נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן און די מאַגנעטיק קראַץ

הקדמה

וואָס איז נוקלע זויער יקסטראַקשאַן?

אין די זייער סימפּלאַסט פון טערמינען, נוקלע זויער יקסטראַקשאַן איז די באַזייַטיקונג פון די רנאַ און / אָדער דנאַ פון אַ מוסטער און אַלע די וידעפדיק וואָס איז ניט נייטיק. דער פּראָצעס פון יקסטראַקשאַן ייוואַלייץ די נוקלעיק אַסאַדז פון אַ מוסטער און ייעלדס זיי אין די פאָרעם פון אַ קאַנסאַנטרייטאַד עלוסט, פריי פון דילואַנץ און קאַנטאַמאַנאַנץ וואָס קען ווירקן קיין דאַונסטרים אַפּלאַקיישאַנז.

אַפּלאַקיישאַנז פון נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן

פּיוקס פון נוקלעיק אַסאַדז זענען געניצט אין אַ שעפע פון ​​פאַרשידענע אַפּלאַקיישאַנז, ריינדזשינג אַריבער קייפל פאַרשידענע ינדאַסטריז. העאַלטהקאַרע איז טאָמער די געגנט ווו עס איז געניצט רובֿ, מיט פּיוראַפייד רנאַ און דנאַ פארלאנגט פֿאַר אַ באַלעבאָס פון פאַרשידענע קידס טעסטינג צוועקן.

אַפּלאַקיישאַנז פון נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן אין כעלטקער אַרייַננעמען:

- פּקר און קפּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן

- ווייַטער דור סיקוואַנסינג (נגס)

- קאַנסטראַקשאַן-באזירט סנפּ גענאָטיפּינג

- מענגע-באזירט גענאָטיפּטינג

- ריסטריקשאַן ענזיים דיידזשעסטשאַן

- אַנאַליזעס ניצן מאַדאַפייינג ענזימעס (למשל ליגיישאַן און קלאָונינג)

עס זענען אויך אנדערע פעלדער ווייַטער פון כעלטקער ווו נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן איז געניצט, אַרייַנגערעכנט אָבער נישט לימיטעד צו פאָטערשאַפט טעסטינג, פאָרענסיקס און גענאָמיקס און גענאָמיקס.

אַ קורץ געשיכטע פון ​​נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן

דנאַ יקסטראַקשאַןדאַטעס צוריק אַ לאַנג וועג, מיט דער ערשטער באַוווסט אפגעזונדערטקייט, איר האָט דורכגעקאָכט דורך אַ שווייצער דאָקטער געהייסן פרידריטש מיעסטשער אין 1869. מיזערהער איז געווען כאָופּינג צו סאָלווע די פונדאַמענטאַל פּרינסאַפּאַלז פון סעלז. נאָך פיילינג מיט לימפאָסיטעס, ער איז ביכולת צו קריגן אַ גראָב אָפּזעצנ זיך פון דנאַ פון לעוקאָסיטעס געפֿונען אין ייקאַנז אויף דיסקאַרדיד באַנדאַזשיז. ער האט דאָס דורך אַדינג זויער און דעריבער אַלקאַלי צו די צעל צו לאָזן די סיטאָפּלאַסץ פון די צעל און דעריבער דעוועלאָפּעד אַ פּראָטאָקאָל צו באַזונדער די דנאַ פון די אנדערע פּראָטעינס.

נאָך מיעסטשער ס ערד-ברייקינג פאָרשונג, פילע אנדערע סייאַנטיס האָבן שוין צו שטייַגן און אַנטוויקלען טעקניקס צו יזאָלירן און רייניקן דנאַ. Edwin Joseph קאָהן, אַ פּראָטעין געלערנטער דעוועלאָפּעד פילע טעקניקס פֿאַר פּראָטעין פּיוראַפייז בעשאַס וווו 2. ער איז געווען פאַראַנטוואָרטלעך פֿאַר ייסאַלייטינג די סערום אַלבומין בראָכצאָל פון בלוט פּלאַזמע, וואָס איז וויכטיק אין מיינטיינינג די אָסמאָטיק דרוק אין די בלוט כלים. דאָס איז געווען קריטיש פֿאַר בעכעסקעם זעלנער לעבעדיק.

אין 1953 פראַנסיס קריקק, צוזאַמען מיט Rosalind Franklin און James Watson, באשלאסן די סטרוקטור פון דנאַ, ווייַזונג אַז עס איז געווען קאַמיינד פון צוויי סטראַנדז פון לאַנג קייטן פון נוקלעאָטידס. דעם ברייקטרו ופדעקונג פּאַוועד דעם וועג פֿאַר מעסעלז און סטאַהל, וואָס זענען ביכולת צו אַנטוויקלען אַ געדיכטקייַט גראַדיענט סענטריפוגאַטיאָן פּראָטאָקאָל צו יזאָלירן די האַלב-קאַנסערוואַטיוו רעפּלאַקיישאַן פון דנאַ בעשאַס זייער 1958 עקספּערץ פון דנאַ 1958 עקספּערימענט.

טעקניקס פון נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן

וואָס זענען די 4 סטאַגעס פון דנאַ יקסטראַקשאַן?
אַלע יקסטראַקשאַן מעטהאָדס קאָכן אַראָפּ צו דער זעלביקער פונדאַמענטאַל טריט.

צעל דיסראַפּשאַן. דער בינע, אויך באקאנט ווי צעל ליסיס, ינוואַלווז ברייקינג אַראָפּ די צעל וואַנט און / אָדער די צעל מעמבראַנע, אין סדר מעלדונג די ינטראַ-סעללולאַר פלוידס מיט די ינטערעס פון אינטערעס.

באַזייַטיקונג פון אַנוואָנטיד דעבריס. דאָס כולל מעמבראַנע ליפּידס, פּראָטעינס און אנדערע אַנוואָנטיד נוקלעיק אַסאַדז וואָס קענען אַרייַנמישנ זיך מיט דאַונסטרים אַפּלאַקיישאַנז.

איזאלאציע. עס זענען אַ נומער פון פאַרשידענע וועגן צו יזאָלירן די נוקליייק אַסאַדז פון אינטערעס פון די קלירד ליסאַטע איר באשאפן, וואָס פאַלן צווישן צוויי הויפּט קאַטעגאָריעס: לייזונג באזירט אָדער האַרט שטאַט (זען ווייַטער אָפּטיילונג).

קאַנסאַנטריישאַן. נאָך די נוקלעיק אַסידז זענען אפגעזונדערט פון אַלע אנדערע קאַנטאַמאַנאַנץ און דילוענץ, זיי זענען דערלאנגט אין אַ העכסט-קאַנסאַנטרייטאַד עלואַטע.

די צוויי טייפּס פון יקסטראַקשאַן
עס זענען צוויי טייפּס פון נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן - לייזונג באזירט מעטהאָדס און האַרט שטאַט מעטהאָדס. די לייזונג באזירט אופֿן איז אויך באקאנט ווי כעמישער עקסטראַקטיאָן, ווי עס ינוואַלווז ניצן קעמיקאַלז צו ברעכן אַראָפּ די צעל און אַקסעס די קערן מאַטעריאַל. דאָס קען זיין ניצן אָדער אָרגאַניק קאַמפּאַונדז אַזאַ ווי פענאָל און קלאָראָופאָרם, אָדער די ווייניקער שעדלעך און דעריבער מער רעקאַמענדיד ינאָרגאַניק קאַמפּאַונדז אַזאַ ווי פּראָטעינאַסע ק אָדער סילינגאַ געל.

ביישפילן פון פאַרשידענע כעמיש יקסטראַקשאַן מעטהאָדס צו ברעכן אַראָפּ אַ צעל אַרייַננעמען:

- אָסמאָטיק ראַפּטשערינג פון מעמבראַנע

- ענזימאַטיק דיידזשעסטשאַן פון צעל וואַנט

- סאָלוביליסאַטיאָן פון מעמבראַנע

- מיט וואַשפּולווער

- מיט אַלקאַלי באַהאַנדלונג

האַרט שטאַט טעקניקס, אויך באקאנט ווי מאַקאַניקאַל מעטהאָדס, ינוואַלווז עקספּלויטיטינג ווי דנאַ ינטעראַקץ מיט אַ האַרט סאַבסטרייט. דורך סאַלעקטינג אַ קרעל אָדער מאַלאַקיול וואָס די דנאַ וועט בינדן אַנטו אָבער די אַנאַלייט וועט נישט, עס איז מעגלעך צו שיידן די צוויי. ביישפילן פון האַרט-פאַסע יקסטראַקשאַן טעקניקס אַרייַנגערעכנט ניצן סילאַקאַ און מאַגנעטיק קרעלן.

מאַגנעטיק קראַץ יקסטראַקשאַן דערקלערט

די מאַגנעטיק קראַץ אופֿן
די פּאָטענציעל פֿאַר יקסטראַקשאַן ניצן מאַגנעטיק קרעלן איז געווען ערשטער דערקענט אין אַ יו. עס. פּאַטענט פיילד דורך טרעוואָר כאָקינס, פֿאַר די ווהיטעהעאַד אינסטיטוט פאָרשונג ינסטיטושאַן. דער פּאַטענט יקנאַלידזשד אַז עס איז געווען מעגלעך צו עקסטראַקט גענעטיק מאַטעריאַל דורך ביינדינג זיי צו אַ האַרט שטיצן טרעגער, וואָס קען זיין אַ מאַגנעטיק קרעל. דער פּרינציפּ איז אַז איר נוצן אַ העכסט פאַנגקשאַנאַל קרעלן פון וואָס די גענעטיק מאַטעריאַל וועט בינדן אַנטו, וואָס קענען זיין אפגעשיידט פון די סופּערנאַטאַנט דורך אַפּלייינג אַ מאַגנעטיק קראַפט צו די אַרויס פון די שיף.

פארוואס נוצן מאַגנעטיק קראַץ יקסטראַקשאַן?
מאַגנעטיק קראַץ טעכנאָלאָגיע איז שיין ינקריסינגלי פאַרשפּרייט, רעכט צו דער פּאָטענציעל עס האלט פֿאַר גיך און עפעקטיוו יקסטראַקשאַן פּראָוסידזשערז. אין די לעצטע צייט עס זענען געווען דיוועלאַפּמאַנץ פון העכסט פאַנגקשאַנאַלייזד מאַגנעטיק קרעלן מיט פּאַסיק באַפער סיסטעמען, וואָס האָבן מעגלעך אָטאַמיישאַן פון נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן און אַ וואָרקפלאָוו וואָס איז זייער מיטל ליכט און פּרייַז-עפעקטיוו. מאַדרעך מאַגנעטיק קראַץ, מעטהאָדס טאָן ניט אַרייַנציען די סענטריפוגאַטיאָן סטעפּס וואָס קענען גרונט שערן פאָרסעס וואָס ברעכן זיך מער ברעקלעך פון דנאַ. דעם מיטל אַז מער סטראַנדז פון דנאַ בלייבן בעשאָלעם, וואָס איז וויכטיק אין גענאָמיקס טעסטינג.