క్రియోవియల్స్ద్రవ నత్రజనితో నిండిన డీవార్స్‌లో సెల్ లైన్లు మరియు ఇతర క్లిష్టమైన జీవ పదార్థాల క్రయోజెనిక్ నిల్వ కోసం సాధారణంగా ఉపయోగిస్తారు.

ద్రవ నత్రజనిలో కణాల విజయవంతమైన సంరక్షణలో అనేక దశలు ఉన్నాయి. ప్రాథమిక సూత్రం నెమ్మదిగా ఫ్రీజ్ అయితే, ఉపయోగించిన ఖచ్చితమైన సాంకేతికత సెల్ రకం మరియు క్రియోప్రొటెక్టెంట్ మీద ఆధారపడి ఉంటుంది. అటువంటి తక్కువ ఉష్ణోగ్రతల వద్ద కణాలను నిల్వ చేసేటప్పుడు పరిగణనలోకి తీసుకోవలసిన అనేక భద్రతా పరిశీలనలు మరియు ఉత్తమ పద్ధతులు ఉన్నాయి.

ఈ పోస్ట్ ద్రవ నత్రజనిలో క్రియోవియల్స్ ఎలా నిల్వ చేయబడుతుందో ఒక అవలోకనాన్ని ఇవ్వడం లక్ష్యంగా పెట్టుకుంది.

క్రియోవియల్స్ అంటే ఏమిటి

క్రియోవియల్స్ చిన్నవి, చాలా తక్కువ ఉష్ణోగ్రతల వద్ద ద్రవ నమూనాలను నిల్వ చేయడానికి రూపొందించిన కప్పబడిన కుండలు. క్రియోప్రొటెక్టెంట్‌లో భద్రపరచబడిన కణాలు ద్రవ నత్రజనితో ప్రత్యక్ష సంబంధంలోకి రావని వారు నిర్ధారిస్తారు, సెల్యులార్ పగుళ్ల ప్రమాదాన్ని తగ్గిస్తుంది, అదే సమయంలో ద్రవ నత్రజని యొక్క తీవ్రమైన శీతలీకరణ ప్రభావం నుండి ఇంకా ప్రయోజనం పొందుతుంది.

ఈ కుండలు సాధారణంగా వాల్యూమ్‌లు మరియు డిజైన్ల పరిధిలో లభిస్తాయి - అవి అంతర్గతంగా లేదా బాహ్యంగా ఫ్లాట్ లేదా గుండ్రని బాటమ్‌లతో థ్రెడ్ చేయబడతాయి. శుభ్రమైన మరియు నాన్-స్టెరైల్ ఫార్మాట్లు కూడా అందుబాటులో ఉన్నాయి.

ఎవరు ఉపయోగిస్తారుసైరోవియల్స్కణాలను ద్రవ నత్రజనిలో నిల్వ చేయడానికి

NHS మరియు ప్రైవేట్ ప్రయోగశాలలు, అలాగే కార్డ్ బ్లడ్ బ్యాంకింగ్, ఎపిథీలియల్ సెల్ బయాలజీ, ఇమ్యునోలజీ మరియు స్టెమ్ సెల్ బయాలజీలో ప్రత్యేకత కలిగిన పరిశోధనా సంస్థలు క్రియోప్రెజర్వ్ కణాలకు క్రియోవియల్స్ ఉపయోగిస్తాయి.

ఈ విధంగా సంరక్షించబడిన కణాలు B మరియు T కణాలు, CHO కణాలు, హేమాటోపోయిటిక్ కాండం మరియు పుట్టుకతో వచ్చే కణాలు, హైబ్రిడోమాస్, పేగు కణాలు, మాక్రోఫేజెస్, మెసెన్చైమల్ కాండం మరియు పుట్టుకతో వచ్చే కణాలు, మోనోసైట్లు, మైలోమా, NK కణాలు మరియు ప్లూరిపోటెంట్ మూలకణాలు.

ద్రవ నత్రజనిలో క్రియోవియల్స్‌ను ఎలా నిల్వ చేయాలో అవలోకనం

క్రియోప్రెజర్వేషన్ అనేది కణాలు మరియు ఇతర జీవ నిర్మాణాలను చాలా తక్కువ ఉష్ణోగ్రతలకు చల్లబరుస్తుంది. కణాలను కణాల సాధ్యత కోల్పోకుండా సంవత్సరాలుగా ద్రవ నత్రజనిలో నిల్వ చేయవచ్చు. ఇది ఉపయోగించిన విధానాల రూపురేఖలు.

కణాల తయారీ

నమూనాలను తయారుచేసే ఖచ్చితమైన పద్ధతి సెల్ రకాన్ని బట్టి మారుతుంది, కాని సాధారణంగా, కణాలు సేకరించి సెల్ అధికంగా ఉండే గుళికను అభివృద్ధి చేయడానికి సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయబడతాయి. ఈ గుళికలను క్రియోప్రొటెక్టెంట్ లేదా క్రియోప్రెజర్వేషన్ మాధ్యమంతో కలిపిన సూపర్నాటెంట్లో తిరిగి ఇవ్వబడుతుంది.

క్రియోప్రెజర్వేషన్ మాధ్యమం

ఈ మాధ్యమం తక్కువ-ఉష్ణోగ్రత పరిసరాలలో కణాలను సంరక్షించడానికి ఉపయోగించబడుతుంది, అవి ఇంట్రా మరియు ఎక్స్‌ట్రాసెల్యులర్ స్ఫటికాల ఏర్పాటును నిరోధించడం ద్వారా మరియు కణాల మరణాన్ని నిరోధించడం ద్వారా లోబడి ఉంటాయి. గడ్డకట్టే, నిల్వ మరియు కరిగించే ప్రక్రియల సమయంలో కణాలు మరియు కణజాలాలకు సురక్షితమైన, రక్షిత వాతావరణాన్ని అందించడం వారి పాత్ర.

తాజా స్తంభింపచేసిన ప్లాస్మా (ఎఫ్‌ఎఫ్‌పి), హెపారినైజ్డ్ ప్లాస్మలైట్ ద్రావణం లేదా సీరం లేని మాధ్యమం, జంతువుల భాగం-రహిత పరిష్కారాలు డైమెథైల్ సల్ఫాక్సైడ్ (డిఎంఎస్‌ఓ) లేదా గ్లిసరాల్ వంటి క్రియోప్రొటెక్టెంట్లతో కలుపుతారు.

తిరిగి ద్రవ నమూనా గుళికలు పాలీప్రొఫైలిన్ క్రియోవియల్స్ వంటివి ఆల్కహోట్ చేయబడతాయిసుజౌ ఏస్ బయోమెడికల్ కంపెనీ క్రయోజెనిక్ స్టోరేజ్ వైయల్స్.

క్రియోవియల్స్‌ను అతిగా నింపడం చాలా ముఖ్యం, ఎందుకంటే ఇది పగుళ్లు మరియు విషయాల విడుదల (1) ప్రమాదాన్ని పెంచుతుంది.

నియంత్రిత ఫ్రీజ్ రేటు

సాధారణంగా, కణాల విజయవంతమైన క్రియోప్రెజర్వేషన్ కోసం నెమ్మదిగా నియంత్రిత ఫ్రీజ్ రేటు ఉపయోగించబడుతుంది.

నమూనాలను క్రయోజెనిక్ కుండలుగా మార్చిన తరువాత, అవి తడి మంచు మీద లేదా 4 ℃ రిఫ్రిజిరేటర్‌లో ఉంచబడతాయి మరియు గడ్డకట్టే విధానం 5 నిమిషాల్లో ప్రారంభించబడుతుంది. సాధారణ గైడ్‌గా, కణాలు నిమిషానికి -1 నుండి -3 వరకు (2) చల్లబరుస్తాయి. ప్రోగ్రామబుల్ కూలర్ ఉపయోగించి లేదా –90 ° C నుండి –90 ° C నియంత్రిత రేటు ఫ్రీజర్ వరకు ఉంచిన ఇన్సులేట్ బాక్స్‌లో కుండలను ఉంచడం ద్వారా ఇది సాధించబడుతుంది.

ద్రవ నత్రజనికి బదిలీ

స్తంభింపచేసిన క్రయోజెనిక్ కుండలు నిరవధిక కాలానికి ద్రవ నత్రజని ట్యాంకుకు బదిలీ చేయబడతాయి -135 కన్నా తక్కువ ఉష్ణోగ్రత నిర్వహించబడుతుంది.

ఈ అల్ట్రా-తక్కువ ఉష్ణోగ్రతను ద్రవ లేదా ఆవిరి దశ నత్రజనిలో ఇమ్మర్షన్ ద్వారా పొందవచ్చు.

ద్రవ లేదా ఆవిరి దశ?

ద్రవ దశలో నత్రజనిలో నిల్వ చల్లని ఉష్ణోగ్రతను సంపూర్ణ అనుగుణ్యతతో నిర్వహిస్తుంది, కానీ ఈ క్రింది కారణాల వల్ల తరచుగా సిఫారసు చేయబడదు:

• ద్రవ నత్రజని యొక్క పెద్ద వాల్యూమ్ల (లోతు) అవసరం, ఇది సంభావ్య ప్రమాదం. దీని కారణంగా కాలిన గాయాలు లేదా ph పిరి పీల్చుకోవడం నిజమైన ప్రమాదం.
• యాస్పెర్గిల్లస్, హెప్ బి మరియు వైరల్ స్ప్రెడ్ వంటి అంటు ఏజెంట్లచే క్రాస్-కాలుష్యం యొక్క డాక్యుమెంట్ కేసులు ద్రవ నత్రజని మాధ్యమం (2,3)
• ఇమ్మర్షన్ సమయంలో ద్రవ నత్రజని కుండలలోకి లీక్ అయ్యే అవకాశం ఉంది. నిల్వ నుండి తీసివేసి గది ఉష్ణోగ్రతకు వేడెక్కినప్పుడు, నత్రజని వేగంగా విస్తరిస్తుంది. పర్యవసానంగా, ద్రవ నత్రజని నిల్వ నుండి తీసివేయబడినప్పుడు సీసా ముక్కలు ముక్కలైపోవచ్చు, ఎగిరే శిధిలాల నుండి ప్రమాదాన్ని సృష్టిస్తుంది మరియు విషయాలకు గురికావడం (1, 4).

ఈ కారణాల వల్ల, అల్ట్రా-తక్కువ ఉష్ణోగ్రత నిల్వ సాధారణంగా ఆవిరి దశ నత్రజనిలో ఉంటుంది. నమూనాలను తప్పనిసరిగా ద్రవ దశలో నిల్వ చేసినప్పుడు, ప్రత్యేకమైన క్రియోఫ్లెక్స్ గొట్టాలను ఉపయోగించాలి.

ఆవిరి దశకు ఇబ్బంది ఏమిటంటే, నిలువు ఉష్ణోగ్రత ప్రవణత సంభవిస్తుంది, ఫలితంగా -135 ℃ మరియు -190 between మధ్య ఉష్ణోగ్రత హెచ్చుతగ్గులు. ఇది ద్రవ నత్రజని స్థాయిలు మరియు ఉష్ణోగ్రత వైవిధ్యాల (5) యొక్క జాగ్రత్తగా మరియు శ్రద్ధగల పర్యవేక్షణ అవసరం.

చాలా మంది తయారీదారులు క్రయోవియల్స్ -135 ℃ వరకు నిల్వ చేయడానికి లేదా ఆవిరి దశలో మాత్రమే ఉపయోగించడానికి అనుకూలంగా ఉండాలని సిఫార్సు చేస్తున్నారు.

మీ క్రియోప్రెజర్డ్ కణాలను కరిగించడం

కరిగించే విధానం స్తంభింపచేసిన సంస్కృతికి ఒత్తిడితో కూడుకున్నది, మరియు కణాల సరైన సాధ్యత, పునరుద్ధరణ మరియు కార్యాచరణను నిర్ధారించడానికి సరైన నిర్వహణ మరియు సాంకేతికత అవసరం. ఖచ్చితమైన కరిగించే ప్రోటోకాల్‌లు నిర్దిష్ట సెల్ రకాలపై ఆధారపడి ఉంటాయి. ఏదేమైనా, వేగంగా కరిగించడం ప్రామాణికంగా పరిగణించబడుతుంది:

• సెల్యులార్ రికవరీపై ఏదైనా ప్రభావాన్ని తగ్గించండి
• గడ్డకట్టే మీడియాలో ఉన్న ద్రావణాలకు ఎక్స్పోజర్ సమయాన్ని తగ్గించడంలో సహాయపడండి
• ఐస్ రీక్రిస్టలైజేషన్ ద్వారా ఏదైనా నష్టాన్ని తగ్గించండి

నీటి స్నానాలు, పూసల స్నానాలు లేదా ప్రత్యేకమైన ఆటోమేటెడ్ పరికరాలను సాధారణంగా కరిగించడానికి ఉపయోగిస్తారు.

చాలా తరచుగా 1 సెల్ లైన్ ఒక సమయంలో 1-2 నిమిషాలు కరిగించబడుతుంది, 37 ℃ నీటి స్నానంలో శాంతముగా తిరగడం ద్వారా, అవి జనాభాలో ఒక చిన్న బిట్ మంచు మిగిలిపోయే వరకు అవి ప్రీవరార్మ్డ్ గ్రోత్ మాధ్యమంలో కడిగివేయబడతాయి.

క్షీరద పిండాలు వంటి కొన్ని కణాలకు, వాటి మనుగడకు నెమ్మదిగా వేడెక్కడం అవసరం.

కణాలు ఇప్పుడు సెల్ సంస్కృతి, సెల్ ఐసోలేషన్ లేదా హేమాటోపోయిటిక్ మూలకణాల విషయంలో - మైలోఅబ్లేటివ్ థెరపీకి ముందు దాత మూలక కణాల సమగ్రతకు హామీ ఇవ్వడానికి సాధ్యత అధ్యయనాలు.

సంస్కృతిలో లేపనం చేయడానికి సెల్ సాంద్రతలను నిర్ణయించడానికి సెల్ గణనను నిర్వహించడానికి ఉపయోగించే ప్రీవాష్ చేసిన నమూనా యొక్క చిన్న ఆల్కాట్‌లను తీసుకోవడం సాధారణ పద్ధతి. అప్పుడు మీరు సెల్ ఐసోలేషన్ విధానాల ఫలితాలను అంచనా వేయవచ్చు మరియు సెల్ సాధ్యతను నిర్ణయించవచ్చు.

క్రియోవియల్స్ నిల్వ కోసం ఉత్తమ పద్ధతులు

క్రియోవియల్స్‌లో నిల్వ చేయబడిన నమూనాల విజయవంతమైన క్రియోప్రెజర్వేషన్ సరైన నిల్వ మరియు రికార్డ్ కీపింగ్‌తో సహా ప్రోటోకాల్‌లోని అనేక అంశాలపై ఆధారపడి ఉంటుంది.

• నిల్వ స్థానాల మధ్య విభజన కణాలు.
• క్రాస్-కాలుష్యాన్ని నివారించండి-తదుపరి ఉపయోగం ముందు సింగిల్-యూజ్ స్టెరైల్ క్రయోజెనిక్ వైల్స్ లేదా ఆటోక్లేవ్ కోసం ఎంచుకోండి
• మీ కణాల కోసం తగిన పరిమాణపు కుండలను ఉపయోగించండి- కుండలు 1 మరియు 5 ఎంఎల్‌ల మధ్య వాల్యూమ్‌ల పరిధిలో వస్తాయి. పగుళ్లు వచ్చే ప్రమాదాన్ని తగ్గించడానికి కుండలను అతిగా నింపండి.
• అంతర్గత లేదా బాహ్యంగా థ్రెడ్ చేసిన క్రయోజెనిక్ కుండలను ఎంచుకోండి- భద్రతా చర్యల కోసం అంతర్గతంగా థ్రెడ్ చేసిన కుండలను కొన్ని విశ్వవిద్యాలయాలు సిఫార్సు చేస్తాయి - అవి నింపేటప్పుడు లేదా ద్రవ నత్రజనిలో నిల్వ చేసినప్పుడు కాలుష్యాన్ని కూడా నిరోధించగలవు.
• లీకేజీని నిరోధించండి-లీక్ మరియు కాలుష్యాన్ని నివారించడానికి స్క్రూ-క్యాప్ లేదా ఓ-రింగులలో అచ్చు వేయబడిన ద్వి-ఇంజెక్ట్ ముద్రలను వాడండి.
• 2D బార్‌కోడ్‌లు మరియు లేబుల్ కుండలను ఉపయోగించండి- గుర్తించదగినదాన్ని నిర్ధారించడానికి, పెద్ద రచనా ప్రాంతాలతో ఉన్న కుండలు ప్రతి సీసాను తగినంతగా లేబుల్ చేయటానికి వీలు కల్పిస్తాయి. 2D బార్‌కోడ్‌లు నిల్వ నిర్వహణ మరియు రికార్డ్ కీపింగ్‌కు సహాయపడతాయి. కలర్ కోడెడ్ క్యాప్స్ సులభంగా గుర్తించడానికి ఉపయోగపడతాయి.
• తగినంత నిల్వ నిర్వహణ- కణాలు కోల్పోకుండా చూసుకోవడానికి, నిల్వ నాళాలు ఉష్ణోగ్రత మరియు ద్రవ నత్రజని స్థాయిలను నిరంతరం పర్యవేక్షించాలి. లోపాల వినియోగదారులను అప్రమత్తం చేయడానికి అలారాలను అమర్చాలి.

భద్రతా జాగ్రత్తలు

ఆధునిక పరిశోధనలో ద్రవ నత్రజని సాధారణ పద్ధతిగా మారింది, కాని తప్పుగా ఉపయోగించినట్లయితే తీవ్రమైన గాయాల ప్రమాదాన్ని కలిగి ఉంటుంది.

ద్రవ నత్రజనిని నిర్వహించేటప్పుడు ఫ్రాస్ట్‌బైట్, కాలిన గాయాలు మరియు ఇతర ప్రతికూల సంఘటనల ప్రమాదాన్ని తగ్గించడానికి సరైన వ్యక్తిగత రక్షణ పరికరాలు (పిపిఇ) ధరించాలి. ధరించండి

• క్రయోజెనిక్ చేతి తొడుగులు
• ప్రయోగశాల కోటు
• ఇంపాక్ట్ రెసిస్టెంట్ ఫుల్ ఫేస్ షీల్డ్ కూడా మెడను కప్పివేస్తుంది
• క్లోజ్డ్-కాలి బూట్లు
• స్ప్లాష్‌ప్రూఫ్ ప్లాస్టిక్ ఆప్రాన్

ద్రవ నత్రజని రిఫ్రిజిరేటర్లను బాగా వెంటిలేషన్ చేసిన ప్రాంతాల్లో ఉంచాలి, అస్ఫిక్సియేషన్ ప్రమాదాన్ని తగ్గించడానికి-నత్రజని ఆవిరి మరియు వాతావరణ ఆక్సిజన్‌ను స్థానభ్రంశం చేస్తుంది. పెద్ద వాల్యూమ్ స్టోర్లలో తక్కువ ఆక్సిజన్ అలారం వ్యవస్థలు ఉండాలి.

ద్రవ నత్రజనిని నిర్వహించేటప్పుడు జంటగా పనిచేయడం అనువైనది మరియు సాధారణ పని గంటలకు వెలుపల దాని ఉపయోగం నిషేధించబడాలి.

మీ వర్క్‌ఫ్లో మద్దతు ఇవ్వడానికి క్రియోవియల్స్

సుజౌ ఏస్ బయోమెడికల్ కంపెనీ వివిధ రకాల కణాల కోసం మీ క్రియోప్రెజర్వేషన్ అవసరాలను తీర్చగల విస్తృత ఉత్పత్తులను అందిస్తుంది. పోర్ట్‌ఫోలియోలో ట్యూబ్‌సాస్ శ్రేణి అలాగే శుభ్రమైన క్రియోవియల్స్ ఉన్నాయి.

మా క్రియోవియల్స్:

• ల్యాబ్ స్క్రూ క్యాప్ 0.5 ఎంఎల్ 1.5 ఎంఎల్ 2.0 ఎంఎల్ క్రియోవియల్ క్రయోజెనిక్ వైల్స్ రబ్బరు పట్టీతో శంఖాకార దిగువ క్రియోట్యూబ్

  ● 0.5 ఎంఎల్, 1.5 ఎంఎల్, 2.0 ఎంఎల్ స్పెసిఫికేషన్, లంగాతో లేదా లంగా లేకుండా
  ● శంఖాకార లేదా స్వీయ స్టాండింగ్ డిజైన్, శుభ్రమైన లేదా నాన్ స్టెరైల్ రెండూ అందుబాటులో ఉన్నాయి
  స్క్రూ క్యాప్ ట్యూబ్స్ మెడికల్ గ్రేడ్ పాలీప్రొఫైలిన్తో తయారు చేయబడ్డాయి
  ● పిపి క్రియోట్యూబ్ కుండలను పదేపదే స్తంభింపచేసి కరిగించవచ్చు
  Cap బాహ్య టోపీ డిజైన్ నమూనా చికిత్స సమయంలో కాలుష్యం సంభావ్యతను తగ్గిస్తుంది.
  Cap స్క్రూ క్యాప్ క్రయోజెనిక్ గొట్టాలు ఉపయోగం కోసం యూనివర్సల్ స్క్రూ థ్రెడ్లు
  ● గొట్టాలు చాలా సాధారణ రోటర్లకు సరిపోతాయి
  ● క్రయోజెనిక్ ట్యూబ్ ఓ-రింగ్ గొట్టాలు ప్రామాణిక 1-అంగుళాలు మరియు 2-అంగుళాలు, 48WELL, 81WELL ， 96WELL మరియు 100WELL ఫ్రీజర్ బాక్స్‌లకు సరిపోతాయి
  The 121 ° C కు ఆటోక్లేవబుల్ మరియు -86 ° C కు గడ్డకట్టవచ్చు

  పార్ట్ నం	పదార్థం	వాల్యూమ్	టోపీరంగు	PCS/బ్యాగ్	బ్యాగులు/కేసు
  ACT05-BL-N	PP	0.5 మి.లీ	నలుపు, పసుపు, నీలం, ఎరుపు, ple దా, తెలుపు	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5 ఎంఎల్	నలుపు, పసుపు, నీలం, ఎరుపు, ple దా, తెలుపు	500	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5 ఎంఎల్	నలుపు, పసుపు, నీలం, ఎరుపు, ple దా, తెలుపు	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0 ఎంఎల్	నలుపు, పసుపు, నీలం, ఎరుపు, ple దా, తెలుపు	500	10