Коли обсяги піпетки від 0,2 до 5 мкл точність та точність піпетки мають надзвичайно важливе значення, хороша техніка піпетки є важливою, оскільки помилки поводження є більш очевидними з невеликими обсягами.
Оскільки більше уваги зосереджено на зменшенні реагентів та витрат, менші обсяги користуються великим попитом, наприклад, для підготовки реакцій PCR -MasterMix або ферментів. Але трубопроводи з невеликими обсягами від 0,2 - 5 мкл ставить нові проблеми для точності та точності піпетки. Наступні моменти є важливими:
- ПІПЕТЕТ І КОРОБКА: Завжди вибирайте піпетку з найнижчим можливим номінальним об'ємом та найменшим наконечником, щоб підтримувати подушку повітря якомога меншим. Під час піпетки 1 мкл, наприклад, виберіть піпетку 0,25 - 2,5 мкл і відповідний наконечник, а не піпетку 1 - 10 мкл.
- Калібрування та обслуговування: важливо, щоб ваші піпетки були належним чином калібровані та підтримані. Невеликі коригування та зламані деталі на піпетці призводять до масового збільшення систематичних та випадкових значень помилок. Калібрування відповідно до ISO 8655 повинен проводитись раз на рік.
- Поети з позитивним переміщенням: Перевірте, чи є у вас піпетка з позитивним переміщенням з діапазоном низького об'єму у вашій лабораторії. Взагалі, використання цього типу піпетки призводить до кращого результату піпетки з точки зору точності та точності, ніж для класичних піпетків з повітряним подушкою.
- Спробуйте використовувати більші обсяги: ви можете розглянути розбавлення зразка на піпетку більші обсяги з однаковою кількістю в кінцевій реакції. Це може зменшити помилки піпетки з дуже невеликими обсягами зразка.
Окрім хорошого інструменту, дослідник повинен мати дуже гарну техніку піпетки. Зверніть особливу увагу на наступні кроки:
- Прикріплення наконечника: Не заклиньте піпетку на наконечник, оскільки це може пошкодити кінець тонкого наконечника, що спричиняє перенаправлення рідини або пошкодити отвір. Нанесіть тиск світла лише при прикріпленні наконечника і використовуйте піпетку з навантаженим наконечником конусом.
- Тримаючи піпетку: Не тримайте піпетку в руці, чекаючи центрифуги, циклера тощо. Внутрішня частина піпетки буде нагрітись і призведе до подушки повітря, що призводить до відхилення від встановленого гучності при піпетці.
- Попереднє замороження: зволоження повітря всередині наконечника і піпетки готує наконечник для зразка і уникає випаровування при аспірації об'єму передачі.
- Вертикальне прагнення: Це дуже важливо при обробці невеликих обсягів, щоб уникнути капілярного ефекту, який виникає, коли піпетка утримується під кутом.
- Глибина занурення: занурюйте наконечник якомога менше, щоб запобігти потраплянню рідини на кінчик через капілярний ефект. Правило великого пальця: чим менший кінчик і об'єм, тим нижня глибина занурення. Ми рекомендуємо максимум 2 мм при трубці невеликих обсягів.
- Віддача під кутом 45 °: Оптимальний витік рідини гарантується, коли піпетка утримується під кутом 45 °.
- Контакт з стінкою судин або рідкою поверхнею: невеликі обсяги можна належним чином відпустити лише тоді, коли наконечник тримається до стінки судин або занурений у рідину. Навіть остання крапля з кінчика може бути точно відпущена.
- Видув: вибух є обов'язковим після відпущення низьких обсягів, щоб віддати навіть останню краплю рідини, присутньої на кінчику. Вибух також слід здійснювати до стіни судна. Будьте обережні, щоб не вносити бульбашки повітря у зразок при здійсненні вибуху на поверхні рідини.
Час посади: 18 лютого 20121