Urekebishaji wa michakato ni pamoja na utaftaji wao na uanzishwaji wa baadaye na kuoanisha, kuruhusu utendaji mzuri wa muda mrefu-huru ya mtumiaji. Sanifu inahakikisha matokeo ya hali ya juu, na vile vile kuzaliana kwao na kulinganisha.
Lengo la (classic) PCR ni kizazi cha matokeo ya kuaminika na ya kuzaa. Kwa matumizi fulani, mavuno yaBidhaa ya PCRpia ni muhimu. Kwa athari hizi, utunzaji lazima uchukuliwe ili kuhakikisha kuwa sampuli hazijaathirika na kwamba utiririshaji wa kazi wa PCR unabaki thabiti. Hasa, hii inatafsiri kupunguza utangulizi wa uchafu ambao unaweza kusababisha matokeo mazuri ya uwongo au ya uwongo au hata kuzuia athari ya PCR. Kwa kuongezea, hali ya athari inapaswa kuwa sawa iwezekanavyo kwa kila sampuli ya mtu binafsi ndani ya kukimbia na pia inaweza kuhamishwa kwa athari inayofuata (ya njia ile ile). Hii inahusu muundo wa athari na aina ya udhibiti wa joto kwenye cycler. Makosa ya watumiaji, kwa kweli, yanapaswa kuepukwa iwezekanavyo.
Hapo chini, tutaonyesha changamoto ambazo zinakutana wakati wa maandalizi na wakati wote wa PCR - na njia za suluhisho ambazo zipo kwa heshima na vyombo na matumizi yanayotumika kwa viwango vya kazi ya PCR.
Maandalizi ya athari
Ugawanyaji wa vifaa vya athari katika vyombo vya PCR, au sahani, mtawaliwa, inajumuisha changamoto nyingi ambazo lazima zishindwe:
Hali ya athari
Dosing halisi na sahihi ya vifaa vya mtu binafsi ni muhimu wakati wa kulenga hali zinazofanana za athari. Mbali na mbinu nzuri ya bomba, kuchagua zana sahihi ni muhimu. Mchanganyiko wa PCR Master mara nyingi huwa na vitu ambavyo huongeza mnato au hutoa povu. Wakati wa mchakato wa bomba, hizi husababisha kunyunyiza kwa kiasi kikubwa chaVidokezo vya Bomba, na hivyo kupunguza usahihi wa bomba. Matumizi ya mifumo ya kusambaza moja kwa moja au vidokezo mbadala vya bomba ambavyo havikabiliwa na kunyunyizia kunaweza kuboresha usahihi na usahihi wa mchakato wa bomba.
Mizozo
Wakati wa mchakato wa kusambaza, erosoli hutolewa ambayo, ikiwa inaruhusiwa kufikia ndani ya bomba, inaweza kuchafua sampuli nyingine wakati wa hatua inayofuata ya bomba. Hii inaweza kuzuiwa kwa kutumia vidokezo vya vichungi au mifumo ya moja kwa moja ya kuhamishwa.
Matumizi kama vilevidokezo, Vyombo na sahani ambazo hutumiwa katika mtiririko wa kazi wa PCR hazipaswi kuwa na vitu ambavyo vinaathiri sampuli au uwongo matokeo. Hii ni pamoja na DNA, DNAses, RNases na vizuizi vya PCR, na vile vile vifaa ambavyo vinaweza kuvuta kutoka kwa nyenzo wakati wa athari - vitu vinavyojulikana kama leach.
Kosa la Mtumiaji
Sampuli zaidi zinashughulikiwa, ndivyo hatari ya makosa. Inaweza kutokea kwa urahisi kuwa sampuli imeingizwa kwenye chombo kibaya au kisima kibaya. Hatari hii inaweza kupunguzwa sana na alama ya kutambulika kwa urahisi ya visima. Kupitia automatisering ya hatua za kusambaza, "sababu ya kibinadamu", yaani, makosa na tofauti zinazohusiana na watumiaji, hupunguzwa, na hivyo huongeza kuzaliana, haswa katika kesi ya athari ndogo. Hii inahitaji sahani za utulivu wa kutosha kuajiriwa katika kazi. Barcode zilizoambatanishwa hutoa usomaji wa ziada wa mashine, ambayo hurahisisha ufuatiliaji wa mfano katika mchakato mzima.
Programu ya thermocycler
Kupanga chombo kunaweza kudhibitisha kuwa wakati na wakati na kukabiliana na makosa. Vipengele tofauti vya Cycler ya mafuta ya PCR hufanya kazi pamoja ili kurahisisha hatua hii ya mchakato na, muhimu zaidi, kuifanya iwe salama:
Operesheni rahisi na mwongozo mzuri wa watumiaji ni msingi wa programu bora. Kujengwa kwa msingi huu, usimamizi wa watumiaji uliolindwa na nywila utazuia mipango ya mtu mwenyewe kubadilishwa na watumiaji wengine. Ikiwa cyclers nyingi (za aina hiyo hiyo) zinatumika, ni muhimu ikiwa mpango unaweza kuhamishwa moja kwa moja kutoka kwa chombo kimoja kwenda kingine kupitia USB au kuunganishwa. Programu ya kompyuta inawezesha usimamizi wa kati na salama wa mipango, haki za watumiaji na hati kwenye kompyuta.
PCR kukimbia
Wakati wa kukimbia, DNA imeimarishwa kwenye chombo cha athari, ambapo kila sampuli inapaswa kuwekwa kwa hali sawa, ya athari thabiti. Vipengele vifuatavyo vinafaa kwa mchakato:
Udhibiti wa joto
Usahihishaji bora katika udhibiti wa joto na homogeneity ya block ya cycler ni msingi wa hali ya joto hata ya sampuli zote. Ubora wa juu wa vitu vya kupokanzwa na baridi (vitu vya peltier), na vile vile njia ambayo hizi zimeunganishwa kwenye block, ni sababu za kuamua ambazo zitaamua hatari ya kutofautisha kwa joto inayojulikana kama "athari ya makali"
Uvukizi
Kuzingatia kwa vifaa vya athari ya mtu binafsi haipaswi kubadilika kwa wakati wote wa athari kwa sababu ya uvukizi. Vinginevyo, inawezekana hiyo kidogo sanaBidhaa ya PCRinaweza kuzalishwa, au hakuna kabisa. Kwa hivyo ni muhimu kupunguza uvukizi kwa kuhakikisha muhuri salama. Katika kesi hii, kifuniko cha joto cha thermocycler na muhuri wa chombo cha kazi mkono. Chaguzi tofauti za kuziba zinapatikanaSahani za PCR (kiunga: Nakala ya kuziba), ambayo muhuri bora hupatikana kupitia kuziba joto. Kufungwa zingine kunaweza pia kuwa sawa, kwa muda mrefu kama shinikizo la mawasiliano la kifuniko cha cycler linaweza kubadilishwa kwa muhuri uliochaguliwa.
Sanifu ya mchakato iko mahali ili kulinda matokeo sahihi na ya kuzaliana kwa muda mrefu. Hii ni pamoja na matengenezo ya mara kwa mara ya vifaa ili kuhakikisha kuwa daima iko katika hali nzuri ya kufanya kazi. Matumizi yote yanapaswa kuwa ya ubora wa hali ya juu kwa kura zote zinazozalishwa, na upatikanaji wao wa kuaminika lazima uhakikishwe.
Wakati wa chapisho: Novemba-29-2022