QoniqishlarOdatda, hujayra liniyalarini va boshqa tanqidiy biologik materiallarni suyuq azot bilan to'ldirilgan deyuarlarda kriologik saqlash uchun ishlatiladi.

Suyuq azotdagi hujayralarni muvaffaqiyatli saqlashga bir necha bosqichlar mavjud. Asosiy printsip qanchalik sekin muzlatish bo'lsa, aynan ish bilan band bo'lgan aniq texnikalar hujayra turiga va ishlatilgan krujkalar turiga bog'liq. Xavfsizlik masalalari va hujayralarni bunday past haroratlarda saqlashda hisobga olish uchun eng yaxshi amaliyotlar mavjud.

Ushbu post qandaydir kaydlar uchun suyuq azotda saqlanadigan narsa haqida umumiy ma'lumot berishga qaratilgan.

Kayfiyat nima

Kaydiylar kichik, maydalangan haroratlarda suyuq namunalarni saqlash uchun mo'ljallangan plyonkalar. Ular krvetektektorda saqlanadigan hujayralar suyuq azotning haddan tashqari sovushidan foydalangan holda, giyohvand moddalarni sovutish ta'siridan foydalangan holda suyuq azot bilan to'g'ridan-to'g'ri aloqa o'rnatmasliklarini ta'minlaydilar.

Shovqinlar odatda bir qator jild va dizaynlarda mavjud - ular ichki yoki tashqi yoki tashqi ost tubsiz pastki qismida bo'lishi mumkin. Steril va steril bo'lmagan formatlar ham mavjud.

Kim foydalanadiKiroviallarhujayralarni suyuq azotda saqlash uchun

NHS va xususiy laboratoriyalar, shuningdek, shnurlar bankida ixtisoslashgan ilmiy-tadqiqot institutlari, epiteliya hujayra biologiyasi, immunologiya va ildizli biologiya biologiya kibrlar kibr-xalani kibrlar uchun kibrlardan foydalanadilar.

Shu tarzda saqlanadigan hujayralar, Cho hujayralari, gematopietik poyga va naslli hujayralar, makridomalar, miyeloma, miyeloma, nk hujayralari, nk hujayralari, nk hujayralari va plyurotent bezaklari.

Qichqiriqlarni qanday qilib suyuq azot bilan saqlash haqida umumiy nuqtai nazar

Kenglashtirish - bu hujayralar va boshqa biologik qurilishlarni juda past haroratlarga sovishini yaxshilaydigan jarayon. Hujayralar bir necha yillar davomida suyuq azotda hujayralarning hayotiyligini yo'qotmasdan saqlanishi mumkin. Bu ish bilan band bo'lgan protseduralarning konturidir.

Uyali aloqa

Namunalarni tayyorlashning aniq usuli hujayra turiga qarab o'zgaradi, ammo umuman olganda, hujayralar hujayralar to'planib, kameralarga boy pellet ishlab chiqarishga undiriladi. Keyin bu pellet krujkropotektori yoki kristalli vositasi bilan aralashtirilgan g'ayritabiiy ravishda qayta tiklanadi.

Kvopreologik muhit

Ushbu vosita past haroratli muhitdagi hujayralarni saqlash uchun foydalaniladi, ular ichidagi ichak va hujayralar va kamera o'limini shakllantirishga duchor bo'ladilar. Ularning roli muzlash, saqlash va eritish jarayonlarida hujayralar va to'qimalar uchun xavfsiz, himoya muhitini ta'minlash.

Yangi muzlatilgan plazma (FFP) kabi vosita, gekekmalyte eritmasi yoki zardobli echimlar - bu demopotektitantlar, masalan, demetrotters (dmso) yoki glitserin kabi kresoprotektitantlar bilan aralashtirilgan.

Qayta liklangan namunali pelet polipropilen kristallar kabi atastotiv deb topiladiSuzhou Ace biommedika kompaniyasi kriogenik saqlash flakonlari.

Bu kristaviyatlarni engib o'tish kerak emas, chunki bu yoriqlar va tarkibni olib tashlash xavfini oshiradi (1).

Boshqariladigan muzlatish darajasi

Umuman olganda, hujayralarning muvaffaqiyatli kriopreali uchun sekin boshqariladigan muzlatgichli stavka ishlatiladi.

Namunalar kriogen flakonlarga ajratilgandan so'ng, ular nam muzga yoki 4 soat muzlatgichga joylashtiriladi va muzlatish tartibi 5 daqiqada boshlanadi. Umumiy qo'llanma sifatida hujayralar bir daqiqada -1 dan -3 gacha bo'lgan tezlikda sovutiladi (2). Bunga dasturlashtiriladigan salqin va flakonlashtirishdan foydalangan holda, A -70 ° C dan -90 ° C gacha bo'lgan muzlatgichni muzlatgichda joylashtiring.

Suyuq azotga o'tkazish

Keyin muzlatilgan kriogen flakonlar noma'lum muddatli suyuq azot idishga o'tkaziladi.

Ushbu ultra past haroratni suyuqlik yoki bug 'fazasi zetotida erishi mumkin.

Suyuq yoki bug fazasi?

Suyuq fazada azotning sovuq haroratini mutlaq mustahkamlik bilan saqlab qolish, ammo ko'pincha quyidagi sabablarga ko'ra tavsiya etilmaydi:

• Siyosat azotining katta hajmli (chuqurligi) zarurati, bu potentsial xavfdir. Bu tufayli kuyish yoki asfiksiya haqiqiy xavfdir.
• Asaperillus kabi yuqumli agentlar tomonidan yuqumli bo'lgan holatlar, greGillus, gep b va suyuq azot muhiti orqali virusli ravishda tarqalish (2,3)
• Suyuq azot uchun flakonlarga cho'milish paytida oqishning imkoniyatlari. Saqlash paytida va xona haroratiga olib tashlanganda, azot tez rivojlanadi. Binobarin, suyuq azot solinadigan ombordan olib tashlanganida, flakonda parchalanish, ikkala uchib ketayotgan qoldiqlardan xavf tug'diradi va tarkibga ta'sir ko'rsatadi (1, 4).

Shu sabablarga ko'ra, ultra haroratli saqlash ko'pincha bug 'fazasi azotida. Namunalar suyuq bosqichda saqlanishi kerak bo'lsa, ixtisoslashtirilgan krichleks naychasidan foydalanish kerak.

Buvali fazasiga salbiy tomoni shundaki, vertikal haroratning gradienti harorat o'zgarishi natijasida -135 ℃ va -190 ℃. Bu suyuq azot darajasini va harorat o'zgarishi (5) ning ehtiyotkorlik va tigitik monitoringni talab qiladi.

Ko'plab ishlab chiqaruvchilar kristantsiyalarni faqat -135 ℃ gacha yoki faqat bug 'fazasida foydalanish uchun mos bo'lishlarini tavsiya qiladi.

Kuproqlaringizni eriting

Maydoni muzlatilgan madaniyat uchun stressli, hujayralarning tiklanishini, tiklanishini va funktsionalligini ta'minlash uchun to'g'ri foydalanish va texnikani to'g'ri ishlash va texnikani talab qiladi. O'rta muddatli protokollar aniq hujayra turlariga bog'liq bo'ladi. Biroq, tez eritish standart deb hisoblanadi:

• Uyali tiklanishga ta'sir qilish
• Muzlash vositalarida mavjud bo'lgan pulparastlarga ta'sir qilish vaqtini kamaytirishga yordam beradi
• Muz kristalizatsiyasi bilan har qanday zararni minimallashtirish

Suv vannalari, bükozozli vanna yoki ixtisoslashtirilgan avtomatlashtirilgan asboblar namunalarini erishi uchun ishlatiladi.

Ko'pincha 1 ta hujayra chizig'i 1-2 daqiqa davomida eraladi, shuning uchun 37 ° Suv hammomida suzib ketadi, chunki ular yirtilgan o'sish muhitida yuvinmasdan oldin, 37 ° Suv hammomida mayda-chuyda shishiradi.

Omonik embrionlari kabi ba'zi hujayralar uchun ularning omon qolishi uchun sekin isinish juda muhimdir.

Endi hujayralar hujayra madaniyatiga, hujayra izolyatsiya qilinishiga yoki gematoziyetik ildiz hujayralariga tayyor - miellubiy terapiyadan oldin donor ildiz hujayralarining yaxlitligini kafolatlash uchun maqsadli tadqiqotlar.

Madaniyatdagi plitkalarni tozalash uchun hujayra kontsentratsiyasini aniqlash uchun kamera punktlarini bajarish uchun ishlatiladigan pog'onali namunaning kichik aliotlarini olish odatiy holdir. Keyin hujayrali izolyatsiya protseduralari natijalarini baholashingiz va hujayralarning hayotiyligini aniqlashingiz mumkin.

Qiqiyani saqlash uchun eng yaxshi amaliyot

Kulguslarda saqlanadigan namunalarning muvaffaqiyatli askarlari protokoldagi ko'plab elementlarga bog'liq, shu jumladan to'g'ri saqlash va hisobni yuritish.

• Saqlash joylari orasidagi yorliqlar- Agar hajmlar piglik hujayralarini ajratish va uskuna etishmovchiligi tufayli namuna yo'qotish xavfini kamaytirish uchun alohida joylarda saqlash.
• O'zaro ifloslanishning oldini olingKeyingi foydalanishdan oldin bir martalik sterilli krentogen fashallar yoki AutoCLave-ni tanlang
• Sizning hujayralaringiz uchun tegishli ravishda o'lchamdagi flakonlardan foydalaning- Fials 1 dan 5 mln. Oralig'ida. Yorilish xavfini kamaytirish uchun flakonlarni haddan tashqari oshirib bermaslikka harakat qiling.
• Ichki yoki tashqi tomondan tishli kredogen fasha-ni tanlang- Xavfsizlik choralari uchun ba'zi universitetlar tomonidan ichki tishli flakonlar tomonidan ichki universitetlar tomonidan tavsiya etiladi - ular to'ldirish paytida yoki suyuq azotda saqlanadigan holatlarda ifloslanishni oldini olishlari mumkin.
• Oqishning oldini olish- Nehmin va ifloslanishning oldini olish uchun vintli qopqoq yoki O-halqalarga shakllangan ikkita in'ektsiya qilingan muhrlardan foydalaning.
• Shtrix-shkri va yorliqlardan foydalaning- Ta'minlikni ta'minlash uchun katta yozish joylari bo'lgan flakonlar har bir flakonni etarli darajada yoritilishi mumkin. 2D shtrixlar saqlashni boshqarish va hisobni yuritish bilan yordam berishi mumkin. Rangli kodlangan qopqoqlar osonligini aniqlash uchun foydalidir.
• Saqlash uchun etarli xizmat ko'rsatish- hujayralar yo'qolishini ta'minlash uchun idishlar harorat va suyuq azot darajasini doimiy ravishda kuzatib borishi kerak. Signallarni xatolardan foydalanib, signalizatsiya o'rnatilishi kerak.

Xavfsizlik choralari

Suyuq azot zamonaviy tadqiqotlarda odatiy holga aylandi, ammo noto'g'ri shikastlanganda jiddiy shikastlanish xavfini tug'diradi.

Sovuq azotini qo'llashda sovuq himoya vositalarini (PPE) taqqoslash kerak (PPE) suyuq azotni qo'llashda muzlash, kuyish va boshqa salbiy hodisalarni minimallashtirish uchun kiyilishi kerak. Kiymoq

• Kriogen qo'lqop
• Laboratoriya paltosi
• Shuningdek, bo'yinni qamrab oladigan to'liq yuz qalqon
• Yopiq-oyoq poyafzallari
• Spas-plastik apron

Suyuq azot sovutgichlari asoratlar xavfini minimallashtirish uchun yaxshi havalandırılanga joylashtirish kerak - qochib ketgan azot atmosfera kislorodini buzadi. Katta hajmli do'konlarda past kislorod signalizatsiya tizimlari bo'lishi kerak.

Suyuq azotni iste'mol qilishda bir-juft bo'lib ishlash ideal va normal ish soatlaridan tashqarida foydalanish taqiqlanishi kerak.

Ish oqimingizni qo'llab-quvvatlash uchun kristanlar

Suzhou Ace bioomiatsiya kompaniyasi turli xil hujayralar uchun kriopreateratsion ehtiyojlaringizni qondiradigan mahsulotlarning keng tanlovini taklif etadi. Portfel bir qator nayzalar qatoriga juda ko'p steril krikovlar mavjud.

Kiruvchimiz:

• Laboratoriya vintlari 0,5ml 1,5mm 2.0 Kayden krifogen krifogen krifogen krifogen krifogen köfotuşlık

  ● 0,5ml, 1,5ml, 2.0mli spetsifikatsiya, yubka yoki yubkasiz
  ● Konstruktsiya yoki o'z-o'zidan turuvchi dizayn, steril yoki steril bo'lmagan ikkalasi ham mavjud
  ● Vintli qoplar naychalari polipropilendan tayyorlanadi
  ● PP Wordotube flakonlari bir necha marta muzlatilgan va eritilishi mumkin
  ● Tashqi qopqoq dizayni namunaviy davolash paytida ifloslanish ehtimolini kamaytirishi mumkin.
  ● Vintlip kriogenik naychalari Foydalanish uchun universal vintli iplar
  ● Tubkalar eng keng tarqalgan rotorlarga mos keladi
  ● Krifogenik naycha O-Ring naychalari 1 dyuymli va 2 dyuym, 48well, 81well, 96well va 100well muzlatgich qutilari
  ● 121 ° C dan va -86 ° C gacha avtoklavli va muzlash mumkin

  Yo'q	Material	Hajmi	QalpoqchaRang	Kompyuterlar /Sumka	Sumkalar / ish
  ACT05-BL-n	PP	0,5ml	Qora, sariq, ko'k, qizil, binafsha, oq	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5ml	Qora, sariq, ko'k, qizil, binafsha, oq	500	10
  Akt15-BL-nw	PP	1.5ml	Qora, sariq, ko'k, qizil, binafsha, oq	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0M	Qora, sariq, ko'k, qizil, binafsha, oq	500	10