பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினைகள் (PCR) என்பது வாழ்க்கை அறிவியல் ஆய்வகங்களில் பரவலாக அறியப்பட்ட முறைகளில் ஒன்றாகும்.
PCR தகடுகள் சிறந்த செயலாக்கம் மற்றும் மாதிரிகள் அல்லது சேகரிக்கப்பட்ட முடிவுகளின் பகுப்பாய்வுக்காக முதல்-வகுப்பு பிளாஸ்டிக்கிலிருந்து தயாரிக்கப்படுகின்றன.
துல்லியமான வெப்ப பரிமாற்றத்தை வழங்க அவை மெல்லிய மற்றும் ஒரே மாதிரியான சுவர்களைக் கொண்டுள்ளன.
நிகழ்நேர பயன்பாடுகளுக்கான தயாரிப்பில், டிஎன்ஏ அல்லது ஆர்என்ஏவின் நிமிடப் பகுதி தனிமைப்படுத்தப்பட்டு PCR தட்டுகளில் சேமிக்கப்படுகிறது.
PCR தட்டுகள் வெப்ப சீல் செய்வதில் மிகவும் திறமையானவை மற்றும் வெப்ப ஓட்டத்தையும் கட்டுப்படுத்துகின்றன.
இருப்பினும், PCR தகடுகள் பயனுள்ளதாகவும் நம்பகத்தன்மையுடனும் இருப்பதால், மாதிரிகளைச் செயலாக்கும்போது பிழை மற்றும் தவறுகள் எளிதில் மறைந்துவிடும்.
எனவே, நீங்கள் ஒரு நல்ல மற்றும் உயர் தரத்தைப் பெற ஆர்வமாக இருந்தால்பிசிஆர் தட்டுகள்.நம்பகமான PCR தட்டு உற்பத்தியாளரைத் தொடர்புகொள்வது சிறந்தது. இதன் மூலம் நீங்கள் சிறந்த ஒப்பந்தத்தைப் பெறுவது உறுதி.
எதிர்வினைகள் அல்லது மாதிரிகள் மாசுபடுவதைத் தவிர்ப்பதற்கும், முடிவுகளில் பிழைகள் ஊடுருவுவதைத் தடுப்பதற்கும் பின்பற்ற வேண்டிய சில முன்னெச்சரிக்கைகள் இங்கே உள்ளன.
சுற்றுப்புறங்களை கிருமி நீக்கம் செய்தல்
அசுத்தங்கள் இருப்பதால் தவறான நேர்மறைகள் அல்லது எதிர்மறைகள் ஏற்படுகின்றன, இது முடிவுகளை சந்தேகிக்க வைக்கிறது.
அசுத்தங்கள் மற்றும் அசுத்தங்கள் தொடர்பற்ற DNA அல்லது இரசாயன சேர்க்கைகள் போன்ற பல்வேறு வடிவங்களில் நிகழ்கின்றன, அவை இறுதியில் எதிர்வினையின் செயல்திறன் மற்றும் செயல்திறனைக் குறைக்கின்றன.
PCR தட்டின் மாசுபாட்டின் விகிதத்தை வெகுவாகக் குறைக்க பல வழிகள் உள்ளன.
கிருமி நீக்கம் செய்யப்பட்ட வடிகட்டி உதவிக்குறிப்புகளைப் பயன்படுத்துவது, குழாய்கள் மூலம் உங்கள் மாதிரிகளில் அசுத்தங்கள் ஊடுருவுவதைத் தடுக்க மற்றொரு பயனுள்ள வழியாகும்.
PCR பயன்பாட்டிற்காக பிரத்தியேகமாக குழாய்கள் மற்றும் ரேக்குகளை உள்ளடக்கிய முற்றிலும் சுத்தமான உபகரணங்களை ஒதுக்குங்கள். இது ஆய்வகத்தைச் சுற்றியுள்ள அசுத்தங்கள் அல்லது அசுத்தங்களின் மிகக் குறைவான பரிமாற்றத்திற்கு உத்தரவாதம் அளிக்கும்.
அசுத்தங்களைத் துடைக்க ப்ளீச்கள், பைப்பெட்டுகள், ரேக்குகள் மற்றும் பெஞ்சுகளில் எத்தனால் பயன்படுத்தவும்.
துகள் மாசுபாட்டை மேலும் குறைக்க உங்கள் அனைத்து PCR எதிர்வினைகளுக்கும் ஒதுக்கப்பட்ட இடத்தை ஒதுக்கவும்.
ஒவ்வொரு அடியிலும் சுத்தமான கையுறைகளைப் பயன்படுத்தவும், அவற்றை அடிக்கடி மாற்றவும்.
பிசிஆர் தட்டுகள்
டெம்ப்ளேட்டின் செறிவு மற்றும் தூய்மையை ஆய்வு செய்யவும்.
PCR உடன் மாதிரிகளை பகுப்பாய்வு செய்யும் போது பயன்படுத்தப்படும் பெஞ்ச் மற்றும் உபகரணங்களின் தூய்மை பராமரிக்கப்பட வேண்டும். பகுப்பாய்வு மற்றும் செயலாக்கத்திற்கு முன் மாதிரிகளின் தூய்மையின் அளவை சரிபார்க்க வேண்டியது அவசியம்.
பொதுவாக, பகுப்பாய்விகள் டிஎன்ஏ மாதிரிகளின் செறிவு மற்றும் தூய்மையின் அளவைக் கருத்தில் கொள்கின்றன.
260nm/280nm க்கு உறிஞ்சும் விகிதம் 1.8 க்கும் குறைவாக இருக்கக்கூடாது. அசுத்தங்களை அடையாளம் காண 230nm மற்றும் 320nm இடையேயான அலைநீளம் பயன்படுத்தப்படுகிறது.
ஒரு உதாரணமாக, 230nm உறிஞ்சுதல் விகிதத்தில் chaotropic உப்புகள் மற்றும் பிற கரிம சேர்மங்கள் கண்டறியப்படுகின்றன. டிஎன்ஏ மாதிரிகளில் உள்ள கொந்தளிப்பு 320nm உறிஞ்சுதல் விகிதத்தில் கண்டறியப்பட்டு சரிபார்க்கப்படுகிறது.
தயாரிப்புடன் PCR தட்டுகளை ஓவர்லோட் செய்வதைத் தவிர்க்கவும்
ஒரே நேரத்தில் பல தயாரிப்புகளை இயக்க விரும்பினாலும், அது PCR தகடுகளின் குறுக்கு-மாசுபாட்டை விளைவிக்கிறது.
பிசிஆர் தகடுகளில் பல்வேறு தயாரிப்புகளை அதிக அளவில் ஏற்றுவது கழிவுகள் மற்றும் மாதிரிகளைக் கண்டறிவதை மிகவும் கடினமாக்குகிறது.
அலிகோட் பிசிஆர் ரீஜென்ட்களின் பதிவுகளை வைத்திருங்கள்
தொடர்ச்சியான முடக்கம்/கரை சுழற்சிகள் மற்றும் அலிகோட்டை அடிக்கடி பயன்படுத்துதல் ஆகியவை பிசிஆர் ரியாஜெண்டுகள், என்சைம்கள் மற்றும் டிஎன்டிபிகளை மறுபடிகமயமாக்கல் மூலம் சேதப்படுத்தும்.
பகுப்பாய்வு செய்ய மாதிரிகளைத் தயாரிக்கும் போது பயன்படுத்தப்படும் அலிகோட்டின் வீதத்தைக் கண்காணிக்க எப்போதும் முயற்சி செய்யுங்கள்.
விருப்பமான LIMS ஆனது சரக்குகள் மற்றும் உலைகள் மற்றும் மாதிரிகள் உறைந்த அல்லது கரைக்கப்பட்ட அளவைக் கட்டுப்படுத்த மிகவும் பொருத்தமானது.
சிறந்த அனீலிங் வெப்பநிலையைத் தேர்ந்தெடுக்கவும்.
தவறான அனீலிங் வெப்பநிலையைத் தேர்ந்தெடுத்து பயன்படுத்துவது PCR முடிவுகள் பிழையைக் கொண்டிருக்கும் மற்றொரு முறையாகும்.
சில நேரங்களில், எதிர்வினை திட்டமிட்டபடி செல்லாது. ஒரு வெற்றிகரமான எதிர்வினைக்கு வசதியாக, அனீலிங் வெப்பநிலையைக் குறைக்க விரும்புகிறது.
இருப்பினும், வெப்பநிலையைக் குறைப்பது தவறான நேர்மறை மற்றும் ப்ரைமர் டைமர்கள் தோற்றத்திற்கான வாய்ப்புகளை அதிகரிக்கிறது.
PCR தகடுகளைப் பயன்படுத்தும் போது உருகும் வளைவின் பகுப்பாய்வை உறுதிப்படுத்துவது குறிப்பிடத்தக்கது, ஏனெனில் இது சரியான அனீலிங் வெப்பநிலையைத் தேர்ந்தெடுப்பதற்கான ஒரு நல்ல குறிகாட்டியாகும்.
ப்ரைமர் டிசைன் சாஃப்ட்வேர் வடிவமைப்பு, சரியான அனீலிங் வெப்பநிலையை வழங்குதல் ஆகியவற்றுடன் PCR தட்டுகளில் உள்ள பிழையை நேரடியாகக் குறைக்கிறது.
உயர்தர PCR தட்டு தேவையா?
நம்பகமான உற்பத்தியாளரை எங்கு கண்டுபிடிப்பது என்று நீங்கள் கருத்தில் கொண்டால்பிசிஆர் தட்டுகள். நீங்கள் சரியான இடத்தில் இருப்பதால் தேட வேண்டாம்.
தயவுசெய்துஎங்களை தொடர்பு கொள்ள இங்கே கிளிக் செய்யவும்வங்கியை உடைக்காத விலையில் உயர்தர தயாரிப்புகள் மற்றும் சேவைகளுக்கு.
பின் நேரம்: அக்டோபர்-30-2021