Гарчанде ки дар назария, як молекулаи қолаб кофӣ аст, ки миқдори зиёди ДНК-ҳо одатан барои PCR-ҳои классикӣ истифода мешавад, масалан то 1 мкг ДНКАЛИЯИ МОМАЛИЯИ МОМАЛИЯ ВА АМАЛ Ҳамагӣ 1 пг ДН. Маблағи оптималӣ асосан ба шумораи нусхаҳои пайдарпаии мақсаднок, инчунин мураккабии он вобаста аст.
Агар қолаби ночиз истифода бурда мешавад, афзоиши дахлдори шумораи давраҳои амлиш барои гирифтани миқдори кофии маҳсулот лозим аст. Полимерии тахтае, ки барои аксари таҷрибаҳои PCR истифода мешавад Ҳамин тариқ, ҳангоми амбут хатогиҳо рух дода наметавонанд. Шумораи бештари давраҳо зиёд аст, бештар маъмул будани маҳсулоти камбизбуда. Агар, аз тарафи дигар, миқдори қолаби аз ҳад баланд аст маҳсулоти давлатӣ. Дар бисёр ҳолатҳо, ДНК аз фарҳангҳои ҳуҷайраҳо ё микроорганизмҳо ҷудо карда шуда, баъдтар ҳамчун қолаби PCC истифода мешаванд. Пас аз тоза кардани тозакунии ДНК-ро муайян кардан зарур аст, ки ҳаҷми муайян кардани овозро, ки барои танзими PCR танзим карда мешавад, муайян карда шавад. Дар ҳоле ки Ормароза Гел Электрурналҳо метавонад барои пешниҳоди смета метавонад хидмат кунад, ин усул хеле дур аст. Uv-Vis Spectrophotometry ҳамчун стандарти тиллоӣ барои миқдори кислотаҳои ядроӣ таъсис дода шудааст; Ин усули усули мустақим ва зуд осон ва зудтар чораҳои интихоботро дар 260-солагии намуна ҷуброни интихобро ҷуброн мекунанд ва консентратсия бо кӯмаки омили табдили ҳисоб карда мешавад.
Аммо агар консентратсияи DNA хеле паст бошад, (<1 μG / ML DSDNA), ё агар он бо моддаҳо ифлос шавад, ки инчунин ба маҳдудияти 260 NM (масалан, протеин, намакҳо) ба маҳдудиятҳои худ мерасанд. Дар сурати консентратсияи хеле паст, хониш ба зудӣ истифода хоҳад буд ва ифлосшавӣ ба (баъзан аз ҳад зиёд аст) арзиши воқеии арзиши воқеӣ оварда мерасонад. Дар ин ҳолат, миқдори истифодаи блюзессия метавонад алтернатива ҳозир шавад. Ин техника ба истифодаи рангҳои флюзессия, ки махсусан ба DSDNA танҳо кислотаи нуклиро банд мекунад, асос ёфтааст, ки кислотаи нукриро дорад ва баъд аз он нуре ба ҳаяҷон меорад ва он гоҳ чароғи каме баландтар мешавад. Дар ин ҷо, шиддатнокии сигнали флюорессия ба миқдори ДНК мутаносиб аст ва барои муайян кардани консентратсия он нисбат ба хатти стандартӣ арзёбӣ карда мешавад. Афзалиятҳои ин усул дар бораи хусусияти вомбаргҳо, ки таъсири берунаро ба вуҷуд меорад, бо ифлосшавӣ ва инчунин қобилияти ошкор кардани консентсияҳои хеле пасти ДНК-ро ворид мекунад. Санкалти ҳам усул асосан аз тамаркуз ва покии намуна вобаста аст; Дар бисёр ҳолатҳо, он метавонад тавсия дода шавад, ки ҳарду усулро дар баробари ҳамду саноӣ татбиқ кунед.
Вақти почта: Ноябр-30-2022