Як запечатати планшет для ПЛР

вступ

Пластини ПЛР, які були основним продуктом лабораторії протягом багатьох років, стають ще більш поширеними в сучасному середовищі, оскільки лабораторії збільшують свою пропускну здатність і все більше використовують автоматизацію в своїх робочих процесах. Досягти цих цілей, зберігаючи при цьому точність і цілісність експериментів, може бути важко. Однією з поширених областей, де можуть статися помилки, є пломбуванняПластини ПЛР, з поганою технікою, що дозволяє випаровувати зразки, змінюючи рН і, отже, порушуючи ферментативні функції та сприяючи забрудненню. Навчання запечатувати aПластина ПЛРправильно усуває ці ризики та забезпечує відтворювані результати.

Знайдіть правильну пломбу для вашої ПЛР-планшети

Пластинчасті кришки проти плівкових ущільнювачів проти кришок
Ковпачкиє хорошим способом герметично заклеїти вашу пластину, водночас даючи вам можливість дуже легко розпечатувати та повторно запечатувати пластину, як вам потрібно, без будь-яких відходів. Однак у кепок є кілька ключових недоліків.

По-перше, вам доведеться придбати конкретну сумісну шапку, що робить їх неуніверсальними. Ви повинні переконатися, що обраний вами ковпачок підходить до пластини, що залежить від її виробника, і вибрати куполоподібний або плоский на основі термоциклера, який ви використовуєте.

По-друге, застосування ковпачків до планшета може бути дуже повторюваним і виснажливим, з ризиком перехресного зараження, якщо ви поставите не той ковпачок на неправильну лунку.

Хоча плівкові пломби менш гнучкі щодо видалення та заміни, вони дуже універсальні, оскільки підходять до будь-якого типу ПЛР-планшету, незалежно від виробника. Їх можна просто обрізати до потрібного розміру, що робить їх дуже ефектними.

Інший варіант – кришка-тарілка. Вони забезпечують менший захист, ніж кришки та ущільнювачі, і в основному використовуються лише для короткострокового покриття, щоб запобігти забрудненню.

Оптичні та плівкові пломби

Незалежно від того, чи потрібна вам оптична, прозора пломба чиплівка з алюмінієвої фольгизапечатати вашу тарілку вирішує ваш експериментальний формат.Плівки для оптичної герметизаціїпрозорі, що дозволяє спостерігати за зразками, захищаючи їх і запобігаючи випаровуванню. Вони також особливо корисні в експериментах qPCR, які передбачають проведення високоточних вимірювань флуоресценції безпосередньо з планшета; у цьому випадку вам знадобиться герметизуюча плівка, яка фільтрує якомога менше флуоресценції. Важливо переконатися, що пломба або ковпачок, які ви використовуєте, мають достатньо високий рівень оптичної прозорості для забезпечення точності показань.

Плівки з фольги підходять для будь-яких зразків, чутливих до світла, або для зберігання при температурі нижче 80°C. З цієї причини для більшості зразків, призначених для тривалого зберігання, потрібна плівка з фольги. Плівки з фольги також проколюються, що корисно або для дослідження окремих лунок, або для перенесення зразків голками. Це може відбуватися вручну або як частина роботизованої платформи.

Також врахуйте, що агресивні речовини, які включають кислоти, луги або розчинники, вимагають ущільнення, яке може протистояти їм, і в цьому випадку ущільнення з фольги, ймовірно, більш доречне.

Клей проти термозварювальної плівки
Ущільнення клейкою плівкоюдуже зрозумілі та легко застосовуються. Все, що вам потрібно, це накласти герметик на пластину та використати простий інструмент-аплікатор, щоб натиснути та сформувати щільне герметизацію.

Термоущільнювачі є більш досконалими, забезпечуючи довговічніше ущільнення зі зниженою швидкістю випаровування порівняно зі звичайним клейовим ущільненням. Цей варіант підходить, якщо ви хочете зберігати зразки в довгостроковій перспективі, хоча це супроводжується додатковою вимогою до обладнання для запечатування пластин.

Як запечатати планшет для ПЛР

Спосіб запечатування пластин

Самоклеючий

1. Переконайтеся, що ви працюєте на рівній і стійкій робочій поверхні

2. Вийміть плівку з упаковки та зніміть підкладку

3. Обережно помістіть пломбу на планшет, переконавшись, що всі лунки закриті

4. Використовуйте інструмент-аплікатор, щоб натиснути на пластину. Почніть з одного кінця і переходьте до іншого, рівномірно натискаючи

5. Повторіть це кілька разів

6. Проведіть аплікатором навколо зовнішніх лунок, щоб переконатися, що вони також належним чином запечатані.

Термічні ущільнення

Термозварювання відбувається шляхом плавлення плівки до краю кожної лунки за допомогою запечатувача пластин. Щоб використовувати апарат для термозварювання, зверніться до інструкцій, наданих виробником обладнання. Переконайтеся, що виробник, від якого ви купуєте обладнання, є авторитетним, оскільки дуже важливо, щоб ущільнювач був належним, ефективним і водонепроникним.

Верхні поради щодо ущільнення пластин

a. Натискаючи на ущільнення, рухайтеся як у горизонтальному, так і у вертикальному напрямках, щоб забезпечити належне ущільнення

b. Завжди добре проводити тестовий запуск того, що ви робите, і це не відрізняється від ущільнення пластин. Перш ніж використовувати тарілку зі зразками, випробуйте порожню тарілку.

в. Під час перевірки зніміть пломбу та подивіться, чи клей правильно приклеївся, без зазорів. Візуальне представлення цього є в першому довідковому документі. Якщо ви не заклеїли пластину належним чином, коли ви знімете пломбу, з’являться прогалини, де клей не з’єднався з пластиною повністю.

d. Для транспортування та транспортування зразків вам може бути корисно застосувати пластикову пломбу поверх пломби з фольги для додаткового захисту (особливо від проколювання).

д. Завжди переконайтеся, що під час нанесення плівки немає нерівностей або зморшок – це призведе до протікання та випаровування