ప్రక్రియల ప్రామాణీకరణలో వాటి ఆప్టిమైజేషన్ మరియు తదనంతర స్థాపన మరియు సమన్వయం ఉంటాయి, ఇది దీర్ఘకాలిక సరైన పనితీరును అనుమతిస్తుంది - వినియోగదారుడితో సంబంధం లేకుండా. ప్రామాణీకరణ అధిక-నాణ్యత ఫలితాలను, అలాగే వాటి పునరుత్పత్తి మరియు పోలికను నిర్ధారిస్తుంది.
(క్లాసిక్) PCR యొక్క లక్ష్యం నమ్మకమైన మరియు పునరుత్పాదక ఫలితాన్ని ఉత్పత్తి చేయడం. కొన్ని అనువర్తనాలకు, దిగుబడిPCR ఉత్పత్తికూడా సంబంధితంగా ఉంటుంది. ఈ ప్రతిచర్యల కోసం, నమూనాలు రాజీ పడకుండా మరియు PCR వర్క్ఫ్లో స్థిరంగా ఉండేలా జాగ్రత్త తీసుకోవాలి. ప్రత్యేకంగా, ఇది తప్పుడు సానుకూల లేదా తప్పుడు ప్రతికూల ఫలితాలకు దారితీసే లేదా PCR ప్రతిచర్యను నిరోధించే కాలుష్యాల ప్రవేశాన్ని తగ్గించడానికి దారితీస్తుంది. ఇంకా, ప్రతిచర్య పరిస్థితులు ఒక రన్లోని ప్రతి వ్యక్తి నమూనాకు సాధ్యమైనంత ఒకేలా ఉండాలి మరియు తదుపరి ప్రతిచర్యలకు (అదే పద్ధతిలో) బదిలీ చేయబడాలి. ఇది ప్రతిచర్యల కూర్పును అలాగే సైక్లర్లోని ఉష్ణోగ్రత నియంత్రణ రకాన్ని సూచిస్తుంది. వినియోగదారు లోపాలను, సాధ్యమైనంతవరకు నివారించాలి.
PCR తయారీ సమయంలో మరియు దాని అమలు అంతటా ఎదురయ్యే సవాళ్లను మరియు PCR వర్క్ఫ్లోల ప్రామాణీకరణకు ఉపయోగించే సాధనాలు మరియు వినియోగ వస్తువులకు సంబంధించి పరిష్కారాలకు ఉన్న విధానాలను మేము క్రింద ప్రదర్శిస్తాము.
ప్రతిచర్య తయారీ
ప్రతిచర్య భాగాలను వరుసగా PCR-నాళాలు లేదా ప్లేట్లలోకి పంపిణీ చేయడంలో బహుళ సవాళ్లు ఉంటాయి, వీటిని అధిగమించాలి:
ప్రతిచర్య పరిస్థితులు
సాధ్యమైనంత ఒకేలాంటి ప్రతిచర్య పరిస్థితులను లక్ష్యంగా చేసుకునేటప్పుడు వ్యక్తిగత భాగాల యొక్క ఖచ్చితమైన మరియు ఖచ్చితమైన మోతాదు తప్పనిసరి. మంచి పైపెట్టింగ్ టెక్నిక్తో పాటు, సరైన సాధనాన్ని ఎంచుకోవడం చాలా ముఖ్యం. PCR మాస్టర్-మిక్స్లలో తరచుగా స్నిగ్ధతను పెంచే లేదా నురుగును ఉత్పత్తి చేసే పదార్థాలు ఉంటాయి. పైపెట్టింగ్ ప్రక్రియలో, ఇవి గణనీయమైన చెమ్మగిల్లడానికి దారితీస్తాయి.పైపెట్ చిట్కాలుతద్వారా పైపెటింగ్ ఖచ్చితత్వాన్ని తగ్గిస్తుంది. డైరెక్ట్ డిస్పెన్సింగ్ సిస్టమ్స్ లేదా చెమ్మగిల్లడానికి తక్కువ అవకాశం ఉన్న ప్రత్యామ్నాయ పైపెట్ చిట్కాలను ఉపయోగించడం వల్ల పైపెటింగ్ ప్రక్రియ యొక్క ఖచ్చితత్వం మరియు ఖచ్చితత్వం మెరుగుపడుతుంది.
కాలుష్యాలు
పంపిణీ ప్రక్రియలో, ఏరోసోల్లు ఉత్పత్తి అవుతాయి, వీటిని పైపెట్ లోపలికి చేరుకోవడానికి అనుమతిస్తే, తదుపరి పైపెట్టింగ్ దశలో మరొక నమూనాను కలుషితం చేసే అవకాశం ఉంది. ఫిల్టర్ చిట్కాలు లేదా ప్రత్యక్ష స్థానభ్రంశం వ్యవస్థలను ఉపయోగించడం ద్వారా దీనిని నివారించవచ్చు.
వంటి వినియోగ వస్తువులుచిట్కాలు, PCR వర్క్ఫ్లోలో ఉపయోగించే నాళాలు మరియు ప్లేట్లలో నమూనాను రాజీ చేసే లేదా ఫలితాన్ని తప్పుదారి పట్టించే పదార్థాలు ఉండకూడదు. వీటిలో DNA, DNases, RNases మరియు PCR ఇన్హిబిటర్లు, అలాగే ప్రతిచర్య సమయంలో పదార్థం నుండి లీచ్ అయ్యే అవకాశం ఉన్న భాగాలు - లీచబుల్స్ అని పిలువబడే పదార్థాలు ఉన్నాయి.
వినియోగదారు లోపం
ఎక్కువ నమూనాలను ప్రాసెస్ చేస్తే, దోష ప్రమాదం ఎక్కువగా ఉంటుంది. నమూనాను తప్పు పాత్రలోకి లేదా తప్పు బావిలోకి పైపు వేయడం సులభంగా జరుగుతుంది. బావులను సులభంగా గుర్తించగలిగేలా గుర్తించడం ద్వారా ఈ ప్రమాదాన్ని గణనీయంగా తగ్గించవచ్చు. పంపిణీ దశల ఆటోమేషన్ ద్వారా, "మానవ కారకం", అంటే లోపాలు మరియు వినియోగదారు సంబంధిత వైవిధ్యాలు తగ్గించబడతాయి, తద్వారా పునరుత్పత్తి సామర్థ్యం పెరుగుతుంది, ముఖ్యంగా చిన్న ప్రతిచర్య వాల్యూమ్ల విషయంలో. దీనికి వర్క్స్టేషన్లో ఉపయోగించడానికి తగినంత డైమెన్షనల్ స్థిరత్వం కలిగిన ప్లేట్లు అవసరం. జతచేయబడిన బార్కోడ్లు అదనపు యంత్ర-రీడబిలిటీని అందిస్తాయి, ఇది మొత్తం ప్రక్రియ అంతటా నమూనా ట్రాకింగ్ను సులభతరం చేస్తుంది.
థర్మోసైక్లర్ యొక్క ప్రోగ్రామింగ్
ఒక పరికరాన్ని ప్రోగ్రామింగ్ చేయడం చాలా సమయం తీసుకుంటుంది మరియు దోషాలకు దారితీస్తుంది. ఈ ప్రక్రియ దశను సులభతరం చేయడానికి మరియు ముఖ్యంగా, దానిని సురక్షితంగా చేయడానికి వివిధ PCR థర్మల్ సైక్లర్ లక్షణాలు కలిసి పనిచేస్తాయి:
సులభమైన ఆపరేషన్ మరియు మంచి వినియోగదారు మార్గదర్శకత్వం సమర్థవంతమైన ప్రోగ్రామింగ్కు ఆధారం. ఈ పునాదిపై ఆధారపడి, పాస్వర్డ్-రక్షిత వినియోగదారు నిర్వహణ ఒకరి స్వంత ప్రోగ్రామ్లను ఇతర వినియోగదారులు మార్చకుండా నిరోధిస్తుంది. బహుళ సైక్లర్లు (ఒకే రకమైన) ఉపయోగంలో ఉంటే, ఒక ప్రోగ్రామ్ను USB లేదా కనెక్టివిటీ ద్వారా ఒక పరికరం నుండి మరొక పరికరానికి నేరుగా బదిలీ చేయగలిగితే అది ప్రయోజనకరంగా ఉంటుంది. కంప్యూటర్ సాఫ్ట్వేర్ కంప్యూటర్లో ప్రోగ్రామ్లు, వినియోగదారు హక్కులు మరియు పత్రాల కేంద్ర మరియు సురక్షితమైన నిర్వహణను అనుమతిస్తుంది.
PCR రన్
రన్ సమయంలో, ప్రతిచర్య పాత్రలో DNA విస్తరించబడుతుంది, ఇక్కడ ప్రతి నమూనా ఒకేలాంటి, స్థిరమైన ప్రతిచర్య పరిస్థితులకు లోబడి ఉండాలి. ఈ ప్రక్రియకు ఈ క్రింది అంశాలు సంబంధితంగా ఉంటాయి:
ఉష్ణోగ్రత నియంత్రణ
ఉష్ణోగ్రత నియంత్రణలో అద్భుతమైన ఖచ్చితత్వం మరియు సైక్లర్ బ్లాక్ యొక్క సజాతీయత అన్ని నమూనాల ఉష్ణోగ్రతను సమానంగా కండిషనింగ్ చేయడానికి ఆధారం. తాపన మరియు శీతలీకరణ మూలకాల (పెల్టియర్ మూలకాలు) యొక్క అధిక నాణ్యత, అలాగే వీటిని బ్లాక్కు కనెక్ట్ చేసే విధానం, "ఎడ్జ్ ఎఫెక్ట్" అని పిలువబడే ఉష్ణోగ్రత వ్యత్యాసాల ప్రమాదాన్ని నిర్ణయించే నిర్ణయాత్మక అంశాలు.
బాష్పీభవనం
బాష్పీభవనం కారణంగా ప్రతిచర్య సమయంలో వ్యక్తిగత ప్రతిచర్య భాగాల సాంద్రతలు మారకూడదు. లేకపోతే, చాలా తక్కువPCR ఉత్పత్తిఉత్పత్తి కావచ్చు లేదా అసలు ఉత్పత్తి కాకపోవచ్చు. అందువల్ల సురక్షితమైన సీలింగ్ను నిర్ధారించడం ద్వారా బాష్పీభవనాన్ని తగ్గించడం చాలా ముఖ్యం. ఈ సందర్భంలో, థర్మోసైక్లర్ యొక్క వేడిచేసిన మూత మరియు పాత్ర యొక్క సీల్ కలిసి పనిచేస్తాయి. వివిధ సీలింగ్ ఎంపికలు అందుబాటులో ఉన్నాయి.PCR ప్లేట్లు (లింక్: సీలింగ్ వ్యాసం), దీని ద్వారా హీట్ సీలింగ్ ద్వారా ఉత్తమ సీల్ సాధించబడుతుంది. సైక్లర్ మూత యొక్క కాంటాక్ట్ ప్రెజర్ను ఎంచుకున్న సీల్కు సర్దుబాటు చేయగలిగినంత వరకు, ఇతర మూసివేతలు కూడా అనుకూలంగా ఉండవచ్చు.
దీర్ఘకాలంలో ఖచ్చితమైన మరియు పునరుత్పాదక ఫలితాలను కాపాడటానికి ప్రక్రియ ప్రామాణీకరణ అమలులో ఉంది. పరికరాలు ఎల్లప్పుడూ మంచి పని స్థితిలో ఉండేలా చూసుకోవడానికి దీని క్రమం తప్పకుండా నిర్వహణ ఉంటుంది. ఉత్పత్తి చేయబడిన అన్ని లాట్లలో అన్ని వినియోగ వస్తువులు స్థిరంగా అధిక నాణ్యతతో ఉండాలి మరియు వాటి నమ్మకమైన లభ్యతకు హామీ ఇవ్వాలి.
పోస్ట్ సమయం: నవంబర్-29-2022