PCR iş akymlary (Standartlaşdyrma arkaly hiliň ýokarlanmagy)

Amallaryň standartlaşdyrylmagy, optimizasiýany we soňraky döredilmegini we sazlaşygyny öz içine alýar, ulanyjydan garaşsyz uzak möhletli optimal işlemäge mümkinçilik berýär. Standartlaşdyrma ýokary hilli netijeleri, şeýle hem olaryň köpelmegini we deňeşdirilmegini üpjün edýär.

(Klassiki) PCR-iň maksady ygtybarly we köpelip boljak netijäni döretmekdir. Käbir programmalar üçin hasylPCR önümihem degişlidir. Bu reaksiýalar üçin, nusgalaryň bozulmazlygy we PCR iş akymynyň durnukly bolmagy üçin seresap bolmaly. Hususan-da, bu ýalan polo positiveitel ýa-da ýalan negatiw netijelere sebäp bolup biljek ýa-da PCR reaksiýasyny saklap biljek hapalanmalaryň azalmagyny aňladýar. Mundan başga-da, reaksiýanyň şertleri her bir aýratyn nusganyň dowamynda mümkin boldugyça birmeňzeş bolmaly we soňraky reaksiýalara (şol bir usuldan) geçirilmeli. Bu, reaksiýalaryň düzümine, welosipeddäki temperatura gözegçiliginiň görnüşine degişlidir. Ulanyjy ýalňyşlyklaryndan, elbetde, mümkin boldugyça öňüni almaly.

Aşakda, PCR taýýarlanylanda we işleýän wagtynda ýüze çykýan kynçylyklary we PCR iş akymlaryny standartlaşdyrmak üçin ulanylýan gurallar we sarp ediş materiallary babatynda bar bolan çözgütlere çemeleşmeleri görkezeris.

Reaksiýa taýýarlygy

Reaksiýa komponentleriniň degişlilikde PCR-gämilere ýa-da plitalara paýlanmagy, ýeňip geçmeli birnäçe kynçylygy öz içine alýar:

Reaksiýa şertleri

Aýry-aýry komponentleriň takyk we takyk dozasy, mümkin bolan iň meňzeş reaksiýa şertlerine gönükdirilende aýrylmazdyr. Gowy turba geçiriş usulyna goşmaça, dogry guraly saýlamak gaty möhümdir. PCR ussat garyndylarynda ýygy-ýygydan ýapyşyklygy ýokarlandyrýan ýa-da köpük döredýän maddalar bolýar. Geçiriji prosesi wagtynda bular ep-esli çyglylyga sebäp bolýarturba maslahatlaryturbanyň takyklygyny peseldýär. Göni ýaýratmak ulgamlarynyň ýa-da çyglylyga has ýygy bolan alternatiw turba maslahatlarynyň ulanylmagy, turba geçiriş prosesiniň takyklygyny we takyklygyny ýokarlandyryp biler.

Hapalanmalar

Bölüniş prosesinde aerozollar emele gelýär, eger turbanyň içine girmäge rugsat berilse, indiki turba geçiriji ädiminde başga bir nusgany hapalap biler. Süzgüç maslahatlaryny ýa-da göni süýşüriş ulgamlaryny ulanmak arkaly munuň öňüni alyp bolar.
Consumaly sarp ediş serişdelerimaslahatlar, PCR iş prosesinde ulanylýan gämiler we tabaklar, nusga zyýan berýän ýa-da netijäni galplaşdyrýan maddalar bolmaly däldir. Bularyň arasynda DNK, DNases, RNases we PCR inhibitorlary, şeýle hem reaksiýa wagtynda materialdan syzyp bilýän komponentler - leachables diýlip atlandyrylýan maddalar bar.

Ulanyjy ýalňyşlygy

Nusgalar näçe köp işlense, ýalňyşlyk töwekgelçiligi şonça-da ýokarydyr. Bir nusganyň nädogry gämä ýa-da nädogry guýa guýulmagy aňsat bolup biler. Guýulary aňsatlyk bilen bellemek arkaly bu töwekgelçilik ep-esli azaldar. Paýlaýyş ädimlerini awtomatlaşdyrmagyň üsti bilen “adam faktory”, ýagny ýalňyşlyklar we ulanyjy bilen baglanyşykly üýtgeşiklikler azaldylýar, şeýlelik bilen köpeliş ukyby ýokarlanýar, esasanam kiçi reaksiýa göwrümi. Munuň üçin iş stansiýasynda işlemek üçin ýeterlik ölçegli durnuklylyk plitalary gerek. Birikdirilen ştrih-kodlar, tutuş prosesiň dowamynda nusga yzarlamagyny aňsatlaşdyrýan goşmaça maşyn okalmagyny üpjün edýär.

Termosikleriň programmirlemegi

Bir guraly programmirlemek, köp wagt talap edýän we ýalňyşlyga sezewar bolup biler. Dürli PCR termiki welosiped aýratynlyklary bu amal ädimini ýönekeýleşdirmek we iň esasysy howpsuz etmek üçin bilelikde işleýär:
Easyeňil işlemek we oňat ulanyjy görkezmesi netijeli programmirlemegiň esasyny düzýär. Bu binýadyň üstünde gurlup, parol bilen goralýan ulanyjy administrasiýasy, öz programmalarynyň beýleki ulanyjylar tarapyndan üýtgedilmeginiň öňüni alar. Birnäçe tigir sürýänler (şol bir görnüşdäki) ulanylýan bolsa, bir programmany USB ýa-da birikme arkaly bir guraldan beýlekisine gönüden-göni geçirip bolýan bolsa peýdalydyr. Kompýuter programma üpjünçiligi, kompýuterdäki programmalary, ulanyjy hukuklaryny we resminamalary merkezi we ygtybarly dolandyrmaga mümkinçilik berýär.

PCR işleýär

Iş wagtynda, her nusga birmeňzeş, yzygiderli reaksiýa şertlerine sezewar edilmeli reaksiýa gämisinde DNK güýçlendirilýär. Amal üçin aşakdaky taraplar degişlidir:

Temperatura gözegçilik

Temperatura gözegçiliginiň ajaýyp takyklygy we welosiped blokynyň birmeňzeşligi ähli nusgalaryň hatda temperatura sowadylmagy üçin esas bolup durýar. Heatingyladyş we sowadyjy elementleriň (peltier elementleri) ýokary hili, şeýle hem olaryň blok bilen baglanyşygy, “gyrasy effekti” diýlip atlandyrylýan temperatura laýyk gelmezlik töwekgelçiligini kesgitleýän kesgitleýji faktorlardyr.

Buglanmak

Aýry-aýry reaksiýa komponentleriniň konsentrasiýalary bugarmak sebäpli reaksiýanyň dowamynda üýtgemeli däldir. Otherwiseogsam, bu gaty az bolup bilerPCR önümidöredilip bilner ýa-da asla ýok. Şonuň üçin ygtybarly möhüri üpjün etmek arkaly bugarmagy azaltmak möhümdir. Bu ýagdaýda termosikleriň gyzdyrylan gapagy we gäminiň möhri el bilen işleýär. Dürli möhürleme wariantlary barPCR plitalary (baglanyşyk: Möhürli makala), şonuň bilen iň oňat möhür ýylylyk möhürlenmegi arkaly gazanylýar. Tigirli gapagyň kontakt basyşy saýlanan möhre sazlanyp bilinýänçä, beýleki ýapyklar hem amatly bolup biler.

Uzak möhletde takyk we köpelip boljak netijeleri goramak üçin amallary standartlaşdyrmak bar. Munuň özi hemişe gowy işleýändigini üpjün etmek üçin enjamlara yzygiderli hyzmat etmegi öz içine alýar. Consumhli sarp edilýän önümler öndürilen ähli bije boýunça yzygiderli ýokary hilli bolmaly we ygtybarly elýeterliligi kepillendirilmelidir.

 


Iş wagty: Noýabr-29-2022