Криовиалларгадәттә күзәнәк линияләрен һәм башка критик биологик материалларны криоген саклау өчен, сыек азот белән тутырылган чыкларда кулланыла.

Сыек азоттагы күзәнәкләрне уңышлы саклауда берничә этап бар. Төп принцип әкрен туңу булса да, кулланылган төгәл техника күзәнәк төренә һәм кулланылган криопротектантка бәйле. Мондый түбән температурада күзәнәкләрне саклаганда берничә куркынычсызлык һәм иң яхшы тәҗрибә бар.

Бу язма криовиалларның сыек азотта ничек саклануы турында күзаллау бирүне максат итеп куя.

Нәрсә ул криовиаллар

Криовиаллар бик түбән температурада сыек үрнәкләрне саклау өчен эшләнгән кечкенә, капланган касәләр. Алар криопротектантта сакланган күзәнәкләрнең сыек азот белән туры элемтәгә кермәвен тәэмин итәләр, кәрәзле ватылу куркынычын киметәләр, шул ук вакытта сыек азотның суыту эффектыннан файда күрәләр.

Касәләр гадәттә төрле күләмдә һәм дизайнда бар - алар эчке яки тышкы яктан яссы яки түгәрәк төб белән җепләнергә мөмкин. Стериль һәм стериль булмаган форматлар да бар.

Кем кулланаКировиалларКүзәнәкләрне сыек азотта сакларга

NHS һәм шәхси лабораторияләр, шулай ук ​​шнур кан банкы, эпителий күзәнәк биологиясе, иммунология һәм тамыр күзәнәк биологиясе белгечлеге алган тикшеренү учреждениеләре криопрезерв күзәнәкләрен криовиаль кулланалар.

Бу рәвешчә сакланган күзәнәкләргә В һәм Т күзәнәкләре, CHO күзәнәкләре, гематопоиетик тамыр һәм токым күзәнәкләре, гибридома, эчәк күзәнәкләре, макрофаглар, месенчималь тамыр һәм токым күзәнәкләре, моноцитлар, миелома, НК күзәнәкләре һәм плюрипотент тамыр күзәнәкләре керә.

Сыек азотта криовиалларны ничек саклау турында гомуми күзәтү

Крипопрезервация - күзәнәкләрне һәм башка биологик конструкцияләрне бик түбән температурада суытып саклый торган процесс. Күзәнәкләр сыек азотта еллар дәвамында күзәнәкнең яшәешен югалтмыйча сакланырга мөмкин. Бу кулланылган процедураларның планы.

Күзәнәк әзерләү

Samрнәкләр әзерләүнең төгәл ысулы күзәнәк төренә карап үзгәрәчәк, ләкин, гомумән алганда, күзәнәкләр туплана һәм центрифугацияләнә, күзәнәккә бай пелет. Аннары бу пелет криопротектант яки криопрезервация чарасы белән кушылган супернанатта реанимацияләнә.

Крипопрезервация урта

Бу медиа күзәнәкләрне түбән температурада саклау өчен кулланыла, алар күзәнәк һәм күзәнәктән тыш кристалллар барлыкка килүне тыялар һәм шуның аркасында күзәнәк үлемен кичерәчәкләр. Аларның роле - туңдыру, саклау һәм эретү процесслары вакытында күзәнәкләр һәм тукымалар өчен куркынычсыз, саклаучы мохит булдыру.

Яңа туңдырылган плазма (FFP), гепаринизацияләнгән плазмалит эремәсе яки серумсыз, хайван компоненты булмаган эремәләр диметил сульфоксиды (DMSO) яки глицерол кебек криопротектантлар белән кушылалар.

Кабат сыекланган үрнәк пелет полипропилен криовиалларына охшаганSuzhou Ace Biomedical Company Cryogenic Storage Vials.

Криовиалларны тутырмаска кирәк, чөнки бу ярылу куркынычын һәм эчтәлекне чыгару мөмкинлеген арттырачак (1).

Контроль туңдыру ставкасы

Гомумән, күзәнәкләрне уңышлы саклау өчен әкрен контроль туңдыру дәрәҗәсе кулланыла.

Samрнәкләр криоген касәләргә аликотацияләнгәннән соң, алар дымлы бозга яки 4 ℃ суыткычка урнаштырыла һәм 5 минут эчендә туңдыру процедурасы башлана. Гомуми кулланма буларак, күзәнәкләр минутына -1 - 3 ставкасында суытыла (2). Бу программалаштырыла торган суыткыч ярдәмендә яки касәләрне изоляцияләнгән тартмага –70 ° C - –90 ° C контроль ставкалар туңдыргычына куеп ирешелә.

Сыек азотка күчү

Аннары туңдырылган криоген касәләр сыек-азот танкына билгесез вакытка күчерелә, температура -135 less кимрәк булса.

Бу ультра түбән температураны сыек яки пар фазасы азотына чумдырып алырга мөмкин.

Сыек яки пар фазасы?

Сыек фазада азотны саклау салкын температураны абсолют эзлеклелектә саклый, ләкин түбәндәге сәбәпләр аркасында еш тәкъдим ителми:

• Потенциаль куркыныч булган сыек азотның зур күләменә (тирәнлегенә) ихтыяҗ. Моның аркасында яну яки асфиксиация чын куркыныч.
• Аспергиллус, В геп һәм вируслы сыек азот аша таралучы йогышлы агентлар тарафыннан зарарланган документлаштырылган очраклар (2,3)
• Чумдырылу вакытында сыек азотның касәләргә агып чыгу потенциалы. Саклаудан алып, бүлмә температурасына җылыткач, азот тиз арада киңәя. Димәк, касә сыек азот саклагычыннан алынганда ватылырга мөмкин, очу калдыкларыннан һәм эчтәлегенә тәэсир итү куркыныч тудыра (1, 4).

Бу сәбәпләр аркасында ультра түбән температураны саклау гадәттә пар фазасында азотта була. Samрнәкләр сыек фазада сакланырга тиеш булганда, махсус криофлекс торбалар кулланырга кирәк.

Пар фазасының тискәре ягы - вертикаль температура градиенты -135 ℃ -190 between арасында температураның үзгәрүенә китерергә мөмкин. Бу сыек азот дәрәҗәсен һәм температураның үзгәрүен игътибарлы һәм тырышып күзәтүне таләп итә (5).

Күпчелек җитештерүчеләр криовиалларны -135 storage кадәр сакларга яки пар парында гына кулланырга киңәш итәләр.

Сезнең крипопрезервацияләнгән күзәнәкләрегезне эретү

Эретү процедурасы туңдырылган культура өчен стресслы, һәм күзәнәкләрнең оптималь яшәешен, торгызылуын һәм эшләвен тәэмин итү өчен дөрес эшкәртү һәм техника кирәк. Төгәл эретү протоколлары аерым күзәнәк төрләренә бәйле булачак. Ләкин, тиз эретү стандарт санала:

• Кәрәзле торгызуга тәэсирне киметү
• Туңдыргыч медиада булган эремчекләргә экспозиция вакытын кыскартырга булыш
• Бозны рестрализацияләү аркасында барлык зыянны киметегез

Су мунчалары, мишәр ванналары, яки махсуслаштырылган автоматлаштырылган кораллар үрнәкләрне эретү өчен кулланыла.

Иң еш 1 күзәнәк сызыгы берьюлы 1-2 минутка эретелә, 37 ℃ су мунчасында әкрен генә йөзеп, касәдә аз гына боз калганчы, алар алдан әзерләнгән үсемлектә юылганчы.

Имезүчеләр яралгысы кебек кайбер күзәнәкләр өчен әкрен җылыну аларның яшәве өчен кирәк.

Күзәнәкләр хәзер күзәнәк культурасына, күзәнәкләрне изоляцияләүгә, яисә гаематопоиетик тамыр клеткаларына әзер - миелоаблиатив терапия алдыннан донор тамыр күзәнәкләренең бөтенлеген гарантияләү өчен яшәешне өйрәнү.

Мәдәнияттә каплау өчен күзәнәк концентрациясен билгеләү өчен күзәнәк санын башкару өчен кулланылган чистартылган үрнәкнең кечкенә аликотларын алу гадәти гадәт. Аннары сез күзәнәк изоляциясе процедуралары нәтиҗәләрен бәяли аласыз һәм күзәнәкнең яшәешен билгели аласыз.

Криовиалларны саклау өчен иң яхшы практикалар

Криовиалларда сакланган үрнәкләрне уңышлы саклау протоколдагы күп элементларга бәйле, шул исәптән дөрес саклау һәм язу.

• Саклау урыннары арасында күзәнәкләрне бүлегез- Әгәр күләм күләме рөхсәт итсә, күзәнәкләрне касәләр арасында бүлегез һәм җиһазларның ватылуы аркасында үрнәк югалту куркынычын киметү өчен аларны аерым урыннарда саклагыз.
• Crossзара пычрануны булдырмагыз- Соңгы куллану алдыннан бер тапкыр кулланылган стериль криоген касәләрне яки автоклавны сайлагыз
• Күзәнәкләрегез өчен тиешле зурлыктагы касәләрне кулланыгыз- касәләр 1-5 мм арасында. Ярылу куркынычын киметү өчен касәләрне артык тутырмагыз.
• Эчке яки тышкы җепле криоген касәләрне сайлагыз- Эчке җепле касәләр кайбер вузлар тарафыннан куркынычсызлык чаралары өчен тәкъдим ителә - алар шулай ук ​​сыек азотны тутырганда яки саклаганда пычрануны булдырмаска мөмкин.
• Агып китүне булдырмагыз- Агып чыгу һәм пычрану өчен винтовка яки О-боҗраларга формалашкан би-инжекцион мөһерләрне кулланыгыз.
• 2D штрих-код һәм ярлык касәләрен кулланыгыз- эзләнүчәнлекне тәэмин итү өчен, зур язу өлкәләре булган касәләр һәр касәгә тиешле маркировкалар ясарга мөмкинлек бирә. 2D штрих-код саклау һәм идарә итүдә булыша ала. Төсле кодлы капкалар җиңелрәк тану өчен файдалы.
• Тиешле саклау- Күзәнәкләр югалмасын өчен, саклагычлар температураны һәм сыек азот дәрәҗәсен даими күзәтергә тиеш. Сигнализация кулланучыларны хаталар турында кисәтергә тиеш.

Куркынычсызлык чаралары

Сыек азот хәзерге тикшеренүләрдә гадәти гадәткә әйләнде, ләкин дөрес кулланылмаса, җитди җәрәхәтләр китерә.

Сыек азот белән эшләгәндә салкын, яну һәм башка тискәре вакыйгалар куркынычын киметү өчен дөрес шәхси саклагыч җиһазлар (PPE) кияргә кирәк. Киегез

• Криогеник перчаткалар
• Лаборатория пальто
• Муенны каплый торган тәэсиргә чыдам тулы йөз калканы
• Ябык аяк киеме
• Пластик перрон

Асфиксиация куркынычын киметү өчен сыек азотлы суыткычлар яхшы җилләтелгән урыннарга урнаштырылырга тиеш - качкан азот парлаша һәм атмосфера кислородын алыштыра. Зур күләмле кибетләрдә кислород сигнализациясе аз булырга тиеш.

Сыек азот белән эшләгәндә парда эшләү идеаль һәм аны гадәти эш вакытыннан тыш куллану тыелырга тиеш.

Сезнең эш процессына булышу өчен криовиаллар

Suzhou Ace Biomedical компаниясе төрле күзәнәкләр өчен крипопрезервация ихтыяҗларын канәгатьләндерә торган продуктларның киң төрен тәкъдим итә. Портфолио трубалар спектрын, шулай ук ​​стериль криовиалларны үз эченә ала.

Безнең криовиаллар:

• Лаборатория винт капкасы 0,5мл 1,5мл 2,0мл криовиаль криоген касәләр конус асты криотуб белән савыт белән

  ● 0,5мл, 1,5мл, 2,0мл спецификация, юбка белән яки юбкасыз
  ● Коник яки үз-үзеңне тоту дизайны, стериль яки стериль булмаган икесе дә бар
  ● Винт капка трубалары медицина дәрәҗәсендәге полипропиленнан эшләнгән
  ● PP Cryotube шешәләрен кат-кат туңдырырга һәм эретергә мөмкин
  Cap Тышкы капка дизайны үрнәк эшкәртү вакытында пычрану ихтималын киметә ала.
  ● Винт капкасы криоген трубалар куллану өчен универсаль винт җепләр
  ● Трубалар иң еш очрый торган роторларга туры килә
  ● Криоген труба о-боҗр трубалары стандарт 1 дюйм һәм 2 дюйм, 48велл, 81велл ， 96велл һәм 100велл туңдыргыч тартмаларга туры килә.
  12 121 ° C кадәр автоматлаштырылган һәм -86 ° C кадәр туңдырыла торган

  NOК	МАТЕРИАЛ	Том	CAPТөс	PCS /БАГ	БАШЛАР / КАСС
  ACT05-BL-N	PP	0.5ML	Кара, сары, зәңгәр, кызыл, алсу, ак	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5ML	Кара, сары, зәңгәр, кызыл, алсу, ак	500	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5ML	Кара, сары, зәңгәр, кызыл, алсу, ак	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0ML	Кара, сары, зәңгәр, кызыл, алсу, ак	500	10