ווי פיל מוסטער זאָל מיר לייגן צו מיין פּקר אָפּרוף?

אפילו אין טעאָריע, איין מאַלקולעלע פון ​​דער מוסטער וואָלט זיין גענוג, גרעסערע אַמאַונץ פון דנאַ זענען טיפּיקלי געניצט פֿאַר אַ קלאַסיש פּקר, פֿאַר אַ למשל פון גענעראַלאַן דנאַ און ווי קליין ווי 1 פּג פון פּלאַסמיד דנאַ און ווי קליין ווי 1 פּג פון פּלאַסמיד דנאַ. די אָפּטימאַל סומע דעפּענדס לאַרגעלי אויף די נומער פון עקזעמפלארן פון די ציל סיקוואַנס און אויף די קאַמפּלעקסיטי.

אויב זייער קליין מוסטער איז געניצט, אַ קאָראַספּאַנדינג פאַרגרעסערן אין די נומער פון אַמפּלאַפאַקיישאַן סייקליז וועט זיין דארף צו באַקומען אַ גענוג סומע פון ​​פּראָדוקט. אַ טאַק פּאָלימעראַסע וואָס איז געניצט פֿאַר רובֿ פּסקר יקספּעראַמאַנץ קען נישט האָבן אַ קערעקשאַן פונקציע (3 '-5' עקסאָנוקליין אַקטיוויטעט); אַזוי, ערראָרס געשעעניש בעשאַס אַמפּלאַפאַקיישאַן קענען ניט זיין קערעקטאַד. די העכער די נומער פון סייקאַלז, די מער פאַרשפּרייט די אַמפּלאַפאַקיישאַן פון פלאָד פּראָדוקט וועט זיין. אויב, אויף די אנדערע האַנט, די סומע פון ​​מוסטער איז אויך הויך, די מאַשמאָעס פון אָנפאָרמער, אַנילינג צו אנדערע (ניט דערט פּראָצענט פּאָזיטיוו) סיקווענסעס, און די פאָרמירונג פון אָנפאַנגער דימערס, וואָס וועט פאַרגרעסערן אין די אַמפּליפיקאַטיאָן פון ביי-פּראָדוקטן. אין פילע קאַסעס, דנאַ איז אפגעזונדערט פון צעל קאַלטשערז אָדער פון מייקראָואָרגאַניזאַמז און דערנאָך געניצט ווי אַ פּקר מוסטער. נאָך רייניקונג, עס איז נייטיק צו באַשליסן די קאַנסאַנטריישאַן פון די דנאַ צו קענען דעפינירן די באַנד וואָס איז פארלאנגט פֿאַר די PCR סעטאַפּ. אויב אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס קען דינען צו צושטעלן אַן אָפּשאַצונג, דעם אופֿן איז ווייַט פון פּינטלעך. ווו-וויז ספּעקטראָפאָטאָמאַטרי איז געגרינדעט ווי די גאָלד סטאַנדאַרט פֿאַר די קוואַנטאַפאַקיישאַן פון נוקלעיק אַסאַדז; דעם דירעקט און דעריבער גרינג און שנעל אופֿן מיטלען אַבזאָרבאַנס פון דער מוסטער 260 נם, און קאַנסאַנטריישאַן איז קאַלקיאַלייטיד מיט די הילף פון אַ קאַנווערזשאַן פאַקטאָר.

אויב די דנאַ קאַנסאַנטריישאַן איז זייער נידעריק, אָבער (1 μ ג / מל דסנדנאַ), אָדער אויב עס איז קאַנטאַמאַנייטאַד מיט סאַבסטאַנסיז אַז אויך אַרייַנציען אין די 260 נם קייט (למשל רנאַ, פּראָטעין, סאָלץ), דעם אופֿן וועט דערגרייכן זייַן לימיטיישאַנז. אין דעם פאַל, זייער נידעריק קאַנסאַנטריישאַנז, די רידינגז וועט באַלד ווערן צו ומפּינקטלעך צו נוצן, און קאַנטאַמאַניישאַנז וועט פירן צו (מאל ריזיק) אָווועררעסמאַנטיישאַן פון די פאַקטיש ווערט. אין דעם פאַל, קוואַנטאַפאַקיישאַן ניצן פלורעסאַנס קען פאָרשטעלן אַן אָלטערנאַטיוו. די טעכניק איז באזירט אויף די נוצן פון פלורעסאַנט פאַרב וואָס ביינדז ספּאַסיפיקלי צו דסנדנאַ בלויז די קאָמפּלעקס קאַמפּרייזיז נוקלעיק זויער און פאַרב איז יקסייטאַד דורך די ליכט, און דאָס איז דערנאָך אַרויסלאָזן ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט ליכט פון אַ ביסל העכער ווייוולינג. דאָ, די ינטענסיטי פון פלואָרעסאַנט סיגנאַל איז פּראַפּאָרשאַנאַל צו די סומע פון ​​דנאַ, און פֿאַר דיטערמאַנינג די קאַנסאַנטריישאַן עס איז עוואַלואַטעד אין באַציונג צו אַ נאָרמאַל ויסבייג צו אַ נאָרמאַל ויסבייג צו אַ נאָרמאַל ויסבייג צו אַ נאָרמאַל ויסבייג. די אַדוואַנטידזשיז פון דעם אופֿן מנוחה אויף די ספּעציפישקייט פון די בונד, וואָס יקסקלודז די פונדרויסנדיק ינפלואַנסיז באַקענענ דורך קאַנטאַמאַניישאַן, ווי געזונט ווי אויף די ריזאַלטינג פיייקייט צו דיטעקט זייער נידעריק קאַנסאַנטריישאַנז פון דנאַ. די סוטאַביליטי פון יעדער אופֿן דעפּענדס דער הויפּט אויף מוסטער קאַנסאַנטריישאַן און ריינקייַט; אין פילע קאַסעס, עס קען אפילו זיין קעדייַיק צו צולייגן ביידע מעטהאָדס אין פּאַראַלעל.