווּקס מיטל.

פֿאַר עטלעכע סעלז אַזאַ ווי מאַממאַליאַן עמבריאָוז, פּאַמעלעך וואָרמינג איז יקערדיק פֿאַר זייער ניצל.

די סעלז זענען איצט גרייט פֿאַר צעל קולטור, צעל אפגעזונדערטקייט, אָדער אין דעם פאַל פון העמאַטאָפּאָיעטיק סטעם סעלז - ווייאַבילאַטי שטעלט זיך - ווייאַבילאַטי שטודיום צו גאַראַנטירן די אָרנטלעכקייַט סטאַם סעלז איידער מיאָילאָאַבלע סטאַמז.

עס איז נאָרמאַל פּראַקטיסיז צו נעמען קליין אַליקוואַץ פון די פּרעוואַשעד מוסטער געניצט צו דורכפירן אַ צעל ציילן צו באַשטימען צעל קאַנסאַנטריישאַנז פֿאַר פּלייטינג אין קולטור. איר קענען דעריבער אַססעסס די רעזולטאַטן פון צעל אפגעזונדערטקייט פּראָוסידזשערז און באַשטימען צעל ווייאַבילאַטי.

בעסטער פּראַקטיסיז פֿאַר סטאָרידזש פון קריאָטיס

די מצליח קריפּרעססערוואַטיאָן פון סאַמפּאַלז סטאָרד אין קריאָוויאַלס דעפּענדס אויף פילע יסודות אין די פּראָטאָקאָל אַרייַנגערעכנט געהעריק סטאָרידזש און רעקאָרדירן בעכעסקעם.

• שפּאַלטן סעלז צווישן סטאָרידזש לאָוקיישאַנז- אויב וואַליומז לאָזן, שפּאַלטן סעלז צווישן ווייאַלז און קראָם זיי אין באַזונדער לאָוקיישאַנז צו רעדוצירן די ריזיקירן פון מוסטער אָנווער רעכט צו ויסריכט פייליערז.
• פאַרמייַדן קרייַז-קאַנטאַמאַניישאַן- אָפּט פֿאַר איין-נוצן סטעריל קריאָגעניק ווייאַלז אָדער אַוטאָקלאַווע איידער סאַבסאַקוואַנט נוצן
• ניצן די ווייאַלאַז פֿאַר דיין סעלז- ווייאַלז קומען אין אַ פאַרשיידנקייַט פון וואַליומז צווישן 1 און 5 מל. ויסמיידן אָוווערפילינג וויאַלז צו רעדוצירן די ריזיקירן פון קראַקינג.
• סעלעקט ינערלעך אָדער פונדרויסנדיק טרעדיד קריאָגעניק ווייאַלז- ינערלעך טרעעדעד וויאַלז זענען רעקאַמענדיד דורך עטלעכע אוניווערסיטעטן פֿאַר זיכערקייַט מיטלען - זיי קענען אויך פאַרמייַדן קאַנטאַמאַניישאַן בעשאַס פילונג אָדער סטאָרד אין די פליסיק ניטראָגען.
• פאַרמייַדן ליקאַדזש- נוצן בי-ינדזשעקטיד סתימות מאָולדיד אין די שרויף-היטל אָדער אָ-רינגס צו פאַרמייַדן ליקינג און קאַנטאַמאַניישאַן.
• ניצן 2 ד באַרקאָדעס און פירמע וויאַלז- צו ענשור טראַסעאַביליטי, ווייאַלז מיט גרויס שרייבן געביטן געבן יעדער וויאַל צו זיין טויגן מיטן נאָמען. 2 ד באַרקאָדעס קענען העלפן מיט סטאָרידזש פאַרוואַלטונג און רעקאָרדירן בעכעסקעם. קאָליר קאָדעד קאַפּס זענען נוציק פֿאַר גרינגער לעגיטימאַציע.
• טויגן סטאָרידזש וישאַלט- צו ענשור סעלז זענען נישט פאַרפאַלן, סטאָרידזש שיפּס זאָל קעסיידער מאָניטאָר די טעמפּעראַטור און פליסיק ניטראָגען לעוועלס. אַלאַרמס זאָל זיין פּאַסיק פֿאַר פלינק ניצערס פון ערראָרס.

זיכערקייַט פּריקאָשאַנז

פליסיק ניטראָגען איז געווארן פּראָסט פיר אין מאָדערן פאָרשונג אָבער קאַריז די ריזיקירן פון ערנסט שאָדן אויב געוויינט פאַלש.

געהעריק פערזענלעכע פּראַטעקטיוו עקוויפּמענט (PPE) זאָל זיין וואָרן צו מינאַמייז די ריזיקירן פון פראָסטביטע, ברענט און אנדערע אַדווערס ינסאַדאַנץ ווען האַנדלינג פליסיק ניטראָגען. טראָגן

• קריאָגעניק גלאַווז
• לאַבאָראַטאָריע מאַנטל
• פּראַל קעגנשטעליק פול פּנים שילד וואָס אויך קאָווערס די האַלדז
• פארמאכט-פינגער פונ פוס שיכלעך
• ספּלאַשפּראָאָף פּלאַסטיק פאַרטעך

פליסיק ניטראָגען ריפרידזשערייטערז זאָל זיין שטעלן אין געזונט-ווענאַלייטיד געביטן צו מינאַמייז די ריזיקירן פון אַספיקסיאַטיאָן - יסקייפּט ניטראָגען וואַפּאָריזעס און דיספּלייסיז אַטמאַסבעריק זויערשטאָף. גרויס סטאָרז זאָל האָבן נידעריק זויערשטאָף שרעק סיסטעמען.

ארבעטן אין פּערז ווען האַנדלינג פליסיק ניטראָגען איז ידעאַל און די נוצן פון אַרויס פון נאָרמאַל אַרבעט שעה זאָל זיין פּראָוכיבאַטאַד.

קריאָוויאַלס צו שטיצן דיין וואָרקפלאָוו

סוזשאָו אַסיס ביאָמעדיקאַל פירמע אָפפערס אַ ברייט סעלעקציע פון ​​פּראָדוקטן וואָס טרעפן דיין קריפּרעססערוואַטיאָן דאַרף פֿאַר פאַרשידענע טייפּס פון סעלז. דער פּאָרטפעל כולל אַ קייט פון טובעסאַז געזונט ווי אַ קייט פון סטערילע קריאָוויאַלס.

אונדזער קריאָוויאַלס זענען:

• לאַב שרויף היטל 0.5 מל 1.5 מל 2.0 מל לעבן קריאָוויאַל קריאָגעניק ווייאַלז קאַניקאַל דנאָ קריאָטובע מיט גאַסקאַט

  ● 0.5 מל, 1.5 מל, 2.0 מל ספּעציטיפיק, מיט רעקל אָדער אָן רעקל
  ● קאַניקאַל אָדער זיך שטייענדיק פּלאַן, סטערילע אָדער ניט-סטערילע זענען ביידע בנימצא
  ● שרויף היטל טובז זענען געמאכט פון מעדיציניש מיינונג פּאָליפּראָפּילענע
  ● פּפּ קריאָטבע וויאַלז קענען זיין ריפּיטידלי פאַרפרוירן און טאָד
  ● די פונדרויסנדיק היטל פּלאַן קענען רעדוצירן די ינאַמאַניישאַן מאַשמאָעס בעשאַס מוסטער באַהאַנדלונג.
  ● שרויף היטל קריאָגעניק טובז וניווערסאַל שרויף פֿעדעם פֿאַר נוצן
  ● טובז פּאַסיק מערסט פּראָסט ראָוטערז
  ● קריאָגעניק רער אָ-רינג טובז, סטאַנדאַרד 1-אינטש און 2-אינטש, 48 Well, 81well, 96well, 96well און 100well Freezer באָקסעס
  ● אַוטאָקלאַוואַבלע צו 121 ° C און redzable צו -86 ° C

  טייל קיין	מאַטעריאַל	באַנד	היטלקאָליר	פּיסי /זעקל	באַגס / פאַל
  ACT05-BL-N	PP	0.5 מל	שוואַרץ, געל, בלוי, רויט, לילאַ, ווייַס	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5 מל	שוואַרץ, געל, בלוי, רויט, לילאַ, ווייַס	500	10
  אַקט 15-בל-נוו	PP	1.5 מל	שוואַרץ, געל, בלוי, רויט, לילאַ, ווייַס	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0מל	שוואַרץ, געל, בלוי, רויט, לילאַ, ווייַס	500	10