PCR garyndylaryny gazanda näme göz öňünde tutmaly?

Güýçlendirmek üçin üstünlikli reaksiýalar üçin, her taýýarlykda dogry konsentrasiýada aýratyn reaksiýa komponentleriniň bolmagy zerurdyr. Mundan başga-da, hapalanma ýüze çykmazlygy möhümdir.

Esasanam köp reaksiýa gurulmaly bolanda, her reagenti her gämä aýratyn geçirmegiň ýerine ussat garyndy diýilýän zat taýýarlanyldy. Öňünden düzülen garyndylar täjirçilik taýdan elýeterlidir, onda diňe nusga aýratyn komponentler (primer) we suw goşulýar. Ativea-da bolmasa, esasy garyndyny özüňiz taýýarlap bilersiňiz. Iki görnüşde-de garyndy şablonsyz her PCR gämisine paýlanýar we ahyrynda aýratyn DNK nusgasy goşulýar.

Ussat garyndyny ulanmagyň birnäçe artykmaçlygy bar: Birinjiden, ýeke-täk turba geçiriji ädimleriň sany azalýar. Şeýlelik bilen, turba geçiriji wagtynda ulanyjy ýalňyşlyklarynyň we hapalanmak töwekgelçiligi azaldylýar we elbetde wagt tygşytlanýar. Aslynda, has uly göwrüm dozalanýandygy sebäpli, turbanyň takyklygy hem has ýokarydyr. Turbalaryň tehniki maglumatlary barlanylanda düşünmek aňsat: Dozalanan göwrüm näçe kiçi bolsa, gyşarmalar hem şonça ýokary bolup biler. Preparationhli taýýarlyklaryň bir gämiden gelmegi birmeňzeşlige oňyn täsir edýär (gowy garylan bolsa). Bu, synaglaryň köpelmegini hem gowulandyrýar.

Ussat garyndyny taýýarlanyňyzda azyndan 10% goşmaça ses goşmaly (meselem, 10 taýýarlyk zerur bolsa, 11 esasynda hasaplaň), hatda iň soňky gämi hem dogry doldurylmaly. Şeýlelik bilen, (azajyk) turba geçiriji nädogrylyklar we ýuwujy serişdeleri öz içine alýan erginleri dozanyňyzda ýitginiň täsiri öwezini dolup biler. Erguwujy serişdeler polimerazalar we ussat garyndylar ýaly ferment erginlerinde bolup, adaty içki ýüzünde köpük emele gelmegine we galyndylara sebäp bolýar.turba maslahatlary.

Programmanyň we berilmeli suwuklygyň görnüşine baglylykda dogry turba geçiriji usuly (1) saýlanylmaly we degişli enjamlar saýlanmaly. Erguwujy serişdeleri öz içine alýan çözgütler üçin gönüden-göni süýşüriş ulgamy ýa-da howa ýassygy turbalarynyň alternatiwasy hökmünde “pes saklaýyş” turbageçirijileri maslahat berilýär. TäsiriACE PIPETTE maslahatesasanam gidrofobiki ýüzüne esaslanýar. Erguwujy serişdeleri öz içine alýan suwuklyklar içerde we daşarda galyndy film galdyrmaýar, şonuň üçin erginiň ýitgisini azaldyp bolar.

Componentshli komponentleriň takyk dozasyndan başga-da, taýýarlyklaryň hapalanmazlygy hem möhümdir. Highokary arassalygyň sarp edilýän materiallaryny ulanmak ýeterlik däl, sebäbi howa ýassygy turbasyndaky turba geçiriji turbada galan aerozollary öndürip biler. Aerozolyň düzümindäki DNK indiki turba geçiriji ädiminde bir nusgadan beýlekisine geçirilip bilner we şeýlelik bilen hapalanmaga sebäp bolup biler. Aboveokarda agzalan göni göçüriş ulgamlary hem bu töwekgelçiligi azaldyp biler. Howa ýassygy turbalary üçin, çüýşeleri, aerozollary we biomolekulalary saklap, turba konusyny goramak üçin süzgüç maslahatlaryny ulanmagyň manysy bar.


Iş wagty: Dekabr-06-2022