Paano Magseal ng PCR Plate

Panimula

Mga plato ng PCR, isang staple ng laboratoryo sa loob ng maraming taon, ay nagiging mas laganap sa modernong setting habang pinalalaki ng mga laboratoryo ang kanilang throughput at lalong gumagamit ng automation sa loob ng kanilang mga daloy ng trabaho. Ang pagkamit ng mga layuning ito habang pinapanatili ang katumpakan at integridad ng mga eksperimento ay maaaring maging mahirap. Ang isa sa mga karaniwang lugar kung saan maaaring gumapang ang mga error ay ang pag-seal ngMga plato ng PCR, na may mahinang pamamaraan na nagpapahintulot sa pagsingaw ng mga sample, binabago ang pH at samakatuwid ay nakakagambala sa mga function ng enzymatic, at nag-aanyaya sa kontaminasyon. Pag-aaral kung paano magtatak aPlato ng PCRwastong inaalis ang mga panganib na ito at sinisigurado ang mga reproducible na resulta.

Hanapin ang Tamang Seal para sa iyong PCR Plate

Plate Caps vs. Film Seals vs. Lids
Mga capsay isang mahusay na paraan upang i-seal ang iyong plato ng masikip na selyo, habang nagbibigay pa rin sa iyo ng kakayahang umangkop upang napakadaling tanggalin at muling isara ang plato ayon sa kailangan mo nang walang anumang basura. Gayunpaman, ang mga takip ay may ilang pangunahing kawalan.

Una, kakailanganin mong bilhin ang partikular na cap na katugma, na ginagawang hindi ito maraming nalalaman. Kailangan mong tiyakin na ang takip na pipiliin mo ay akma sa plato, na nakadepende sa tagagawa nito, at piliin ang alinman sa domed o flat batay sa thermocycler na iyong ginagamit.

Pangalawa, ang paglalagay ng mga takip sa plato ay maaaring maging paulit-ulit at nakakapagod, na may panganib ng cross-contamination kung inilagay mo ang maling takip sa maling balon.

Bagama't hindi gaanong flexible ang mga film seal sa mga tuntunin ng pag-alis at pagpapalit, ang mga ito ay napaka-versatile dahil magkasya ang mga ito sa anumang uri ng PCR plate, nang hindi isinasaalang-alang kung sino ang gumawa. Maaari lamang silang gupitin sa laki, na ginagawang napakaepektibo.

Ang isa pang pagpipilian ay isang takip ng plato. Nag-aalok ang mga ito ng mas kaunting proteksyon na tinatakpan at tinatakan, at pangunahing ginagamit lamang para sa panandaliang takip upang maiwasan ang kontaminasyon.

Optical vs. Foil Film Seals

Kung kailangan mo ng isang optical, malinaw na selyo o isangpelikulang aluminyo foilupang i-seal ang iyong plato ay napagpasyahan ng iyong pang-eksperimentong format.Mga optical sealing filmay transparent upang payagan kang obserbahan ang mga sample, habang pinoprotektahan pa rin ang mga ito at pinipigilan ang pagsingaw. Partikular ding kapaki-pakinabang ang mga ito sa mga eksperimento sa qPCR na kinabibilangan ng paggawa ng napakatumpak na mga sukat ng fluorescence nang direkta mula sa plato, kung saan kakailanganin mo ng sealing film na nagpi-filter ng kaunting fluorescence hangga't maaari. Mahalagang tiyakin na ang seal o cap na iyong ginagamit ay may sapat na mataas na antas ng optical clarity upang matiyak na tumpak ang mga pagbabasa.

Ang mga foil film ay angkop para sa anumang sample na light sensitive o dapat itago sa ibaba 80°C. Para sa kadahilanang ito, ang karamihan sa mga sample na nakalaan para sa pangmatagalang imbakan ay mangangailangan ng isang foil film. Ang mga foil na pelikula ay nabubutas din, na kapaki-pakinabang para sa alinman sa pagsusuri ng mga indibidwal na balon, o para sa paglipat ng mga sample sa pamamagitan ng mga karayom. Maaari itong mangyari nang manu-mano o bilang bahagi ng isang robotic platform.

Isaalang-alang din na ang mga agresibong substance na kinabibilangan ng mga acid, base o solvent ay mangangailangan ng selyo na makatiis sa kanila, kung saan ang isang foil seal ay malamang na mas angkop.

Malagkit kumpara sa Heat Sealing Film
Malagkit na mga seal ng pelikulaay napaka straight-forward at madaling ilapat. Ang kailangan mo lang ay para sa isang user na ilapat ang selyo sa plato, at gumamit ng isang simpleng applicator tool upang pindutin ang pababa at bumuo ng isang mahigpit na selyo.

Ang mga heat seal ay mas advanced, na nagbibigay ng mas matagal na seal na nagpababa ng mga rate ng evaporation kumpara sa isang conventional adhesive seal. Ang pagpipiliang ito ay angkop kung ikaw ay naghahanap upang mag-imbak ng mga sample sa mahabang panahon, bagama't ito ay may karagdagang kinakailangan para sa plate sealing equipment.

Paano Magseal ng PCR Plate

Paraan ng Plate Sealing

Self-Adhesive

1. Tiyaking nagtatrabaho ka sa isang patag at matatag na worksurface

2. Alisin ang pelikula mula sa packaging nito, at alisin ang backing

3. Maingat na ilagay ang selyo sa plato, habang tinitiyak na ang lahat ng mga balon ay natatakpan

4. Gumamit ng applicator tool para ilapat ang pressure sa plate. Magsimula sa isang dulo at pumunta sa kabilang dulo, pindutin nang pantay-pantay

5. Ulitin ito nang maraming beses

6. Patakbuhin ang iyong applicator sa paligid ng mga balon sa labas, upang matiyak na ang mga ito ay maayos ding natatakan.

Mga Heat Seal

Gumagana ang mga heat seal sa pamamagitan ng pagtunaw ng pelikula sa gilid ng bawat balon, sa tulong ng isang plate sealer. Para magpatakbo ng heat sealer, sumangguni sa mga tagubiling ibinigay ng tagagawa ng kagamitan. Siguraduhin na ang tagagawa na pinagmumulan mo ng iyong kagamitan ay kagalang-galang, dahil napakahalaga na ang selyo ay wasto, mabisa at hindi tinatablan ng tubig.

Plate Sealing Top Tips

a. Kapag naglalagay ng presyon sa selyo, pumunta sa parehong pahalang at patayong direksyon upang matiyak ang tamang selyo

b. Palaging magandang kasanayan ang magpatakbo ng test run sa anumang ginagawa mo, at ito ay walang pinagkaiba sa plate sealing. Subukan gamit ang isang walang laman na plato bago gamitin ang isa na may mga sample.

c. Kapag sinusubukan, tanggalin ang selyo at tingnan kung ang pandikit ay nakadikit nang maayos, na walang mga puwang. Mayroong visual na representasyon nito sa unang reference na dokumento. Kung hindi mo naselyuhan nang maayos ang plato, kapag tinanggal mo ang seal ay magkakaroon ng mga puwang kung saan ang pandikit ay hindi pa ganap na nakadikit sa plato.

d. Para sa pagpapadala at pagdadala ng mga sample, maaari mong makitang makatutulong na maglagay ng plastic seal sa ibabaw ng foil seal para sa karagdagang proteksyon (lalo na sa pagbubutas).

e. Palaging tiyakin na walang mga bukol o kulubot kapag inilalapat ang pelikula - magdudulot ito ng mga tagas at pagsingaw