Процессларны стандартлаштыру аларның оптимизациясен, соңрак урнаштыру һәм гармонизацияне үз эченә ала, озак вакытлы оптималь эшләргә мөмкинлек бирә - кулланучыдан бәйсез. Стандартлаштыру югары сыйфатлы нәтиҗәләрне, шулай ук аларның үрчүчәнлеген һәм чагыштыруын тәэмин итә.
(Классик) PCR максаты - ышанычлы һәм репродуктив нәтиҗә ясау. Аерым кушымталар өчен уңышPCR продуктышулай ук актуаль. Бу реакцияләр өчен, үрнәкләр бозылмасын өчен һәм PCR эш процессы тотрыклы булып калсын өчен сак булырга кирәк. Аерым алганда, бу ялган позитив яки ялган тискәре нәтиҗәләргә китерергә яки хәтта PCR реакциясен тоткарларга мөмкин булган пычратулар кертүне киметүгә тәрҗемә ителә. Моннан тыш, реакция шартлары һәрбер үрнәк өчен мөмкин кадәр охшаш булырга тиеш, һәм шулай ук киләсе реакцияләргә (шул ук ысул белән) күчерелергә тиеш. Бу реакцияләр составына, велосипедта температура белән идарә итү төренә карый. Кулланучының хаталары, әлбәттә, мөмкин кадәр сакланырга тиеш.
Түбәндә, без PCR әзерләү вакытында һәм эшләгәндә очрый торган проблемаларны күрсәтәчәкбез - һәм PCR эш процессларын стандартлаштыру өчен кулланылган коралларга һәм куллану материалларына карата булган чишелешләргә карашлар.
Реакция әзерләү
Реакция компонентларын PCR-судноларга, яки тәлинкәләргә тарату, җиңелергә тиешле берничә проблеманы үз эченә ала:
Реакция шартлары
Аерым компонентларның төгәл һәм төгәл дозасы мөмкин булган иң охшаш реакция шартларына омтылганда алыштыргысыз. Яхшы үткәрү техникасына өстәп, дөрес коралны сайлау бик мөһим. PCR мастер-катнашмаларында еш ябышлыкны арттыручы яки күбек барлыкка китерүче матдәләр бар. Пипетинг процессы вакытында алар зур дымлануга китерәләрпипетта киңәшләре, шулай итеп торбаларның төгәллеген киметә. Турыдан-туры тарату системаларын яки дымга азрак булган альтернатив пипетка киңәшләрен куллану торба үткәрү процессының төгәллеген һәм төгәллеген яхшырта ала.
Пычратулар
Диспансерлау процессында аэрозоллар барлыкка килә, алар пипетаның эчләренә керергә рөхсәт ителсә, киләсе пипетинг адымында бүтән үрнәкне пычратырга мөмкин. Моны фильтр киңәшләре яки туры күчерү системалары кулланып кисәтеп була.
Кебек кулланукиңәшләр, PCR эш процессында кулланылган суднолар һәм тәлинкәләр үрнәкне бозучы яки нәтиҗәне ялганлаучы матдәләр булырга тиеш түгел. Аларга ДНК, DNases, RNases һәм PCR ингибиторы, шулай ук реакция вакытында материалдан агып чыга торган компонентлар керә - агып чыга торган матдәләр.
Кулланучының хата
Күпме үрнәк эшкәртелсә, хата куркынычы арта. Aрнәк дөрес булмаган савытка яки дөрес булмаган коега салынган очракта җиңел булырга мөмкин. Бу куркынычны скважиналарның җиңел билгеләре белән сизелерлек киметергә мөмкин. Тапшыру адымнарын автоматлаштыру аша, "кеше факторы", ягъни хаталар һәм кулланучылар белән бәйле вариацияләр минимальләштерелә, шулай итеп репродуктивлыкны арттыралар, аеруча кечкенә реакция күләмендә. Моның өчен эш станциясендә җитәрлек үлчәмле тотрыклылык тәлинкәләре кирәк. Беркетелгән штрих-кодлар өстәмә машина укуны тәэмин итә, бу бөтен процесс дәвамында үрнәк эзләүне гадиләштерә.
Термоциклерны программалаштыру
Инструментны программалаштыру күп вакыт таләп итә, шулай ук хата булырга мөмкин. Төрле PCR җылылык велосипедчы үзенчәлекләре бу процесс адымын гадиләштерү һәм иң мөһиме аны куркынычсыз итү өчен бергә эшли:
Easyиңел операция һәм кулланучының яхшы җитәкчелеге эффектив программалашуның нигезе булып тора. Бу фундаментка нигезләнеп, серсүз белән сакланган кулланучылар идарәсе үз программаларын бүтән кулланучылар үзгәртмәсен. Әгәр дә берничә велосипедчы (бер үк типтагы) кулланылса, программаны бер коралдан икенчесенә USB яки тоташу аша күчереп алу файдалы. Компьютер программалары компьютерда программалар, кулланучылар хокуклары һәм документлар белән үзәк һәм куркынычсыз идарә итә.
PCR эшли
Йөгерү вакытында реакция савытында ДНК көчәйтелә, анда һәр үрнәк бер үк, эзлекле реакция шартларына дучар булырга тиеш. Бу процесс өчен түбәндәге аспектлар актуаль:
Температура белән идарә итү
Температура белән идарә итүдә искиткеч төгәллек һәм велосипед блогының бер тигезлеге барлык үрнәкләрне хәтта температураны кондиционерлау өчен нигез булып тора. Heatingылыту һәм суыту элементларының югары сыйфаты (пельтиер элементлары), шулай ук аларның блокка тоташу ысулы - "кыр эффекты" дип аталган температураның туры килмәү куркынычын билгеләүче хәлиткеч факторлар.
Парлану
Аерым реакция компонентларының концентрацияләре парлану аркасында реакция барышында үзгәрергә тиеш түгел. Otherwiseгыйсә, бу бик азPCR продуктыбарлыкка килергә мөмкин, яисә бөтенләй юк. Шуңа күрә куркынычсыз мөһерне тәэмин итеп парлануны киметү бик мөһим. Бу очракта термоциклерның җылытылган капкасы һәм судно мөһере кулда эшли. Төрле мөһерләү вариантлары барPCR тәлинкәләре (сылтама: Мөһерләү мәкаләсе), шуның белән иң яхшы мөһер җылылык мөһере аша ирешелә. Башка ябылулар шулай ук яраклы булырга мөмкин, велосипед капкасының контакт басымы сайланган мөһергә көйләнә алса.
Озак вакытка төгәл һәм кабат чыгарыла торган нәтиҗәләрне саклау өчен процесс стандартлаштыру бар. Бу җиһазның һәрвакыт яхшы эштә булуын тәэмин итү өчен регуляр хезмәт күрсәтүне үз эченә ала. Барлык кулланыла торган әйберләр җитештерелгән барлык лотлар буенча эзлекле булырга тиеш, һәм аларның ышанычлы булуы гарантияләнергә тиеш.
Пост вакыты: 29-нчы ноябрь