Düwürtiklerköplenç öýjük çyzyklaryny we beýleki möhüm biologiki materiallary, suwuk azot bilen doldurylan çyglarda saklamak üçin ulanylýar.

Suwuk azotdaky öýjükleri üstünlikli gorap saklamak üçin birnäçe tapgyr bar. Esasy ýörelge haýal doňmak bolsa-da, ulanylýan takyk tehnika öýjük görnüşine we ulanylýan krioprotektanta baglydyr. Öýjükleri şeýle pes temperaturada saklanyňyzda göz öňünde tutmaly birnäçe howpsuzlyk pikirleri we iň oňat tejribe bar.

Bu ýazgy, krowiallaryň suwuk azotda nädip saklanýandygy barada umumy maglumat bermegi maksat edinýär.

Kriviallar näme

Düwürtikler gaty pes temperaturada suwuk nusgalary saklamak üçin niýetlenen kiçijik, gaplanan flakonlar. Krioprotektantda saklanýan öýjükleriň suwuk azot bilen göni aragatnaşyga girmezligini üpjün edýär, suwuk azotyň aşa sowadyjy täsirinden peýdalanyp, öýjükli döwükleriň döremek howpuny azaldýar.

Gap-gaçlar, adatça, dürli göwrümlerde we dizaýnlarda bolýar - içerde ýa-da daşarda tekiz ýa-da tegelek düýbler bilen sapak edilip bilner. Steril we steril däl formatlar hem bar.

Kim ulanýarKirowiallarÖýjükleri suwuk azotda saklamak

NHS we hususy barlaghanalaryň birnäçesi, şeýle hem şnur gan banky, epitel öýjük biologiýasy, immunologiýa we öýjük biologiýasy boýunça ýöriteleşen gözleg edaralary kriopresiýa öýjüklerini ulanýarlar.

Bu görnüşde saklanylýan öýjüklere B we T öýjükleri, CHO öýjükleri, gematopoetiki baldak we nesil öýjükleri, gibridomalar, içege öýjükleri, makrofaglar, mesençimal baldak we nesil öýjükleri, monositler, miýeloma, NK öýjükleri we pluripotent baldak öýjükleri girýär.

Suwuk azotda kriwiallary nädip saklamalydygyna syn

Cryopreservation, öýjükleri we beýleki biologiki gurluşlary gaty pes temperaturada sowatmak arkaly saklaýan prosesdir. Öýjükler öýjükleriň ýaşaýyş ukyplylygyny ýitirmän birnäçe ýyllap suwuk azotda saklanyp bilner. Bu ulanylýan proseduralaryň gysgaça beýany.

Öýjükleri taýýarlamak

Nusgalary taýýarlamagyň takyk usuly öýjügiň görnüşine baglylykda üýtgeýär, ýöne umuman öýjüklere baý bölejigi ösdürmek üçin öýjükler ýygnalýar we merkezden gaçyrylýar. Soňra bu bölejik, krioprotektant ýa-da gorag serişdesi bilen garylan adatdan daşary tebigatda gaýtadan ýerleşdirilýär.

Gorag serişdesi

Bu serişde, pes temperaturaly şertlerde öýjükleri saklamak üçin ulanylýar, içerki we öýjükden daşary kristallaryň emele gelmegine päsgel bermek we şonuň üçin öýjükleriň ölmegi. Olaryň roly doňdurma, saklamak we eremek proseslerinde öýjükler we dokumalar üçin howpsuz, gorag gurşawyny üpjün etmekdir.

Täze doňdurylan plazma (FFP), heparinirlenen plazmalyt ergini ýa-da serumsyz, haýwan komponenti bolmadyk erginler dimetil sulfoksid (DMSO) ýa-da gliserol ýaly krioprotektantlar bilen garylýar.

Gaýtadan suwuklandyrylan nusga bölejigi ýaly polipropilen krowiallara bölünýär“Suzhou Ace” biomedikal kompaniýasy “Cryogenic Storage Vials”.

Düwürtikleri doldurmazlyk möhümdir, sebäbi bu ýarylmak we mazmunyň çykmagy mümkinçiligini ýokarlandyrar (1).

Dolandyryş doňma derejesi

Umuman, öýjükleriň üstünlikli saklanmagy üçin haýal gözegçilik edilýän doňdurma tizligi ulanylýar.

Nusgalar kriogen flakonlara bölünensoň, çygly buzda ýa-da 4 ℃ sowadyjyda goýulýar we doňdurma prosedurasy 5 minudyň içinde başlaýar. Umumy gollanma hökmünde öýjükler minutda -1 bilen -3 aralygynda sowadylýar (2). Bu programmirläp bolýan sowadyjy ulanmak arkaly ýa-da flakonlary –70 ° C-den ° 90 ° C çenli doňdurylan izolýasiýa gutusyna goýmak arkaly gazanylýar.

Suwuk azota geçiriň

Doňdurylan kriogen flakonlary -135 less-dan pes temperaturany saklamak şerti bilen belli bir wagtlap suwuk azot çüýşesine geçirilýär.

Bu aşa pes temperaturalary suwuk ýa-da bug fazasy azotyna çümdürmek arkaly alyp bolýar.

Suwuk ýa-da bug fazasy?

Suwuk fazaly azotda saklamak sowuk temperaturany mutlak yzygiderlilik bilen saklaýar, ýöne köplenç aşakdaky sebäplere görä maslahat berilmeýär:

• Potensial howp bolup biljek suwuk azotyň uly göwrümine (çuňlugyna) zerurlyk. Bu sebäpli ýanmak ýa-da demikmek hakyky töwekgelçilikdir.
• Aspergillus, hep B we wirus ýaly suwuk azot serişdesi arkaly ýaýraýan ýokanç serişdeler tarapyndan kesel hapalanan resminamalar (2,3)
• Suw çümdürilende suwuk azotyň flakonlara syzmak mümkinçiligi. Ammardan aýrylanda we otag temperaturasyna gyzdyrylanda azot çalt giňelýär. Netijede, flakon suwuk azot saklanylanda aýrylyp, uçýan galyndylardan we mazmuna täsir etmekden howp döredip biler (1, 4).

Şol sebäplere görä, aşa pes temperatura saklamak, bug fazasyndaky azotda bolýar. Haçan-da nusgalar suwuk fazada saklanmaly bolsa, ýöriteleşdirilen krioflex turbalary ulanmaly.

Bug fazasynyň zyýanly tarapy, dik temperatura gradientiniň -135 ℃ -190 between arasynda temperaturanyň üýtgemegine sebäp bolup biler. Bu, suwuk azotyň derejesine we temperaturanyň üýtgemegine seresap we yhlasly gözegçilik etmegi talap edýär (5).

Öndürijileriň köpüsi, kriwiallary -135 to çenli saklamak ýa-da diňe bug fazasynda ulanmak üçin amatlydygyny maslahat berýärler.

Goragly öýjükleriňizi eretmek

Eremek prosedurasy doňan medeniýet üçin agyrdyr we öýjükleriň amatly ýaşamagyny, dikelmegini we işlemegini üpjün etmek üçin dogry işlemek we tehnika zerurdyr. Eremegiň takyk protokollary belli bir öýjük görnüşlerine bagly bolar. Şeýle-de bolsa, çalt eremek adaty hasaplanýar:

• Öýjükleriň dikeldilmegine islendik täsirini azaltmak
• Doňdurma metbugatynda bar bolan erginlere täsir ediş wagtyny azaltmaga kömek ediň
• Buzy gaýtadan dikeltmek arkaly islendik zyýany azaldyň

Suw wannalary, monjuk hammamlary ýa-da ýöriteleşdirilen awtomatlaşdyrylan gurallar, nusgalary eritmek üçin ulanylýar.

Mostygy-ýygydan 1 öýjük çyzygy, bir wagtyň özünde 1-2 minutlap, 37 ℃ suw wannasynda ýuwaşlyk bilen aýlanyp, flakonda azajyk buz galýança, öňünden ösýän gurşawda ýuwulmazdan ozal ereýär.

Süýdemdirijiler düwünçegi ýaly käbir öýjükler üçin ýaşamak üçin haýal ýylylyk zerurdyr.

Öýjükler indi öýjük medeniýeti, öýjük izolýasiýasy ýa-da gematopoetiki kök öýjükleri üçin - miýeloablatiw bejergiden öň donoryň kök öýjükleriniň bitewiligini kepillendirmek üçin ýaşaýyş ukyplylygy.

Medeniýetde örtük üçin öýjükleriň konsentrasiýasyny kesgitlemek üçin öýjük sanamak üçin ulanylýan öňünden ýasalan nusganyň ownuk alikotlaryny almak adaty bir zat. Soňra öýjük izolýasiýa proseduralarynyň netijelerine baha berip, öýjükleriň ýaşaýyş ukyplylygyny kesgitläp bilersiňiz.

Düwürtikleri saklamak üçin iň oňat tejribe

Düwürtiklerde saklanylýan nusgalaryň üstünlikli saklanmagy protokolyň köp elementlerine, dogry saklamak we ýazgy saklamak bilen baglanyşyklydyr.

• Öýjükleri ammar ýerleriniň arasynda bölüň- Ses göwrümi rugsat berse, öýjükleri flakonlaryň arasynda bölüň we enjamlaryň näsazlygy sebäpli nusga ýitgilerini azaltmak üçin aýratyn ýerlerde saklaň.
• Hapalanmagynyň öňüni alyň- Bir gezek ulanylýan steril kriogen flakonlary ýa-da soňraky ulanmazdan ozal awtoklawy saýlaň
• Öýjükleriňiz üçin laýyk ölçegli flakonlary ulanyň- flakonlar 1 bilen 5ml aralygynda bolýar. Ingarylmak howpuny azaltmak üçin flakonlary doldurmakdan gaça duruň.
• Içerki ýa-da daşarky sapakly kriogen flakonlary saýlaň- Içerki sapakly flakonlar käbir uniwersitetler tarapyndan howpsuzlyk çäreleri üçin maslahat berilýär - suwuk azot doldurylanda ýa-da saklananda hapalanmagyň öňüni alyp biler.
• Syzmagynyň öňüni alyň- Syzdyrmagyň we hapalanmazlyk üçin nurbat ýa-da halkalara galyp, iki sanjymly möhürleri ulanyň.
• 2D ştrih-kodlary we bellik flakonlaryny ulanyň- yzarlanylmagyny üpjün etmek üçin, uly ýazuw meýdançalary bolan flakonlar her flakanyň ýeterlik bellik edilmegine mümkinçilik berýär. 2D ştrih-kodlar ammar dolandyryşy we ýazgylary ýöretmekde kömek edip biler. Reňkli kodlanan gapaklar has aňsat kesgitlemek üçin peýdalydyr.
• Storageeterlik ammar hyzmaty- Öýjükleriň ýitmezligini üpjün etmek üçin ammar gämileri temperatura we suwuk azot derejesine yzygiderli gözegçilik etmeli. Usersalňyşlyklary ulanyjylara duýduryş bermek üçin duýduryşlar ýerleşdirilmelidir.

Howpsuzlyk çäreleri

Suwuk azot häzirki zaman gözleglerinde adaty bir ýagdaýa öwrüldi, ýöne nädogry ulanylsa agyr ýaralanmak töwekgelçiligini döredýär.

Suwuk azot ulanylanda aýazyň, ýanmagyň we beýleki ýaramaz hadysalaryň töwekgelçiligini azaltmak üçin dogry şahsy gorag enjamlary (PPE) geýilmelidir. Geý

• Kriogen ellikler
• Laboratoriýa palto
• Boýnuňy ýapýan täsirli çydamly doly ýüz galkany
• Toapyk aýakgap
• Çyzgysyz plastmassa örtük

Asfiksiýa töwekgelçiligini azaltmak üçin suwuk azot sowadyjylary gowy şemalladylýan ýerlere ýerleşdirmeli - gaçýan azot atmosfera kislorodyny bugarýar we ýerleşdirýär. Uly göwrümli dükanlarda pes kislorod duýduryş ulgamlary bolmaly.

Suwuk azot ulanylanda jübüt işlemek ideal we adaty iş wagtynyň daşynda ulanmak gadagandyr.

Işiňizi goldamak üçin kriviallar

“Suzhou Ace Biomedical” kompaniýasy, dürli öýjükler üçin kriptografiýa ätiýaçlandyryş islegleriňizi kanagatlandyrýan önümleriň giň görnüşini hödürleýär. Portfolio turbalaryň bir toparyny, şeýle hem steril krowiallary öz içine alýar.

Düwürtiklerimiz:

• Laboratoriýa nurbat gapagy 0,5mL 1.5mL 2.0mL krowial kriogen flakonlar

  ● 0.5ml, 1.5ml, 2.0ml spesifikasiýa, yubka bilen ýa-da yubkasyz
  Ical Konikli ýa-da öz-özünden ýasalan dizaýn, steril ýa-da steril däl ikisi hem bar
  ● Buraw gapak turbalary lukmançylyk derejesindäki polipropilenden ýasalýar
  ● PP Cryotube flakonlary birnäçe gezek doňup we eräp bolýar
  Cap Daşarky gapak dizaýny, nusga bejergisi wagtynda hapalanmak ähtimallygyny azaldyp biler.
  ● Buraw gapagy kriogen turbalary Ulanmak üçin uniwersal nurbat sapaklary
  Turbalar iň köp ýaýran rotorlara laýyk gelýär
  ● Kriogen turba o-halka turbalary adaty 1 dýuým we 2 dýuým, 48well, 81well ， 96well we 100well doňduryjy gutulara laýyk gelýär
  12 121 ° C çenli awtoklawly we -86 ° C çenli doňup bolýar

  NOOK	MATERIAL	SÖUMGI	CAPReňk	PCS /BAG	BAGS / KESEL
  ACT05-BL-N	PP	0.5ML	Gara, sary, gök, gyzyl, gyrmyzy, ak	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5ML	Gara, sary, gök, gyzyl, gyrmyzy, ak	500	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5ML	Gara, sary, gök, gyzyl, gyrmyzy, ak	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0ML	Gara, sary, gök, gyzyl, gyrmyzy, ak	500	10