Cryovialsதிரவ நைட்ரஜனால் நிரப்பப்பட்ட தேவாரங்களில் செல் கோடுகள் மற்றும் பிற முக்கியமான உயிரியல் பொருட்களின் கிரையோஜெனிக் சேமிப்பிற்காக பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.

திரவ நைட்ரஜனில் உள்ள செல்களை வெற்றிகரமாகப் பாதுகாப்பதில் பல நிலைகள் உள்ளன. அடிப்படைக் கொள்கை மெதுவான முடக்கம் என்றாலும், சரியான நுட்பம் பயன்படுத்தப்படும் செல் வகை மற்றும் பயன்படுத்தப்படும் கிரையோபுரோடெக்டண்ட் ஆகியவற்றைப் பொறுத்தது. இத்தகைய குறைந்த வெப்பநிலையில் செல்களை சேமிக்கும் போது கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ள வேண்டிய பல பாதுகாப்பு பரிசீலனைகள் மற்றும் சிறந்த நடைமுறைகள் உள்ளன.

இந்த இடுகையானது திரவ நைட்ரஜனில் கிரையோவியல்கள் எவ்வாறு சேமிக்கப்படுகின்றன என்பதைப் பற்றிய கண்ணோட்டத்தை வழங்குவதை நோக்கமாகக் கொண்டுள்ளது.

Cryovials என்றால் என்ன

Cryovials என்பது சிறிய, மூடிய குப்பிகள், திரவ மாதிரிகளை மிகக் குறைந்த வெப்பநிலையில் சேமிக்க வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளது. கிரையோபுரோடெக்டண்டில் பாதுகாக்கப்பட்ட செல்கள் திரவ நைட்ரஜனுடன் நேரடி தொடர்புக்கு வராமல் இருப்பதை உறுதி செய்கின்றன, அதே நேரத்தில் திரவ நைட்ரஜனின் தீவிர குளிரூட்டும் விளைவால் பயனடையும் போது செல்லுலார் எலும்பு முறிவுகளின் அபாயத்தைக் குறைக்கிறது.

குப்பிகள் பொதுவாக தொகுதிகள் மற்றும் வடிவமைப்புகளின் வரம்பில் கிடைக்கின்றன - அவை தட்டையான அல்லது வட்டமான அடிப்பகுதிகளுடன் உள் அல்லது வெளிப்புறமாக திரிக்கப்பட்டிருக்கும். மலட்டு மற்றும் மலட்டுத்தன்மையற்ற வடிவங்களும் கிடைக்கின்றன.

யார் பயன்படுத்துகிறார்கள்சைரோவல்ஸ்திரவ நைட்ரஜனில் செல்களை சேமிக்க

NHS மற்றும் தனியார் ஆய்வகங்கள், மற்றும் தண்டு இரத்த வங்கி, எபிடெலியல் செல் உயிரியல், நோயெதிர்ப்பு மற்றும் ஸ்டெம் செல் உயிரியல் ஆகியவற்றில் நிபுணத்துவம் பெற்ற ஆராய்ச்சி நிறுவனங்கள், செல்களை கிரையோபிசர்வ் செய்ய கிரையோவியல்களைப் பயன்படுத்துகின்றன.

இவ்வாறு பாதுகாக்கப்படும் செல்கள் B மற்றும் T செல்கள், CHO செல்கள், ஹெமாட்டோபாய்டிக் ஸ்டெம் மற்றும் ப்ரோஜெனிட்டர் செல்கள், ஹைப்ரிடோமாஸ், குடல் செல்கள், மேக்ரோபேஜ்கள், மெசன்கிமல் ஸ்டெம் மற்றும் புரோஜெனிட்டர் செல்கள், மோனோசைட்டுகள், மைலோமா, என்கே செல்கள் மற்றும் ப்ளூரிபோடென்ட் ஸ்டெம் செல்கள் ஆகியவை அடங்கும்.

திரவ நைட்ரஜனில் கிரையோவியல்களை எவ்வாறு சேமிப்பது என்பது பற்றிய கண்ணோட்டம்

Cryopreservation என்பது செல்கள் மற்றும் பிற உயிரியல் கட்டமைப்புகளை மிகக் குறைந்த வெப்பநிலையில் குளிர்விப்பதன் மூலம் பாதுகாக்கும் ஒரு செயல்முறையாகும். உயிரணுக்களின் நம்பகத்தன்மையை இழக்காமல் பல ஆண்டுகளாக திரவ நைட்ரஜனில் செல்களை சேமிக்க முடியும். இது பயன்படுத்தப்படும் நடைமுறைகளின் சுருக்கமாகும்.

செல் தயாரிப்பு

மாதிரிகளைத் தயாரிப்பதற்கான சரியான முறை செல் வகையைப் பொறுத்து மாறுபடும், ஆனால் பொதுவாக, செல்கள் சேகரிக்கப்பட்டு மையவிலக்கு செய்யப்பட்டு செல் நிறைந்த துகள்களை உருவாக்குகின்றன. இந்த துகள்கள் பின்னர் கிரையோபுரோடெக்டண்ட் அல்லது கிரையோபிரெசர்வேஷன் ஊடகத்துடன் கலந்த சூப்பர்நேட்டண்டில் மீண்டும் இணைக்கப்படுகிறது.

Cryopreservation ஊடகம்

இந்த ஊடகம் குறைந்த வெப்பநிலை சூழலில் செல்களைப் பாதுகாக்கப் பயன்படுகிறது, அவை உள் மற்றும் புற-செல்லுலார் படிகங்களை உருவாக்குவதைத் தடுப்பதன் மூலம் உயிரணு இறப்பைத் தடுக்கின்றன. உறைதல், சேமிப்பு மற்றும் உருகுதல் செயல்முறைகளின் போது செல்கள் மற்றும் திசுக்களுக்கு பாதுகாப்பான, பாதுகாப்பான சூழலை வழங்குவதே அவற்றின் பங்கு.

புதிய உறைந்த பிளாஸ்மா (FFP), ஹெபரைனைஸ் செய்யப்பட்ட பிளாஸ்மாலைட் கரைசல் அல்லது சீரம் இல்லாத, விலங்கு கூறுகள் இல்லாத கரைசல்கள் போன்ற ஒரு ஊடகம் டைமெதில் சல்பாக்சைடு (DMSO) அல்லது கிளிசரால் போன்ற கிரையோபுரோடெக்டர்களுடன் கலக்கப்படுகிறது.

மறு-திரவமாக்கப்பட்ட மாதிரித் துகள்கள் பாலிப்ரொப்பிலீன் கிரையோவியல்களாக மாற்றப்படுகின்றனSuzhou Ace பயோமெடிக்கல் நிறுவனம் Cryogenic Storage Vials.

கிரையோவல்களை அதிகமாக நிரப்பாமல் இருப்பது முக்கியம், ஏனெனில் இது விரிசல் மற்றும் உள்ளடக்கங்களை வெளியிடும் அபாயத்தை அதிகரிக்கும் (1).

கட்டுப்படுத்தப்பட்ட உறைதல் விகிதம்

பொதுவாக, செல்களின் வெற்றிகரமான கிரையோப்ரெசர்வேஷனுக்கு மெதுவான கட்டுப்படுத்தப்பட்ட முடக்கம் வீதம் பயன்படுத்தப்படுகிறது.

மாதிரிகள் கிரையோஜெனிக் குப்பிகளில் மாற்றப்பட்ட பிறகு, அவை ஈரமான பனியில் அல்லது 4℃ குளிர்சாதன பெட்டியில் வைக்கப்பட்டு 5 நிமிடங்களுக்குள் உறைய வைக்கும் செயல்முறை தொடங்கும். ஒரு பொது வழிகாட்டியாக, செல்கள் நிமிடத்திற்கு -1 முதல் -3 என்ற விகிதத்தில் குளிர்விக்கப்படுகின்றன (2). இது ஒரு நிரல்படுத்தக்கூடிய குளிரூட்டியைப் பயன்படுத்தி அல்லது குப்பிகளை -70°C முதல் –90°C வரையிலான கட்டுப்படுத்தப்பட்ட விகித உறைவிப்பாளரில் வைக்கப்பட்டுள்ள காப்பிடப்பட்ட பெட்டியில் வைப்பதன் மூலம் அடையப்படுகிறது.

திரவ நைட்ரஜனுக்கு மாற்றவும்

உறைந்த கிரையோஜெனிக் குப்பிகள் -135℃ க்கும் குறைவான வெப்பநிலை பராமரிக்கப்பட்டால், காலவரையின்றி திரவ நைட்ரஜன் தொட்டிக்கு மாற்றப்படும்.

இந்த மிகக் குறைந்த வெப்பநிலைகளை திரவ அல்லது நீராவி கட்ட நைட்ரஜனில் மூழ்கடிப்பதன் மூலம் பெறலாம்.

திரவ அல்லது நீராவி கட்டம்?

திரவ நிலை நைட்ரஜனில் சேமிப்பது குளிர் வெப்பநிலையை முழுமையான நிலைத்தன்மையுடன் பராமரிக்க அறியப்படுகிறது, ஆனால் பின்வரும் காரணங்களுக்காக பெரும்பாலும் பரிந்துரைக்கப்படுவதில்லை:

• திரவ நைட்ரஜனின் பெரிய அளவு (ஆழம்) தேவை, இது ஒரு அபாயகரமானது. இதன் காரணமாக தீக்காயங்கள் அல்லது மூச்சுத்திணறல் ஒரு உண்மையான ஆபத்து.
• அஸ்பெர்கிலஸ், ஹெப் பி போன்ற தொற்று முகவர்களால் குறுக்கு-மாசுபாடு மற்றும் திரவ நைட்ரஜன் ஊடகம் (2,3) வழியாக வைரஸ் பரவுதல் ஆகியவற்றின் ஆவணப்படுத்தப்பட்ட வழக்குகள்
• நீரில் மூழ்கும் போது திரவ நைட்ரஜன் குப்பிகளில் கசியும் சாத்தியம். சேமிப்பிலிருந்து அகற்றப்பட்டு அறை வெப்பநிலையில் சூடேற்றப்பட்டால், நைட்ரஜன் வேகமாக விரிவடைகிறது. இதன் விளைவாக, திரவ நைட்ரஜன் சேமிப்பிலிருந்து அகற்றப்படும் போது குப்பி சிதறக்கூடும், பறக்கும் குப்பைகள் மற்றும் உள்ளடக்கங்களுக்கு வெளிப்பாடு (1, 4) ஆகிய இரண்டிலிருந்தும் ஆபத்தை உருவாக்குகிறது.

இந்தக் காரணங்களுக்காக, மிகக் குறைந்த வெப்பநிலை சேமிப்பு பொதுவாக நீராவி நிலை நைட்ரஜனில் உள்ளது. மாதிரிகள் திரவ நிலையில் சேமிக்கப்படும் போது, ​​சிறப்பு கிரையோஃப்ளெக்ஸ் குழாய்கள் பயன்படுத்தப்பட வேண்டும்.

நீராவி கட்டத்தின் தீங்கு என்னவென்றால், செங்குத்து வெப்பநிலை சாய்வு -135℃ மற்றும் -190℃ இடையே வெப்பநிலை ஏற்ற இறக்கங்களை ஏற்படுத்தும். இது திரவ நைட்ரஜன் அளவுகள் மற்றும் வெப்பநிலை மாறுபாடுகளை கவனமாகவும் விடாமுயற்சியுடன் கண்காணிக்க வேண்டும் (5).

பல உற்பத்தியாளர்கள் cryovials -135℃ வரை சேமிப்பதற்கு அல்லது நீராவி கட்டத்தில் மட்டுமே பயன்படுத்துவதற்கு ஏற்றது என்று பரிந்துரைக்கின்றனர்.

உங்கள் Cryopreserved செல்களை கரைத்தல்

உறைந்த கலாச்சாரத்திற்கு உருகுதல் செயல்முறை அழுத்தமானது, மேலும் செல்களின் உகந்த நம்பகத்தன்மை, மீட்பு மற்றும் செயல்பாட்டை உறுதிப்படுத்த சரியான கையாளுதல் மற்றும் நுட்பம் தேவைப்படுகிறது. சரியான தாவிங் நெறிமுறைகள் குறிப்பிட்ட செல் வகைகளைப் பொறுத்தது. இருப்பினும், விரைவான உருகுதல் நிலையானதாகக் கருதப்படுகிறது:

• செல்லுலார் மீட்டெடுப்பில் எந்த தாக்கத்தையும் குறைக்கவும்
• உறைபனி ஊடகத்தில் இருக்கும் கரைசல்களின் வெளிப்பாடு நேரத்தைக் குறைக்க உதவுங்கள்
• பனி மறுபடிகமயமாக்கல் மூலம் எந்த சேதத்தையும் குறைக்கவும்

நீர் குளியல், மணி குளியல் அல்லது சிறப்பு தானியங்கி கருவிகள் பொதுவாக மாதிரிகளை கரைக்கப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.

பெரும்பாலும், 1 செல் கோடு 1-2 நிமிடங்களுக்கு ஒரு நேரத்தில் கரைக்கப்படுகிறது, 37℃ நீர் குளியலில் மெதுவாக சுழற்றுவதன் மூலம், குப்பியில் சிறிது பனிக்கட்டி எஞ்சியிருக்கும் வரை, அவை முன்கூட்டியே சூடேற்றப்பட்ட வளர்ச்சி ஊடகத்தில் கழுவப்படும்.

பாலூட்டிகளின் கருக்கள் போன்ற சில செல்களுக்கு, மெதுவாக வெப்பமடைவது அவற்றின் உயிர்வாழ்வதற்கு அவசியம்.

செல்கள் இப்போது செல் கலாச்சாரம், செல் தனிமைப்படுத்தல் அல்லது ஹீமாடோபாய்டிக் ஸ்டெம் செல்கள் விஷயத்தில் தயாராக உள்ளன - மைலோஆப்லேடிவ் சிகிச்சைக்கு முன் நன்கொடையாளர் ஸ்டெம் செல்களின் ஒருமைப்பாட்டிற்கு உத்தரவாதம் அளிக்கும் நம்பகத்தன்மை ஆய்வுகள்.

கலாச்சாரத்தில் முலாம் பூசுவதற்கு செல் செறிவுகளை தீர்மானிக்க செல் எண்ணிக்கையை செய்ய பயன்படுத்தப்படும் முன் கழுவப்பட்ட மாதிரியின் சிறிய அலிகோட்களை எடுத்துக்கொள்வது இயல்பான நடைமுறையாகும். நீங்கள் செல் தனிமைப்படுத்தும் நடைமுறைகளின் முடிவுகளை மதிப்பீடு செய்து செல் நம்பகத்தன்மையை தீர்மானிக்கலாம்.

Cryovials சேமிப்பிற்கான சிறந்த நடைமுறைகள்

கிரையோவில்களில் சேமிக்கப்பட்ட மாதிரிகளின் வெற்றிகரமான கிரையோப்ரெசர்வேஷனானது, முறையான சேமிப்பு மற்றும் பதிவு செய்தல் உள்ளிட்ட நெறிமுறையில் உள்ள பல கூறுகளைப் பொறுத்தது.

• சேமிப்பக இடங்களுக்கு இடையே செல்களைப் பிரிக்கவும்- தொகுதிகள் அனுமதித்தால், குப்பிகளுக்கு இடையில் செல்களைப் பிரித்து தனித்தனி இடங்களில் சேமித்து, உபகரணங்கள் செயலிழப்பதால் ஏற்படும் மாதிரி இழப்பின் அபாயத்தைக் குறைக்கவும்.
• குறுக்கு மாசுபடுவதைத் தடுக்கவும்– ஒற்றைப் பயன்பாட்டு ஸ்டெரைல் கிரையோஜெனிக் குப்பிகளை அல்லது ஆட்டோகிளேவை அடுத்தடுத்த பயன்பாட்டிற்கு முன் தேர்வு செய்யவும்
• உங்கள் செல்களுக்கு சரியான அளவிலான குப்பிகளைப் பயன்படுத்தவும்- குப்பிகள் 1 முதல் 5 மில்லி வரையிலான அளவுகளில் வருகின்றன. விரிசல் அபாயத்தைக் குறைக்க குப்பிகளை அதிகமாக நிரப்புவதைத் தவிர்க்கவும்.
• உள் அல்லது வெளிப்புறமாக திரிக்கப்பட்ட கிரையோஜெனிக் குப்பிகளைத் தேர்ந்தெடுக்கவும்- உள்நாட்டில் திரிக்கப்பட்ட குப்பிகள் பாதுகாப்பு நடவடிக்கைகளுக்காக சில பல்கலைக்கழகங்களால் பரிந்துரைக்கப்படுகின்றன - அவை நிரப்பும் போது அல்லது திரவ நைட்ரஜனில் சேமிக்கப்படும் போது மாசுபடுவதையும் தடுக்கலாம்.
• கசிவைத் தடுக்கவும்- கசிவு மற்றும் மாசுபடுவதைத் தடுக்க திருகு-தொப்பி அல்லது O-வளையங்களில் வடிவமைக்கப்பட்ட இரு-இன்ஜெக்டட் முத்திரைகளைப் பயன்படுத்தவும்.
• 2டி பார்கோடுகளையும் லேபிள் குப்பிகளையும் பயன்படுத்தவும்- கண்டறியும் தன்மையை உறுதி செய்வதற்காக, பெரிய எழுத்துப் பகுதிகளைக் கொண்ட குப்பிகள் ஒவ்வொரு குப்பியையும் போதுமான அளவு லேபிளிடச் செய்ய உதவும். 2டி பார்கோடுகள் சேமிப்பக மேலாண்மை மற்றும் பதிவுகளை வைத்திருக்க உதவும். எளிதாக அடையாளம் காண வண்ண குறியீட்டு தொப்பிகள் பயனுள்ளதாக இருக்கும்.
• போதுமான சேமிப்பு பராமரிப்பு- செல்கள் இழக்கப்படாமல் இருப்பதை உறுதி செய்ய, சேமிப்பு பாத்திரங்கள் வெப்பநிலை மற்றும் திரவ நைட்ரஜன் அளவை தொடர்ந்து கண்காணிக்க வேண்டும். பிழைகள் குறித்து பயனர்களை எச்சரிக்க அலாரங்கள் பொருத்தப்பட வேண்டும்.

பாதுகாப்பு முன்னெச்சரிக்கைகள்

திரவ நைட்ரஜன் நவீன ஆராய்ச்சியில் பொதுவான நடைமுறையாகிவிட்டது, ஆனால் தவறாகப் பயன்படுத்தினால் கடுமையான காயம் ஏற்படும் அபாயம் உள்ளது.

திரவ நைட்ரஜனைக் கையாளும் போது உறைபனி, தீக்காயங்கள் மற்றும் பிற பாதகமான சம்பவங்களின் அபாயத்தைக் குறைக்க முறையான தனிப்பட்ட பாதுகாப்பு உபகரணங்களை (PPE) அணிய வேண்டும். அணியுங்கள்

• கிரையோஜெனிக் கையுறைகள்
• ஆய்வக கோட்
• தாக்கத்தை எதிர்க்கும் முழு முகக் கவசம் கழுத்தையும் உள்ளடக்கியது
• மூடிய கால் காலணிகள்
• தெறிக்காத பிளாஸ்டிக் கவசம்

திரவ நைட்ரஜன் குளிர்சாதனப் பெட்டிகள் மூச்சுத்திணறல் அபாயத்தைக் குறைக்க நன்கு காற்றோட்டமான பகுதிகளில் வைக்கப்பட வேண்டும் - தப்பித்த நைட்ரஜன் வளிமண்டல ஆக்ஸிஜனை ஆவியாகி இடமாற்றம் செய்கிறது. பெரிய அளவிலான கடைகளில் குறைந்த ஆக்ஸிஜன் எச்சரிக்கை அமைப்புகள் இருக்க வேண்டும்.

திரவ நைட்ரஜனைக் கையாளும் போது ஜோடியாக வேலை செய்வது சிறந்தது மற்றும் சாதாரண வேலை நேரத்திற்கு வெளியே அதன் பயன்பாடு தடை செய்யப்பட வேண்டும்.

உங்கள் பணிப்பாய்வுக்கு ஆதரவளிக்கும் Cryovials

Suzhou Ace Biomedical நிறுவனம் பல்வேறு வகையான செல்களுக்கான உங்கள் cryopreservation தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்யும் பரந்த அளவிலான தயாரிப்புகளை வழங்குகிறது. போர்ட்ஃபோலியோவில் பலவிதமான ட்யூப்சாக்கள் மற்றும் ஸ்டெரைல் கிரையோவியல்களின் வரம்பு ஆகியவை அடங்கும்.

எங்கள் கிரையோவியல்கள்:

• லேப் ஸ்க்ரூ கேப் 0.5mL 1.5mL 2.0mL Cryovial Cryogenic Vials கேஸ்கெட்டுடன் கூடிய கோனிக்கல் பாட்டம் கிரையோட்யூப்

  ● 0.5ml,1.5ml,2.0ml விவரக்குறிப்பு, பாவாடையுடன் அல்லது பாவாடை இல்லாமல்
  ● கூம்பு அல்லது சுயமாக நிற்கும் வடிவமைப்பு, மலட்டு அல்லது மலட்டுத்தன்மையற்றது இரண்டும் கிடைக்கும்
  ● ஸ்க்ரூ கேப் குழாய்கள் மருத்துவ தர பாலிப்ரோப்பிலீனால் செய்யப்படுகின்றன
  ● பிபி கிரையோட்யூப் குப்பிகளை மீண்டும் மீண்டும் உறைய வைக்கலாம் மற்றும் கரைக்கலாம்
  ●வெளிப்புற தொப்பி வடிவமைப்பு மாதிரி சிகிச்சையின் போது மாசுபடுவதற்கான நிகழ்தகவைக் குறைக்கலாம்.
  ● ஸ்க்ரூ கேப் கிரையோஜெனிக் குழாய்கள் பயன்படுத்துவதற்கான உலகளாவிய திருகு நூல்கள்
  ● குழாய்கள் மிகவும் பொதுவான சுழலிகளுக்கு பொருந்தும்
  ● கிரையோஜெனிக் குழாய் ஓ-ரிங் குழாய்கள் நிலையான 1-இன்ச் மற்றும் 2-இன்ச், 48வெல், 81வெல்，96வெல் மற்றும் 100வெல் உறைவிப்பான் பெட்டிகளுக்கு பொருந்தும்
  ● 121°C வரை ஆட்டோகிளேவபிள் மற்றும் -86°C வரை உறைய வைக்கக்கூடியது

  பகுதி எண்	பொருள்	தொகுதி	CAPநிறம்	பிசிஎஸ்/பை	பைகள்/கேஸ்
  ACT05-BL-N	PP	0.5ML	கருப்பு, மஞ்சள், நீலம், சிவப்பு, ஊதா, வெள்ளை	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5 எம்.எல்	கருப்பு, மஞ்சள், நீலம், சிவப்பு, ஊதா, வெள்ளை	500	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5 எம்.எல்	கருப்பு, மஞ்சள், நீலம், சிவப்பு, ஊதா, வெள்ளை	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0ML	கருப்பு, மஞ்சள், நீலம், சிவப்பு, ஊதா, வெள்ளை	500	10