การแนะนำ
แผ่นพีซีอาร์ซึ่งเป็นส่วนสำคัญของห้องปฏิบัติการมานานหลายปี และกำลังแพร่หลายมากขึ้นในสภาพแวดล้อมสมัยใหม่ เนื่องจากห้องปฏิบัติการขยายปริมาณงานและจ้างระบบอัตโนมัติภายในขั้นตอนการทำงานของตนมากขึ้น การบรรลุวัตถุประสงค์เหล่านี้พร้อมทั้งรักษาความถูกต้องแม่นยำและความสมบูรณ์ของการทดลองอาจเป็นเรื่องยาก หนึ่งในพื้นที่ทั่วไปที่ข้อผิดพลาดอาจคืบคลานเข้ามาคือการปิดผนึกแผ่นพีซีอาร์ด้วยเทคนิคที่ไม่ดีทำให้ตัวอย่างระเหยได้ เปลี่ยนแปลงค่า pH และขัดขวางการทำงานของเอนไซม์ และทำให้เกิดการปนเปื้อน เรียนรู้วิธีการปิดผนึกกแผ่นพีซีอาร์ลดความเสี่ยงเหล่านี้ได้อย่างถูกต้องและรับประกันผลลัพธ์ที่สามารถทำซ้ำได้
ค้นหาซีลที่เหมาะสมสำหรับเพลต PCR ของคุณ
ฝาเพลท กับ ซีลฟิล์ม กับ ฝาปิด
หมวกเป็นวิธีที่ดีในการปิดผนึกจานด้วยการซีลอย่างแน่นหนา ในขณะที่ยังคงให้ความยืดหยุ่นในการปิดผนึกและปิดผนึกจานได้อย่างง่ายดายตามที่คุณต้องการโดยไม่สิ้นเปลือง อย่างไรก็ตาม ตัวพิมพ์ใหญ่มีข้อเสียที่สำคัญอยู่สองสามข้อ
ประการแรก คุณจะต้องซื้อฝาครอบเฉพาะที่เข้ากันได้ ซึ่งทำให้ไม่สามารถใช้งานได้หลากหลาย คุณจะต้องตรวจสอบให้แน่ใจว่าฝาปิดที่คุณเลือกนั้นพอดีกับเพลตซึ่งขึ้นอยู่กับผู้ผลิต และเลือกแบบโดมหรือแบบแบนตามเทอร์โมไซเคิลที่คุณใช้
ประการที่สอง การใช้ฝาปิดบนเพลตอาจเป็นเรื่องซ้ำซากและน่าเบื่อ โดยมีความเสี่ยงที่จะเกิดการปนเปื้อนข้ามหากคุณใส่ฝาปิดผิดหลุม
แม้ว่าซีลฟิล์มจะมีความยืดหยุ่นน้อยกว่าในแง่ของการถอดและเปลี่ยน แต่ก็มีความหลากหลายมากเนื่องจากสามารถใส่ได้กับเพลต PCR ทุกประเภท โดยไม่คำนึงว่าใครคือผู้ผลิต สามารถตัดให้ได้ขนาดทำให้มีประสิทธิภาพมาก
อีกทางเลือกหนึ่งคือฝาจาน สิ่งเหล่านี้ให้การป้องกันน้อยกว่าฝาปิดและซีล และส่วนใหญ่จะใช้สำหรับฝาปิดระยะสั้นเท่านั้นเพื่อป้องกันการปนเปื้อน
ซีลฟิล์มออฟติคัลและฟอยล์
ไม่ว่าคุณจะต้องการซีลแบบใสหรือแบบออพติคอลฟิล์มอลูมิเนียมฟอยล์การปิดผนึกจานของคุณจะขึ้นอยู่กับรูปแบบการทดลองของคุณฟิล์มปิดผนึกด้วยแสงมีความโปร่งใสเพื่อให้คุณสามารถสังเกตตัวอย่างได้ ในขณะที่ยังคงปกป้องและป้องกันการระเหย ยังมีประโยชน์อย่างยิ่งในการทดลอง qPCR ที่เกี่ยวข้องกับการวัดค่าเรืองแสงโดยตรงจากเพลตอย่างแม่นยำสูง ในกรณีนี้ คุณจะต้องใช้ฟิล์มปิดผนึกที่กรองสารเรืองแสงให้น้อยที่สุดเท่าที่จะทำได้ สิ่งสำคัญคือต้องตรวจสอบให้แน่ใจว่าซีลหรือฝาครอบที่คุณใช้มีระดับความชัดเจนของแสงที่สูงเพียงพอเพื่อให้แน่ใจว่าการอ่านค่ามีความแม่นยำ
ฟิล์มฟอยล์เหมาะสำหรับตัวอย่างที่ไวต่อแสงหรือเก็บไว้ที่อุณหภูมิต่ำกว่า 80°C ด้วยเหตุนี้ ตัวอย่างส่วนใหญ่ที่มีไว้สำหรับการจัดเก็บระยะยาวจึงต้องใช้ฟิล์มฟอยล์ ฟิล์มฟอยล์ยังสามารถเจาะทะลุได้ ซึ่งมีประโยชน์สำหรับการตรวจสอบแต่ละหลุม หรือสำหรับการย้ายตัวอย่างโดยใช้เข็ม สิ่งนี้สามารถเกิดขึ้นได้ด้วยตนเองหรือเป็นส่วนหนึ่งของแพลตฟอร์มหุ่นยนต์
นอกจากนี้ ให้พิจารณาด้วยว่าสารที่มีฤทธิ์รุนแรงซึ่งรวมถึงกรด เบส หรือตัวทำละลาย จะต้องมีการปิดผนึกที่สามารถทนต่อสิ่งเหล่านี้ได้ ซึ่งในกรณีนี้ การผนึกแบบฟอยล์น่าจะเหมาะสมกว่า
กาวกับฟิล์มซีลความร้อน
ซีลฟิล์มกาวตรงไปตรงมาและใช้งานง่ายมาก สิ่งที่คุณต้องมีก็แค่ให้ผู้ใช้ทาซีลบนเพลต และใช้เครื่องมือทาแบบง่ายๆ เพื่อกดลงและสร้างซีลให้แน่น
ซีลความร้อนมีความก้าวหน้ากว่า โดยให้ซีลที่มีอายุการใช้งานยาวนานกว่าซึ่งมีอัตราการระเหยลดลงเมื่อเทียบกับซีลกาวทั่วไป ตัวเลือกนี้เหมาะสมหากคุณต้องการจัดเก็บตัวอย่างในระยะยาว แม้ว่าจะมีข้อกำหนดเพิ่มเติมสำหรับอุปกรณ์ปิดผนึกเพลทก็ตาม
วิธีการปิดผนึกแผ่น PCR
วิธีการปิดผนึกแผ่น
มีกาวในตัว
1. ตรวจสอบให้แน่ใจว่าคุณกำลังทำงานบนพื้นผิวที่เรียบและมั่นคง
2. นำฟิล์มออกจากบรรจุภัณฑ์ และนำแผ่นรองออก
3. ใส่ซีลลงบนจานอย่างระมัดระวัง โดยต้องแน่ใจว่าปิดทุกหลุมแล้ว
4. ใช้เครื่องมือ applicator เพื่อใช้แรงกดบนแผ่น เริ่มจากปลายด้านหนึ่งแล้วไล่ไปอีกด้านหนึ่งโดยกดให้เท่ากัน
5. ทำซ้ำหลายๆ ครั้ง
6. เดินอุปกรณ์สมัครของคุณไปรอบๆ หลุมด้านนอก เพื่อให้แน่ใจว่าสิ่งเหล่านี้ปิดสนิทเช่นกัน
ซีลความร้อน
ซีลความร้อนทำงานโดยการละลายฟิล์มไปที่ขอบของแต่ละหลุม โดยใช้เครื่องซีลแบบเพลท หากต้องการใช้งานเครื่องซีลด้วยความร้อน โปรดดูคำแนะนำจากผู้ผลิตอุปกรณ์ ตรวจสอบให้แน่ใจว่าผู้ผลิตที่คุณจัดหาอุปกรณ์ของคุณมานั้นมีชื่อเสียง เนื่องจากเป็นสิ่งสำคัญมากที่ซีลจะต้องมีความเหมาะสม มีประสิทธิภาพ และกันน้ำได้
เคล็ดลับยอดนิยมในการปิดผนึกแผ่น
ก. เมื่อใช้แรงกดบนซีล ให้ไปในทิศทางทั้งแนวนอนและแนวตั้งเพื่อให้แน่ใจว่ามีการซีลที่เหมาะสม
ข. ถือเป็นแนวทางปฏิบัติที่ดีเสมอในการทดสอบการทำงานกับสิ่งที่คุณกำลังทำอยู่ และไม่ต่างกับการซีลเพลท ทดสอบด้วยจานเปล่าก่อนใช้กับตัวอย่าง
ค. เมื่อทำการทดสอบ ให้ถอดซีลออกและดูว่ากาวติดแน่นดีโดยไม่มีช่องว่าง มีการแสดงภาพสิ่งนี้ในเอกสารอ้างอิงฉบับแรก หากคุณปิดผนึกเพลตไม่ถูกต้อง เมื่อคุณถอดซีลออก จะมีช่องว่างที่กาวยังยึดเกาะกับเพลตไม่เต็มที่
ง. สำหรับการขนส่งและการขนส่งตัวอย่าง คุณอาจพบว่าการใช้ซีลพลาสติกที่ด้านบนของซีลฟอยล์เพื่อป้องกันเป็นพิเศษ (โดยเฉพาะจากการเจาะ)
จ. ตรวจสอบให้แน่ใจเสมอว่าไม่มีการกระแทกหรือริ้วรอยเมื่อทาฟิล์ม เพราะจะทำให้เกิดการรั่วไหลและการระเหย
เวลาโพสต์: 23 พ.ย.-2022