เมื่อปริมาตรปิเปตจาก 0.2 ถึง 5 µL ความแม่นยำของการปิเปตและความแม่นยำมีความสำคัญสูงสุดเทคนิคการปิเปตที่ดีเป็นสิ่งจำเป็นเพราะการจัดการข้อผิดพลาดมีความชัดเจนมากขึ้นด้วยปริมาณเล็กน้อย
เมื่อโฟกัสมากขึ้นถูกวางไว้ในการลดรีเอเจนต์และค่าใช้จ่ายปริมาณที่น้อยลงมีความต้องการสูงเช่นสำหรับการเตรียม PCR mastermix หรือปฏิกิริยาของเอนไซม์ แต่การปิเปตปริมาณเล็กน้อยจาก 0.2 - 5 µL ตั้งค่าความท้าทายใหม่สำหรับความแม่นยำและความแม่นยำ ประเด็นต่อไปนี้เป็นสิ่งจำเป็น:
- ขนาดปิเปตและทิป: เลือกปิเปตที่มีปริมาณต่ำสุดที่เป็นไปได้และปลายที่เล็กที่สุดเพื่อให้เบาะอากาศเล็กที่สุดเท่าที่จะทำได้ เมื่อปิเปต 1 µL เช่นเลือกปิเปต 0.25 - 2.5 µL และปลายที่ตรงกันมากกว่าปิเปต 1 - 10 µL
- การสอบเทียบและการบำรุงรักษา: เป็นสิ่งสำคัญที่ปิเปตของคุณได้รับการปรับเทียบและดูแลรักษาอย่างเหมาะสม การปรับขนาดเล็กและชิ้นส่วนที่หักบนปิเปตนำไปสู่การเพิ่มขึ้นอย่างมากในค่าข้อผิดพลาดที่เป็นระบบและสุ่ม การสอบเทียบตาม ISO 8655 จะต้องดำเนินการปีละครั้ง
- ปิเปตดิสเพลสเมนต์เชิงบวก: ตรวจสอบว่าคุณมีปิเปตแบบกระจัดกระจายที่มีช่วงเสียงต่ำในห้องปฏิบัติการของคุณหรือไม่ โดยทั่วไปแล้วการใช้ปิเปตประเภทนี้นำไปสู่ผลการปิเปตที่ดีขึ้นในแง่ของความแม่นยำและความแม่นยำมากกว่าด้วยปิเปตปรับอากาศแบบคลาสสิก
- พยายามใช้ปริมาตรที่ใหญ่ขึ้น: คุณอาจพิจารณาเจือจางตัวอย่างของคุณเป็นปิเปตปริมาตรที่มีขนาดใหญ่ขึ้นด้วยปริมาณเท่ากันในปฏิกิริยาสุดท้าย สิ่งนี้สามารถลดข้อผิดพลาดในการปิเปตด้วยปริมาณตัวอย่างที่เล็กมาก
นอกเหนือจากเครื่องมือที่ดีนักวิจัยจะต้องมีเทคนิคการปิเปตที่ดีมาก ให้ความสนใจเป็นพิเศษกับขั้นตอนต่อไปนี้:
- TIP ATTACHMENT: อย่าติดปิเปตลงบนปลายเนื่องจากอาจสร้างความเสียหายให้กับปลายปลายที่ดีทำให้ลำแสงของเหลวถูกเปลี่ยนเส้นทางหรือสร้างความเสียหายต่อปาก ใช้แรงดันแสงเมื่อติดปลายและใช้ปิเปตด้วยกรวยปลายสปริงโหลด
- การถือปิเปต: อย่าถือปิเปตไว้ในมือของคุณในขณะที่รอการหมุนเหวี่ยงปั่นจักรยาน ฯลฯ ด้านในของปิเปตจะร้อนขึ้นและนำเบาะอากาศเพื่อขยายผลการเบี่ยงเบนจากปริมาตรที่ตั้งไว้เมื่อปิเปต
- การเปียกน้ำล่วงหน้า: การทำให้ชื้นของอากาศภายในปลายและปิเปตเตรียมปลายสำหรับตัวอย่างและหลีกเลี่ยงการระเหยเมื่อสำลักปริมาณการถ่ายโอน
- ความทะเยอทะยานในแนวดิ่ง: สิ่งนี้สำคัญมากเมื่อจัดการปริมาตรเล็ก ๆ เพื่อหลีกเลี่ยงเอฟเฟกต์เส้นเลือดฝอยที่เกิดขึ้นเมื่อปิเปตถูกเก็บไว้ในมุม
- ความลึกของการแช่: แช่ปลายให้น้อยที่สุดเท่าที่จะเป็นไปได้เพื่อป้องกันไม่ให้ของเหลวเข้าสู่ปลายเนื่องจากผลของเส้นเลือดฝอย กฎของหัวแม่มือ: ยิ่งปลายและปริมาตรเล็กลงเท่าใดความลึกของการแช่ก็จะลดลง เราขอแนะนำสูงสุด 2 มม. เมื่อปิเปตปริมาณเล็กน้อย
- การจ่ายเงินที่มุม 45 °: รับประกันการไหลออกของของเหลวที่เหมาะสมเมื่อมีการเก็บปิเปตไว้ที่มุม 45 °
- สัมผัสกับผนังเรือหรือพื้นผิวของเหลว: ปริมาตรขนาดเล็กสามารถจ่ายได้อย่างเหมาะสมเมื่อมีการจับปลายเข้ากับผนังเรือหรือแช่เป็นของเหลว แม้แต่หยดสุดท้ายจากปลายก็สามารถจ่ายได้อย่างถูกต้อง
- Blow-Out: การระเบิดเป็นสิ่งจำเป็นหลังจากจ่ายปริมาณต่ำเพื่อจ่ายแม้กระทั่งหยดของเหลวสุดท้ายที่มีอยู่ในปลาย การระเบิดออกควรดำเนินการกับผนังเรือ ระวังอย่านำฟองอากาศเข้ามาในตัวอย่างเมื่อทำการระเบิดที่พื้นผิวของเหลว
เวลาโพสต์: ก.พ. 18-2021