Je! Ni nini kinachopaswa kuzingatiwa wakati wa bomba mchanganyiko wa PCR?

Kwa athari za kukuza mafanikio, inahitajika kwamba sehemu za athari za mtu zipo kwenye mkusanyiko sahihi katika kila maandalizi. Kwa kuongezea, ni muhimu kwamba hakuna uchafu unaotokea.

Hasa wakati athari nyingi zinapaswa kusanidiwa, imeanzishwa kuandaa mchanganyiko unaoitwa bwana badala ya bomba kila reagent kando katika kila chombo. Mchanganyiko uliosanidiwa mapema unapatikana kibiashara, ambamo tu vifaa maalum vya mfano (primer) na maji huongezwa. Vinginevyo, mchanganyiko wa bwana unaweza kutayarishwa na wewe mwenyewe. Katika anuwai zote mbili, mchanganyiko huo unasambazwa kwa kila chombo cha PCR bila template na sampuli ya DNA ya mtu binafsi huongezwa kando mwishoni.

Kutumia mchanganyiko wa bwana kuna faida kadhaa: kwanza, idadi ya hatua moja za bomba hupunguzwa. Kwa njia hii, hatari zote mbili za makosa ya watumiaji wakati wa bomba na hatari ya uchafu hupunguzwa na, kwa kweli, wakati umeokolewa. Kimsingi, usahihi wa bomba pia ni kubwa zaidi, kwani idadi kubwa imewekwa. Hii ni rahisi kuelewa wakati wa kuangalia data ya kiufundi ya bomba: ndogo kiasi kilichowekwa, kupotoka kunaweza kuwa. Ukweli kwamba maandalizi yote yanatoka kwenye chombo hicho hicho lina athari chanya juu ya homogeneity (ikiwa imechanganywa vizuri). Hii pia inaboresha kuzaliana kwa majaribio.

Wakati wa kuandaa mchanganyiko wa bwana, angalau 10 % ya ziada inapaswa kuongezwa (kwa mfano ikiwa maandalizi 10 yanahitajika, mahesabu kwa msingi wa 11), ili hata chombo cha mwisho kimejazwa vizuri. Kwa njia hii, (kidogo) ya kunyoosha bomba, na athari ya upotezaji wa sampuli wakati suluhisho zenye sabuni zinaweza kulipwa fidia. Detergents ziko katika suluhisho za enzyme kama vile polymerases na mchanganyiko wa bwana, na kusababisha malezi ya povu na mabaki kwenye uso wa ndani wa kawaidaVidokezo vya Bomba.

Kulingana na programu na aina ya kioevu kusambazwa, mbinu sahihi ya bomba (1) inapaswa kuchaguliwa na vifaa sahihi vilivyochaguliwa. Kwa suluhisho zilizo na sabuni, mfumo wa moja kwa moja wa kuhamishwa au vidokezo vya bomba la "kutunza chini" kama njia mbadala ya bomba la mto-hewa hupendekezwa. Athari yaNcha ya bomba la aceni msingi wa uso wa hydrophobic. Vinywaji vyenye sabuni haviachi filamu ya mabaki ndani na nje, ili upotezaji wa suluhisho uweze kupunguzwa.

Licha ya dosing halisi ya vifaa vyote, ni muhimu pia kwamba hakuna uchafu wa maandalizi yanayotokea. Haitoshi kutumia matumizi ya usafi wa hali ya juu, kwa sababu mchakato wa bomba kwenye bomba la mto wa hewa unaweza kutoa erosoli ambazo zinabaki kwenye bomba. DNA ambayo inaweza kuwa ndani ya aerosol inaweza kuhamishwa kutoka sampuli moja kwenda nyingine katika hatua ifuatayo ya bomba na kwa hivyo kusababisha uchafu. Mifumo ya moja kwa moja iliyotajwa hapo juu inaweza pia kupunguza hatari hii. Kwa bomba la kuzaa hewa inafanya akili kutumia vidokezo vya vichungi kulinda koni ya bomba kwa kubakiza splashes, erosoli, na biomolecules.