5 Маслиҳати оддӣ барои пешгирии хатогиҳо ҳангоми кор бо плитаҳои PCR

Реаксияҳои занҷири полимеразӣ (ПЗР) яке аз усулҳои маъмуле мебошанд, ки дар лабораторияҳои илмҳои ҳаёт истифода мешаванд.

Плитаҳои PCR аз пластикаи дараҷаи аввал барои коркарди аъло ва таҳлили намунаҳо ё натиҷаҳои ҷамъовардашуда истеҳсол карда мешаванд.

Онҳо деворҳои борик ва якхела доранд, то интиқоли дақиқи гармиро таъмин кунанд.

Ҳангоми омодагӣ ба замимаҳои вақти воқеӣ, қисмати дақиқаҳои ДНК ё РНК ҷудо карда мешаванд ва дар плитаҳои PCR нигоҳ дошта мешаванд.

Пластинаҳои PCR дар мӯҳри гармӣ хеле самараноканд ва ҷараёни гармиро низ маҳдуд мекунанд.

Бо вуҷуди ин, ба қадри кофӣ самаранок ва боэътимод будани плитаҳои PCR, ҳангоми коркарди намунаҳо хатогиҳо ва носаҳеҳиҳо ба осонӣ бартараф карда мешаванд.

Бинобар ин, агар шумо ба гирифтани сифати хуб ва баланд таваҷҷӯҳ дошта бошедПластинаҳои PCR.Барои тамос бо истеҳсолкунандаи боэътимоди таблиғи PCR беҳтарин аст. Бо ин шумо итминон медиҳед, ки созишномаи беҳтаринро ба даст меоред.

Инҳоянд баъзе чораҳои эҳтиётӣ барои пешгирӣ кардани ифлосшавии реагентҳо ё намунаҳо ва пешгирӣ кардани хатогиҳо ба натиҷаҳо.

Стерилизатсияи гирду атроф
Аломатҳои мусбат ё манфии нодуруст аз сабаби мавҷудияти ифлосиҳо ба вуҷуд меоянд, ки шуморо ба натиҷаҳо шубҳа мекунанд.

Наҷосат ва ифлоскунандаҳо дар шаклҳои гуногун ба монанди ДНК-и ба ҳам алоқаманд ё иловаҳои кимиёвӣ ба вуҷуд меоянд, ки дар ниҳоят самаранокӣ ва самаранокии реаксияро коҳиш медиҳанд.

Роҳҳои зиёде мавҷуданд, ки суръати ифлосшавии плитаи PCR-ро хеле кам мекунанд.

Истифодаи маслиҳатҳои филтри стерилизатсияшуда роҳи дигари муфид барои пешгирии воридшавии ифлосиҳо ба намунаҳои шумо тавассути пипеткаҳо мебошад.

Маҷмӯи комилан тозаи таҷҳизотро, ки аз пипетаҳо ва рафҳо иборат аст, танҳо барои истифодаи PCR ҷудо кунед. Ин интиқоли ночизи ифлосҳо ё ифлоскунандаҳоро дар атрофи лаборатория кафолат медиҳад.

Барои тоза кардани ифлоскунандаҳо шустагарҳо, этанолро дар пипеткаҳо, стеллажҳо ва курсиҳо истифода баред.

Барои ҳама реаксияҳои PCR-и худ фазои ҷудошуда ҷудо кунед, то ифлосшавии зарраҳоро минбаъд кам кунед.

Дар ҳар қадам дастпӯшакҳои тозаро истифода баред ва онҳоро зуд-зуд иваз кунед.

Пластинаҳои PCR
Консентратсия ва тозагии Шаблонро тафтиш кунед.
Тозагии курсӣ ва таҷҳизоте, ки ҳангоми таҳлили намунаҳо бо ПТР истифода мешаванд, бояд нигоҳ дошта шаванд. Пеш аз таҳлил ва коркард тасдиқ кардани дараҷаи тозагии намунаҳо муҳим аст.

Умуман, анализаторҳо консентратсия ва сатҳи тозагии намунаҳои ДНК-ро ба назар мегиранд.

Кӯшиш кунед, ки таносуби ҷаббида барои 260 нм/280 нм набояд аз 1,8 камтар бошад. Дар ҳоле ки дарозии мавҷи минбаъдаи байни 230 нм ва 320 нм барои муайян кардани ифлосиҳо истифода мешавад.

Дар як маврид, намакҳои хаотропӣ ва дигар пайвастагиҳои органикӣ бо суръати азхудкунии 230 нм муайян карда мешаванд. Дар ҳоле ки абрнокӣ дар намунаҳои ДНК низ бо суръати азхудкунии 320 нм ошкор ва тасдиқ карда мешавад.

Аз боркунии аз ҳад зиёди плитаҳои PCR бо маҳсулот худдорӣ намоед
То он даме, ки дар як вақт кор кардани якчанд маҳсулот мехоҳад, он боиси ифлосшавии байнисоҳавии плитаҳои PCR мегардад.

Аз ҳад зиёд бор кардани пластинаҳои PCR бо партовҳои маҳсулоти гуногун ва муайян кардани намунаҳоро хеле мушкил мекунад.

Сабтҳои реагентҳои PCR-ро нигоҳ доред
Давраи муттасили яхкунӣ/обшавӣ ва истифодаи зуд-зуд аликвот метавонад тавассути кристаллизатсия ба реагентҳои ПТР, ферментҳо ва DNTP зарар расонад.

Ҳамеша кӯшиш кунед, ки меъёри аликвотро ҳангоми тайёр кардани намунаҳо барои таҳлил назорат кунед.

LIMS афзалтар барои назорат кардани инвентаризатсия ва миқдори реагентҳо ва намунаҳои яхкардашуда ё обшуда мувофиқтар аст.

Ҳарорати беҳтаринро интихоб кунед.
Интихоб ва истифодаи ҳарорати нодурусти гармкунӣ боз як усули дигарест, ки натиҷаҳои PCR дорои хатогиҳо мебошанд.

Баъзан, аксуламал ба нақша гирифта намешавад. Барои осон кардани реаксияи бомуваффақият, ҳароратро паст кардан лозим аст.

Бо вуҷуди ин, паст кардани ҳарорат имкони пайдоиши мусбатҳои бардурӯғ ва пайдоиши димерҳои праймерро зиёд мекунад.

Ҳангоми истифодаи плитаҳои PCR тасдиқ кардани таҳлили каҷи обшавӣ муҳим аст, зеро ин нишондиҳандаи хуби интихоби ҳарорати дурусти гармкунӣ мебошад.

Нармафзори тарроҳии праймер барои тарҳрезӣ, таъмини ҳарорати дурусти гармкунӣ бо бевосита кам кардани хатогиҳо дар плитаҳои PCR кӯмак мекунад.

Оё ба лавҳаи баландсифати ПТР ниёз доред?
Агар шумо фикр карда бошед, ки дар куҷо истеҳсолкунандаи боэътимоди онро пайдо кунедПластинаҳои PCR. Дигар ҷустуҷӯ накунед, зеро шумо дар ҷои дуруст ҳастед.

Марҳаматбарои тамос бо мо ин ҷо клик кунедбарои маҳсулот ва хидматрасонии баландсифат бо нархе, ки бонкро вайрон намекунад.


Вақти фиристодан: октябр-30-2021