அறிமுகம்
நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் என்றால் என்ன?
மிக எளிமையான சொற்களில், நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் என்பது ஒரு மாதிரியிலிருந்து ஆர்என்ஏ மற்றும்/அல்லது டிஎன்ஏ மற்றும் தேவையில்லாத அதிகப்படியான அனைத்தையும் அகற்றுவதாகும். பிரித்தெடுத்தல் செயல்முறை ஒரு மாதிரியிலிருந்து நியூக்ளிக் அமிலங்களைத் தனிமைப்படுத்தி, அவற்றை ஒரு செறிவூட்டப்பட்ட எலுவேட் வடிவத்தில் அளிக்கிறது, இது எந்த கீழ்நிலை பயன்பாடுகளையும் பாதிக்கக்கூடிய நீர்த்துப்போகும் மற்றும் அசுத்தங்களிலிருந்து விடுபடுகிறது.
நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் பயன்பாடுகள்
சுத்திகரிக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலங்கள் பல்வேறு தொழில்களில் பல்வேறு பயன்பாடுகளில் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. ஹெல்த்கேர் என்பது பல்வேறு சோதனை நோக்கங்களுக்காகத் தேவைப்படும் சுத்திகரிக்கப்பட்ட ஆர்என்ஏ மற்றும் டிஎன்ஏவுடன், அது அதிகம் பயன்படுத்தப்படும் பகுதியாக இருக்கலாம்.
சுகாதாரப் பராமரிப்பில் நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் பயன்பாடுகள் பின்வருமாறு:
- அடுத்த தலைமுறை வரிசைமுறை (NGS)
- பெருக்கம் அடிப்படையிலான SNP மரபணு வகை
- வரிசை அடிப்படையிலான மரபணு வகை
- கட்டுப்பாடு என்சைம் செரிமானம்
- மாற்றியமைக்கும் என்சைம்களைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்கிறது (எ.கா. பிணைப்பு மற்றும் குளோனிங்)
நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் பயன்படுத்தப்படும் ஹெல்த்கேர்க்கு அப்பாற்பட்ட பிற துறைகளும் உள்ளன, இதில் தந்தைவழி சோதனை, தடயவியல் மற்றும் மரபியல் ஆகியவை அடங்கும்.
நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தலின் சுருக்கமான வரலாறு
டிஎன்ஏ பிரித்தெடுத்தல்1869 இல் ஃபிரெட்ரிக் மிஷர் என்ற சுவிஸ் மருத்துவரால் அறியப்பட்ட முதல் தனிமைப்படுத்தல் நீண்ட காலத்திற்கு முந்தையது. உயிரணுக்களின் வேதியியல் கலவையை தீர்மானிப்பதன் மூலம் வாழ்க்கையின் அடிப்படைக் கொள்கைகளைத் தீர்க்க மைஷர் நம்பிக்கை கொண்டிருந்தார். லிம்போசைட்டுகளில் தோல்வியுற்ற பிறகு, தூக்கி எறியப்பட்ட கட்டுகளில் சீழில் காணப்படும் லுகோசைட்டுகளிலிருந்து டிஎன்ஏவின் கச்சா வீழ்படிவை அவரால் பெற முடிந்தது. கலத்தின் சைட்டோபிளாஸத்தை விட்டு வெளியேறுவதற்கு அமிலத்தையும் பின்னர் காரத்தையும் கலத்தில் சேர்ப்பதன் மூலம் இதைச் செய்தார், பின்னர் டிஎன்ஏவை மற்ற புரதங்களிலிருந்து பிரிக்க ஒரு நெறிமுறையை உருவாக்கினார்.
Miescher இன் அற்புதமான ஆராய்ச்சியைத் தொடர்ந்து, பல விஞ்ஞானிகள் டிஎன்ஏவைத் தனிமைப்படுத்தி சுத்திகரிப்பதற்கான நுட்பங்களை மேம்படுத்தி மேம்படுத்தியுள்ளனர். எட்வின் ஜோசப் கோன், ஒரு புரத விஞ்ஞானி WW2 இன் போது புரத சுத்திகரிப்புக்கான பல நுட்பங்களை உருவாக்கினார். இரத்த பிளாஸ்மாவின் சீரம் அல்புமின் பகுதியை தனிமைப்படுத்துவதற்கு அவர் பொறுப்பேற்றார், இது இரத்த நாளங்களில் ஆஸ்மோடிக் அழுத்தத்தை பராமரிப்பதில் முக்கியமானது. வீரர்களை உயிருடன் வைத்திருக்க இது மிகவும் முக்கியமானது.
1953 ஆம் ஆண்டில் பிரான்சிஸ் கிரிக், ரோசாலிண்ட் ஃபிராங்க்ளின் மற்றும் ஜேம்ஸ் வாட்சன் ஆகியோருடன் இணைந்து டிஎன்ஏவின் கட்டமைப்பைத் தீர்மானித்தார், இது நியூக்ளிக் அமில நியூக்ளியோடைடுகளின் நீண்ட சங்கிலிகளின் இரண்டு இழைகளால் ஆனது என்பதைக் காட்டுகிறது. இந்த கண்டுபிடிப்பு மெசல்சன் மற்றும் ஸ்டால் ஆகியோருக்கு வழி வகுத்தது, அவர்கள் 1958 ஆம் ஆண்டு சோதனையின் போது டிஎன்ஏவின் அரை-பழமைவாத பிரதியை நிரூபித்ததால், ஈ.கோலி பாக்டீரியாவிலிருந்து டிஎன்ஏவை தனிமைப்படுத்த ஒரு அடர்த்தி சாய்வு மையவிலக்கு நெறிமுறையை உருவாக்க முடிந்தது.
நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் நுட்பங்கள்
டிஎன்ஏ பிரித்தெடுத்தலின் 4 நிலைகள் யாவை?
அனைத்து பிரித்தெடுக்கும் முறைகளும் ஒரே அடிப்படை படிகளில் கொதிக்கின்றன.
செல் இடையூறு. செல் சிதைவு என்றும் அறியப்படும் இந்த நிலை, செல் சுவர் மற்றும்/அல்லது உயிரணு சவ்வை உடைத்து, ஆர்வமுள்ள நியூக்ளிக் அமிலங்களைக் கொண்ட உள்-செல்லுலார் திரவங்களை வெளியிடுகிறது.
தேவையற்ற குப்பைகளை அகற்றுதல். இதில் மெம்பிரேன் லிப்பிடுகள், புரதங்கள் மற்றும் பிற தேவையற்ற நியூக்ளிக் அமிலங்கள் கீழ்நிலை பயன்பாடுகளில் குறுக்கிடலாம்.
தனிமைப்படுத்துதல். நீங்கள் உருவாக்கிய அழிக்கப்பட்ட லைசேட்டிலிருந்து ஆர்வமுள்ள நியூக்ளிக் அமிலங்களைத் தனிமைப்படுத்த பல்வேறு வழிகள் உள்ளன, இவை இரண்டு முக்கிய வகைகளுக்கு இடையே அடங்கும்: தீர்வு அடிப்படையிலான அல்லது திட நிலை (அடுத்த பகுதியைப் பார்க்கவும்).
செறிவு. நியூக்ளிக் அமிலங்கள் மற்ற அனைத்து அசுத்தங்கள் மற்றும் நீர்த்த பொருட்களிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட பிறகு, அவை அதிக செறிவூட்டப்பட்ட எலுவேட்டில் வழங்கப்படுகின்றன.
இரண்டு வகையான பிரித்தெடுத்தல்
நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுப்பதில் இரண்டு வகைகள் உள்ளன - தீர்வு அடிப்படையிலான முறைகள் மற்றும் திட நிலை முறைகள். தீர்வு அடிப்படையிலான முறை இரசாயன பிரித்தெடுத்தல் முறை என்றும் அழைக்கப்படுகிறது, ஏனெனில் இது கலத்தை உடைத்து அணுக்கருப் பொருளை அணுகுவதற்கு இரசாயனங்களைப் பயன்படுத்துகிறது. இது பீனால் மற்றும் குளோரோஃபார்ம் போன்ற கரிம சேர்மங்கள் அல்லது குறைவான தீங்கு விளைவிக்கும் மற்றும் அதனால் பரிந்துரைக்கப்படும் ப்ரோட்டினேஸ் கே அல்லது சிலிக்கா ஜெல் போன்ற கனிம சேர்மங்களைப் பயன்படுத்தலாம்.
ஒரு கலத்தை உடைப்பதற்கான பல்வேறு இரசாயன பிரித்தெடுக்கும் முறைகளின் எடுத்துக்காட்டுகள் பின்வருமாறு:
- சவ்வு சவ்வு முறிவு
- செல் சுவரின் நொதி செரிமானம்
- சவ்வு கரைதல்
- சவர்க்காரங்களுடன்
- கார சிகிச்சையுடன்
திட நிலை நுட்பங்கள், இயந்திர முறைகள் என்றும் அழைக்கப்படுகின்றன, டிஎன்ஏ ஒரு திடமான அடி மூலக்கூறுடன் எவ்வாறு தொடர்பு கொள்கிறது என்பதைப் பயன்படுத்துகிறது. டிஎன்ஏ பிணைக்கும் ஆனால் பகுப்பாய்வு செய்யாத ஒரு மணி அல்லது மூலக்கூறைத் தேர்ந்தெடுப்பதன் மூலம், இரண்டையும் பிரிக்க முடியும். சிலிக்கா மற்றும் காந்த மணிகளைப் பயன்படுத்துவது உட்பட திட-கட்ட பிரித்தெடுத்தல் நுட்பங்களின் எடுத்துக்காட்டுகள்.
காந்த மணி பிரித்தெடுத்தல் விளக்கப்பட்டது
காந்த மணி பிரித்தெடுத்தல் முறை
காந்த மணிகளைப் பயன்படுத்தி பிரித்தெடுப்பதற்கான சாத்தியக்கூறுகள் முதன்முதலில் வைட்ஹெட் இன்ஸ்டிடியூட் ஆராய்ச்சி நிறுவனத்திற்காக ட்ரெவர் ஹாக்கின்ஸ் தாக்கல் செய்த அமெரிக்க காப்புரிமையில் அங்கீகரிக்கப்பட்டது. இந்த காப்புரிமையானது மரபியல் பொருட்களை ஒரு திடமான ஆதரவு கேரியருடன் பிணைப்பதன் மூலம் பிரித்தெடுக்க முடியும் என்பதை ஒப்புக்கொண்டது, இது ஒரு காந்த மணியாக இருக்கலாம். கொள்கை என்னவென்றால், நீங்கள் மிகவும் செயல்படும் காந்த மணிகளைப் பயன்படுத்துகிறீர்கள், அதில் மரபணுப் பொருள் பிணைக்கப்படும், பின்னர் மாதிரியை வைத்திருக்கும் பாத்திரத்தின் வெளிப்புறத்தில் ஒரு காந்த சக்தியைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் சூப்பர்நேட்டண்டிலிருந்து பிரிக்கலாம்.
காந்த மணி பிரித்தெடுத்தல் ஏன் பயன்படுத்த வேண்டும்?
காந்த மணிகளைப் பிரித்தெடுக்கும் தொழில்நுட்பம், விரைவான மற்றும் திறமையான பிரித்தெடுக்கும் நடைமுறைகளுக்குக் கொண்டிருக்கும் சாத்தியக்கூறுகளின் காரணமாக, பெருகிய முறையில் பரவி வருகிறது. சமீப காலங்களில், பொருத்தமான தாங்கல் அமைப்புகளுடன் கூடிய உயர்தரமான காந்த மணிகளின் வளர்ச்சிகள் ஏற்பட்டுள்ளன, அவை நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுப்பதை தன்னியக்கமாக்குவதையும், மிகவும் வள ஒளி மற்றும் செலவு-திறனுள்ள பணிப்பாய்வுகளையும் சாத்தியமாக்கியுள்ளன. மேலும், காந்த மணிகள் பிரித்தெடுக்கும் முறைகள் டிஎன்ஏவின் நீண்ட துண்டுகளை உடைக்கும் வெட்டு சக்திகளை ஏற்படுத்தும் மையவிலக்கு படிகளை உள்ளடக்குவதில்லை. இதன் பொருள் டிஎன்ஏவின் நீண்ட இழைகள் அப்படியே இருக்கும், இது மரபியல் சோதனையில் முக்கியமானது.
இடுகை நேரம்: நவம்பர்-25-2022