கிரையோவல்கள்திரவ நைட்ரஜனால் நிரப்பப்பட்ட டெவார்களில், செல் கோடுகள் மற்றும் பிற முக்கியமான உயிரியல் பொருட்களின் கிரையோஜெனிக் சேமிப்பிற்கு பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.

திரவ நைட்ரஜனில் செல்களை வெற்றிகரமாக பாதுகாப்பதில் பல நிலைகள் உள்ளன. அடிப்படைக் கொள்கை மெதுவான முடக்கம் என்றாலும், பயன்படுத்தப்படும் சரியான நுட்பம் செல் வகை மற்றும் கிரையோபிராக்டெக்டன்ட் ஆகியவற்றைப் பொறுத்தது. இதுபோன்ற குறைந்த வெப்பநிலையில் செல்களை சேமிக்கும்போது கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ள பல பாதுகாப்பு பரிசீலனைகள் மற்றும் சிறந்த நடைமுறைகள் உள்ளன.

இந்த இடுகை திரவ நைட்ரஜனில் கிரையோவியல்கள் எவ்வாறு சேமிக்கப்படுகின்றன என்பதற்கான கண்ணோட்டத்தை வழங்குவதை நோக்கமாகக் கொண்டுள்ளது.

கிரையோவியல்கள் என்றால் என்ன

கிரையோவியல்கள் சிறிய, மூடிய குப்பிகளை மிகக் குறைந்த வெப்பநிலையில் திரவ மாதிரிகளை சேமிக்க வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளன. கிரையோபுரோடெக்டண்டில் பாதுகாக்கப்பட்ட செல்கள் திரவ நைட்ரஜனுடன் நேரடி தொடர்புக்கு வரவில்லை என்பதை அவை உறுதி செய்கின்றன, இது செல்லுலார் எலும்பு முறிவுகளின் அபாயத்தைக் குறைக்கிறது, அதே நேரத்தில் திரவ நைட்ரஜனின் தீவிர குளிரூட்டும் விளைவிலிருந்து இன்னும் பயனடைகிறது.

குப்பிகள் வழக்கமாக தொகுதிகள் மற்றும் வடிவமைப்புகளின் வரம்பில் கிடைக்கின்றன - அவை உட்புறமாக அல்லது வெளிப்புறமாக தட்டையான அல்லது வட்டமான பாட்டம்ஸுடன் திரிக்கப்படலாம். மலட்டு மற்றும் புண் அல்லாத வடிவங்களும் கிடைக்கின்றன.

யார் பயன்படுத்துகிறார்கள்சைரோவேல்கள்திரவ நைட்ரஜனில் செல்களை சேமிக்க

என்ஹெச்எஸ் மற்றும் தனியார் ஆய்வகங்களின் வரம்பு, அத்துடன் தண்டு இரத்த வங்கி, எபிடெலியல் செல் உயிரியல், நோயெதிர்ப்பு மற்றும் ஸ்டெம் செல் உயிரியல் ஆகியவற்றில் நிபுணத்துவம் வாய்ந்த ஆராய்ச்சி நிறுவனங்கள் கிரையோபிரெஸர்வ் கலங்களுக்கு கிரையோவியல்களைப் பயன்படுத்துகின்றன.

இந்த வழியில் பாதுகாக்கப்பட்ட உயிரணுக்களில் பி மற்றும் டி செல்கள், சிஓ செல்கள், ஹெமாட்டோபாய்டிக் தண்டு மற்றும் முன்னோடி செல்கள், கலப்பினங்கள், குடல் செல்கள், மேக்ரோபேஜ்கள், மெசன்கிமல் தண்டு மற்றும் முன்னோடி செல்கள், மோனோசைட்டுகள், மைலோமா, என்.கே செல்கள் மற்றும் ப்ளூரிபோடென்ட் ஸ்டெம் செல்கள் ஆகியவை அடங்கும்.

திரவ நைட்ரஜனில் கிரையோவியல்களை எவ்வாறு சேமிப்பது என்பதற்கான கண்ணோட்டம்

கிரையோபிரசர்வேஷன் என்பது செல்கள் மற்றும் பிற உயிரியல் கட்டுமானங்களை மிகக் குறைந்த வெப்பநிலைக்கு குளிர்விப்பதன் மூலம் பாதுகாக்கும் ஒரு செயல்முறையாகும். உயிரணு நம்பகத்தன்மையை இழக்காமல் செல்களை பல ஆண்டுகளாக திரவ நைட்ரஜனில் சேமிக்க முடியும். இது பயன்படுத்தப்படும் நடைமுறைகளின் ஒரு சுருக்கமாகும்.

செல் தயாரிப்பு

செல் வகையைப் பொறுத்து மாதிரிகளைத் தயாரிப்பதற்கான சரியான முறை மாறுபடும், ஆனால் பொதுவாக, செல்கள் சேகரிக்கப்பட்டு மையவிலக்கு செய்யப்படுகின்றன. இந்த துகள்கள் பின்னர் கிரையோபிரோடெக்டன்ட் அல்லது கிரையோபிரசர்வேஷன் ஊடகத்துடன் கலந்த சூப்பர்நேட்டண்டில் மீண்டும் இணைக்கப்படுகின்றன.

கிரையோபிரசர்வேஷன் ஊடகம்

குறைந்த வெப்பநிலை சூழல்களில் உள்ள உயிரணுக்களைப் பாதுகாக்க இந்த ஊடகம் பயன்படுத்தப்படுகிறது, அவை உள் மற்றும் புற-புற படிகங்களை உருவாக்குவதைத் தடுப்பதன் மூலமும், உயிரணு இறப்பு. உறைபனி, சேமிப்பு மற்றும் கரைக்கும் செயல்முறைகளின் போது செல்கள் மற்றும் திசுக்களுக்கு பாதுகாப்பான, பாதுகாப்பு சூழலை வழங்குவதே அவற்றின் பங்கு.

புதிய உறைந்த பிளாஸ்மா (எஃப்.எஃப்.பி), ஹெபரினைஸ் செய்யப்பட்ட பிளாஸ்மலைட் கரைசல் அல்லது சீரம் இல்லாத, விலங்கு கூறு இல்லாத தீர்வுகள் போன்ற ஒரு ஊடகம் டைமிதில் சல்பாக்சைடு (டி.எம்.எஸ்.ஓ) அல்லது கிளிசரால் போன்ற கிரையோபிரோடெக்டன்ட்களுடன் கலக்கப்படுகிறது.

மறு-திரவமான மாதிரி துகள்கள் போன்ற பாலிப்ரொப்பிலீன் கிரையோவல்களாக மாற்றப்படுகின்றனசுஜோ ஏஸ் பயோமெடிக்கல் கம்பெனி கிரையோஜெனிக் சேமிப்பு குப்பிகளை.

கிரையோவியல்களை மிகைப்படுத்தாமல் இருப்பது முக்கியம், ஏனெனில் இது விரிசல் ஏற்படும் அபாயத்தையும் உள்ளடக்கங்களின் வெளியீட்டையும் அதிகரிக்கும் (1).

கட்டுப்படுத்தப்பட்ட முடக்கம் வீதம்

பொதுவாக, கலங்களின் வெற்றிகரமான கிரையோபிரசர்வேஷனுக்கு மெதுவான கட்டுப்படுத்தப்பட்ட முடக்கம் வீதம் பயன்படுத்தப்படுகிறது.

மாதிரிகள் கிரையோஜெனிக் குப்பிகளில் அலிகோட் செய்யப்பட்ட பிறகு, அவை ஈரமான பனியில் அல்லது 4 ℃ குளிர்சாதன பெட்டியில் வைக்கப்படுகின்றன, மேலும் உறைபனி செயல்முறை 5 நிமிடங்களுக்குள் தொடங்கப்படுகிறது. ஒரு பொது வழிகாட்டியாக, செல்கள் நிமிடத்திற்கு -1 முதல் -3 வரை (2) குளிரூட்டப்படுகின்றன. இது ஒரு நிரல்படுத்தக்கூடிய குளிரூட்டியைப் பயன்படுத்தி அல்லது –70 ° C முதல் –90 ° C கட்டுப்படுத்தப்பட்ட வீத உறைவிப்பான் வரை வைக்கப்பட்டுள்ள காப்பிடப்பட்ட பெட்டியில் குப்பிகளை வைப்பதன் மூலம் அடையப்படுகிறது.

திரவ நைட்ரஜனுக்கு மாற்றவும்

உறைந்த கிரையோஜெனிக் குப்பிகள் பின்னர் காலவரையற்ற காலங்களுக்கு ஒரு திரவ நைட்ரஜன் தொட்டிக்கு மாற்றப்படுகின்றன, இது -135 with க்கும் குறைவான வெப்பநிலை பராமரிக்கப்படுகிறது.

இந்த அதி-குறைந்த வெப்பநிலையை திரவ அல்லது நீராவி கட்ட நைட்ரஜனில் மூழ்குவதன் மூலம் பெறலாம்.

திரவ அல்லது நீராவி கட்டம்?

திரவ கட்ட நைட்ரஜனில் சேமிப்பு குளிர் வெப்பநிலையை முழுமையான நிலைத்தன்மையுடன் பராமரிக்க அறியப்படுகிறது, ஆனால் பின்வரும் காரணங்களுக்காக பெரும்பாலும் பரிந்துரைக்கப்படவில்லை:

• திரவ நைட்ரஜனின் பெரிய தொகுதிகளின் தேவை (ஆழம்) இது ஒரு ஆபத்து. இதன் காரணமாக தீக்காயங்கள் அல்லது மூச்சுத்திணறல் ஒரு உண்மையான ஆபத்து.
• திரவ நைட்ரஜன் ஊடகம் (2,3) வழியாக ஆஸ்பெர்கிலஸ், ஹெப் பி மற்றும் வைரஸ் பரவுதல் போன்ற தொற்று முகவர்களால் குறுக்கு மாசுபாட்டின் ஆவணப்படுத்தப்பட்ட வழக்குகள் ஆவணப்படுத்தப்பட்ட வழக்குகள்
• திரவ நைட்ரஜன் நீரில் மூழ்கும்போது குப்பிகளில் கசியும் சாத்தியம். சேமிப்பிலிருந்து அகற்றப்பட்டு அறை வெப்பநிலைக்கு வெப்பமடையும் போது, ​​நைட்ரஜன் வேகமாக விரிவடைகிறது. இதன் விளைவாக, திரவ நைட்ரஜன் சேமிப்பிலிருந்து அகற்றப்படும்போது குப்பியை சிதறடிக்கலாம், பறக்கும் குப்பைகள் இரண்டிலிருந்தும் ஒரு அபாயத்தை உருவாக்கி உள்ளடக்கங்களுக்கு வெளிப்பாடு (1, 4).

இந்த காரணங்களுக்காக, அல்ட்ரா-லோ வெப்பநிலை சேமிப்பு பொதுவாக நீராவி கட்ட நைட்ரஜனில் இருக்கும். மாதிரிகள் திரவ கட்டத்தில் சேமிக்கப்படும்போது, ​​சிறப்பு கிரையோஃப்ளெக்ஸ் குழாய்கள் பயன்படுத்தப்பட வேண்டும்.

நீராவி கட்டத்தின் தீங்கு என்னவென்றால், செங்குத்து வெப்பநிலை சாய்வு -135 ℃ மற்றும் -190 than க்கு இடையில் வெப்பநிலை ஏற்ற இறக்கங்கள் ஏற்படலாம். இது திரவ நைட்ரஜன் அளவுகள் மற்றும் வெப்பநிலை மாறுபாடுகள் (5) கவனமாக மற்றும் விடாமுயற்சியுடன் கண்காணிக்க வேண்டும்.

பல உற்பத்தியாளர்கள் கிரையோவியல்கள் -135 to வரை சேமிக்க அல்லது நீராவி கட்டத்தில் மட்டுமே பயன்படுத்த ஏற்றவை என்று பரிந்துரைக்கின்றனர்.

உங்கள் கிரையோபிரெர்சர்வ் செல்களை வறுக்கிறது

உறைந்த கலாச்சாரத்திற்கு தாவிங் செயல்முறை மன அழுத்தத்தை ஏற்படுத்துகிறது, மேலும் உயிரணுக்களின் உகந்த நம்பகத்தன்மை, மீட்பு மற்றும் செயல்பாட்டை உறுதிப்படுத்த சரியான கையாளுதல் மற்றும் நுட்பம் தேவைப்படுகிறது. சரியான கரை நெறிமுறைகள் குறிப்பிட்ட செல் வகைகளைப் பொறுத்தது. இருப்பினும், விரைவான தாவிங் இதற்கு தரமாக கருதப்படுகிறது:

• செல்லுலார் மீட்டெடுப்பில் எந்த தாக்கத்தையும் குறைக்கவும்
• உறைபனி ஊடகத்தில் உள்ள கரைப்பான்களுக்கு வெளிப்பாடு நேரத்தை குறைக்க உதவுங்கள்
• பனி மறுகட்டமைப்பால் எந்த சேதத்தையும் குறைக்கவும்

நீர் குளியல், மணி குளியல் அல்லது சிறப்பு தானியங்கி கருவிகள் பொதுவாக மாதிரிகளை கரைக்க பயன்படுத்தப்படுகின்றன.

1-2 நிமிடங்களுக்கு ஒரு நேரத்தில் 1 செல் வரி கரைக்கப்படுகிறது, 37 ℃ நீர் குளியல் மெதுவாக சுழலுவதன் மூலம், அவை முன்கூட்டியே வளர்ச்சி ஊடகத்தில் கழுவப்படுவதற்கு முன்பு குப்பியில் ஒரு சிறிய பிட் பனி இருக்கும் வரை.

பாலூட்டிகளின் கருக்கள் போன்ற சில கலங்களுக்கு, அவற்றின் உயிர்வாழ்வதற்கு மெதுவான வெப்பமயமாதல் அவசியம்.

செல்கள் இப்போது செல் கலாச்சாரம், செல் தனிமைப்படுத்தல் அல்லது ஹீமாடோபாய்டிக் ஸ்டெம் செல்கள் விஷயத்தில் தயாராக உள்ளன - மைலோஆப்லேடிவ் சிகிச்சையின் முன் நன்கொடையாளர் ஸ்டெம் கலங்களின் ஒருமைப்பாட்டை உறுதிப்படுத்த நம்பகத்தன்மை ஆய்வுகள்.

கலாச்சாரத்தில் முலாம் பூசுவதற்கான செல் செறிவுகளைத் தீர்மானிக்க செல் எண்ணிக்கையைச் செய்யப் பயன்படுத்தப்படும் முன் கழற்றப்பட்ட மாதிரியின் சிறிய அலிகோட்களை எடுத்துக்கொள்வது சாதாரண நடைமுறையாகும். செல் தனிமைப்படுத்தும் நடைமுறைகளின் முடிவுகளை நீங்கள் மதிப்பிடலாம் மற்றும் செல் நம்பகத்தன்மையை தீர்மானிக்கலாம்.

கிரையோவியல்களை சேமிப்பதற்கான சிறந்த நடைமுறைகள்

கிரையோவியல்களில் சேமிக்கப்பட்ட மாதிரிகளின் வெற்றிகரமான கிரையோபிரசர்வேஷன் சரியான சேமிப்பு மற்றும் பதிவு வைத்தல் உள்ளிட்ட நெறிமுறையில் உள்ள பல கூறுகளைப் பொறுத்தது.

• சேமிப்பக இடங்களுக்கு இடையில் செல்களைப் பிரிக்கவும்.
• குறுக்கு மாசுபடுவதைத் தடுக்கவும்-அடுத்தடுத்த பயன்பாட்டிற்கு முன் ஒற்றை-பயன்பாட்டு மலட்டு கிரையோஜெனிக் குப்பிகளை அல்லது ஆட்டோகிளேவைத் தேர்வுசெய்க
• உங்கள் கலங்களுக்கு சரியான அளவிலான குப்பிகளைப் பயன்படுத்தவும்- குப்பிகள் 1 முதல் 5 மில்லி வரை பலவிதமான அளவுகளில் வருகின்றன. விரிசல் அபாயத்தைக் குறைக்க குப்பிகளை அதிகமாக நிரப்புவதைத் தவிர்க்கவும்.
• உள் அல்லது வெளிப்புறமாக திரிக்கப்பட்ட கிரையோஜெனிக் குப்பிகளைத் தேர்ந்தெடுக்கவும்- பாதுகாப்பு நடவடிக்கைகளுக்காக உள்நாட்டில் திரிக்கப்பட்ட குப்பிகளை சில பல்கலைக்கழகங்களால் பரிந்துரைக்கப்படுகிறது - அவை நிரப்பும்போது அல்லது திரவ நைட்ரஜனில் சேமிக்கப்படும் போது மாசுபடுவதைத் தடுக்கலாம்.
• கசிவைத் தடுக்கவும்-கசிவு மற்றும் மாசுபடுவதைத் தடுக்க திருகு-தொப்பி அல்லது ஓ-மோதிரங்களில் வடிவமைக்கப்பட்ட இரு-செலுத்தப்பட்ட முத்திரைகள் பயன்படுத்தவும்.
• 2 டி பார்கோடுகள் மற்றும் லேபிள் குப்பிகளை பயன்படுத்தவும்- கண்டுபிடிப்புத்தன்மையை உறுதிப்படுத்த, பெரிய எழுதும் பகுதிகளைக் கொண்ட குப்பிகளை ஒவ்வொரு குப்பியும் போதுமான பெயரிட உதவுகிறது. 2 டி பார்கோடுகள் சேமிப்பக மேலாண்மை மற்றும் பதிவு வைத்திருப்பதற்கு உதவும். எளிதாக அடையாளம் காண வண்ண குறியீட்டு தொப்பிகள் பயனுள்ளதாக இருக்கும்.
• போதுமான சேமிப்பு பராமரிப்பு- செல்கள் இழக்கப்படுவதில்லை என்பதை உறுதிப்படுத்த, சேமிப்பகக் கப்பல்கள் வெப்பநிலை மற்றும் திரவ நைட்ரஜன் அளவை தொடர்ந்து கண்காணிக்க வேண்டும். பிழைகள் பயனர்களை எச்சரிக்க அலாரங்கள் பொருத்தப்பட வேண்டும்.

பாதுகாப்பு முன்னெச்சரிக்கைகள்

நவீன ஆராய்ச்சியில் திரவ நைட்ரஜன் பொதுவான நடைமுறையாக மாறியுள்ளது, ஆனால் தவறாகப் பயன்படுத்தினால் கடுமையான காயம் ஏற்படும் அபாயத்தை கொண்டுள்ளது.

திரவ நைட்ரஜனைக் கையாளும் போது ஃப்ரோஸ்ட்பைட், தீக்காயங்கள் மற்றும் பிற பாதகமான சம்பவங்களின் அபாயத்தைக் குறைக்க சரியான தனிப்பட்ட பாதுகாப்பு உபகரணங்கள் (பிபிஇ) அணிய வேண்டும். அணியுங்கள்

• கிரையோஜெனிக் கையுறைகள்
• ஆய்வக கோட்
• தாக்கத்தை எதிர்க்கும் முழு முகம் கவசமும் கழுத்தை உள்ளடக்கியது
• மூடிய-கால் காலணிகள்
• ஸ்பிளாஷ்ப்ரூஃப் பிளாஸ்டிக் கவசம்

மூச்சுத்திணறல் அபாயத்தைக் குறைக்க திரவ நைட்ரஜன் குளிர்சாதன பெட்டிகள் நன்கு காற்றோட்டமான பகுதிகளில் வைக்கப்பட வேண்டும்-தப்பித்த நைட்ரஜன் வளிமண்டல ஆக்ஸிஜனை ஆவியாக்குகிறது மற்றும் இடமாற்றம் செய்கிறது. பெரிய தொகுதி கடைகளில் குறைந்த ஆக்ஸிஜன் அலாரம் அமைப்புகள் இருக்க வேண்டும்.

திரவ நைட்ரஜனைக் கையாளும் போது ஜோடிகளாக வேலை செய்வது சிறந்தது மற்றும் சாதாரண வேலை நேரத்திற்கு வெளியே அதன் பயன்பாடு தடைசெய்யப்பட வேண்டும்.

உங்கள் பணிப்பாய்வுகளை ஆதரிக்க கிரையோவல்கள்

பல்வேறு வகையான கலங்களுக்கான உங்கள் கிரையோபிரெசர்வேஷன் தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்யும் பலவிதமான தயாரிப்புகளை சுஜோ ஏஸ் பயோமெடிக்கல் நிறுவனம் வழங்குகிறது. போர்ட்ஃபோலியோவில் பல குழாய்கள் மற்றும் மலட்டு கிரையோவியல்கள் உள்ளன.

எங்கள் கிரையோவல்கள்:

• லேப் ஸ்க்ரூ கேப் 0.5 மிலி 1.5 மிலி 2.0 மிலி கிரையோவியல் கிரையோஜெனிக் குப்பிகளை கேஸ்கெட்டுடன் கூம்பு பாட்டம் கிரையோட்யூப்

  ● 0.5 மிலி, 1.5 மிலி, 2.0 மிலி விவரக்குறிப்பு, பாவாடை அல்லது பாவாடை இல்லாமல்
  Compon கூம்பு அல்லது சுய நிற்கும் வடிவமைப்பு, மலட்டு அல்லது மாடி அல்லாத இரண்டும் கிடைக்கின்றன
  ● திருகு தொப்பி குழாய்கள் மருத்துவ தர பாலிப்ரொப்பிலினால் செய்யப்படுகின்றன
  ● பிபி கிரையோட்யூப் குப்பிகளை மீண்டும் மீண்டும் உறைந்து கரைக்கலாம்
  Cap வெளிப்புற தொப்பி வடிவமைப்பு மாதிரி சிகிச்சையின் போது மாசு நிகழ்தகவைக் குறைக்கும்.
  ● திருகு தொப்பி கிரையோஜெனிக் குழாய்கள் பயன்பாட்டிற்கு யுனிவர்சல் ஸ்க்ரூ நூல்கள்
  Tub குழாய்கள் மிகவும் பொதுவான ரோட்டர்களுக்கு பொருந்துகின்றன
  ● கிரையோஜெனிக் குழாய் ஓ-ரிங் குழாய்கள் தரமான 1-இன்ச் மற்றும் 2-இன்ச், 48்வெல், 81்வெல் ， 96்வெல் மற்றும் 100்வெல் ஃப்ரீசர் பெட்டிகளுக்கு பொருந்தும்
  121 ° C க்கு தானியங்கு மற்றும் -86 ° C க்கு உறையக்கூடியது

  பகுதி எண்	பொருள்	தொகுதி	தொப்பிநிறம்	பிசிக்கள்/பை	பைகள்/வழக்கு
  ACT05-BL-N	PP	0.5 மில்லி	கருப்பு, மஞ்சள், நீலம், சிவப்பு, ஊதா, வெள்ளை	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5 மில்லி	கருப்பு, மஞ்சள், நீலம், சிவப்பு, ஊதா, வெள்ளை	500	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5 மில்லி	கருப்பு, மஞ்சள், நீலம், சிவப்பு, ஊதா, வெள்ளை	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0 மில்லி	கருப்பு, மஞ்சள், நீலம், சிவப்பு, ஊதா, வெள்ளை	500	10