Usanifu wa michakato inajumuisha uboreshaji wao na uanzishaji na upatanishi unaofuata, kuruhusu utendakazi bora wa muda mrefu - bila kujali mtumiaji. Kusawazisha huhakikisha matokeo ya ubora wa juu, pamoja na kuzaliana na kulinganishwa kwao.
Lengo la (classic) PCR ni kizazi cha matokeo ya kuaminika na ya kuzaliana. Kwa matumizi fulani, mavuno yaBidhaa ya PCRpia ni muhimu. Kwa athari hizi, ni lazima uangalifu uchukuliwe ili kuhakikisha kuwa sampuli haziathiriwi na kwamba utendakazi wa PCR unasalia thabiti. Hasa, hii inamaanisha kupunguza uanzishaji wa uchafu ambao unaweza kusababisha matokeo chanya au hasi ya uwongo au hata kuzuia athari ya PCR. Zaidi ya hayo, hali ya majibu inapaswa kufanana iwezekanavyo kwa kila sampuli ya mtu binafsi ndani ya kukimbia na pia kuhamishwa kwa athari zinazofuata (za njia sawa). Hii inarejelea muundo wa athari na vile vile aina ya udhibiti wa halijoto katika kiendesha baisikeli. Makosa ya mtumiaji, bila shaka, yanapaswa kuepukwa iwezekanavyo.
Hapo chini, tutaonyesha changamoto zinazokabiliwa wakati wa kutayarisha na wakati wote wa PCR - na mbinu za masuluhisho ambazo zipo kuhusiana na zana na matumizi yanayotumika kusawazisha mtiririko wa kazi wa PCR.
Maandalizi ya majibu
Usambazaji wa vipengele vya athari katika vyombo vya PCR, au sahani, kwa mtiririko huo, unajumuisha changamoto nyingi ambazo lazima zishindwe:
Masharti ya majibu
Kipimo halisi na sahihi cha vipengele vya mtu binafsi ni muhimu sana wakati wa kulenga hali zinazofanana za majibu iwezekanavyo. Mbali na mbinu nzuri ya kupiga bomba, ni muhimu kuchagua chombo sahihi. Mchanganyiko wa PCR mara nyingi huwa na vitu vinavyoongeza mnato au kutoa povu. Wakati wa mchakato wa bomba, hizi husababisha wetting kubwa yavidokezo vya pipette, hivyo kupunguza usahihi wa bomba. Matumizi ya mifumo ya kusambaza moja kwa moja au vidokezo mbadala vya pipette ambavyo havielewi sana vinaweza kuboresha usahihi na usahihi wa mchakato wa kupiga bomba.
Uchafuzi
Wakati wa mchakato wa kusambaza, erosoli huzalishwa ambayo, ikiwa inaruhusiwa kufikia ndani ya pipette, inaweza uwezekano wa kuchafua sampuli nyingine wakati wa hatua inayofuata ya bomba. Hii inaweza kuzuiwa kwa kutumia vidokezo vya chujio au mifumo ya uhamishaji wa moja kwa moja.
Vifaa vya matumizi kama vilevidokezo, vyombo na sahani zinazotumika katika utendakazi wa PCR lazima zisiwe na vitu vinavyoathiri sampuli au kughushi matokeo. Hizi ni pamoja na DNA, DNases, RNases na PCR inhibitors, pamoja na vipengele ambavyo vinaweza kutoka kwenye nyenzo wakati wa majibu - vitu vinavyojulikana kama kuvuja.
Hitilafu ya mtumiaji
Sampuli zaidi zinavyochakatwa, ndivyo hatari ya makosa inavyoongezeka. Inaweza kutokea kwa urahisi kwamba sampuli inaingizwa kwenye chombo kibaya au kisima kibaya. Hatari hii inaweza kupunguzwa sana kwa kuweka alama kwenye visima kwa urahisi. Kupitia otomatiki ya hatua za kusambaza, "sababu ya kibinadamu", yaani, makosa na tofauti zinazohusiana na mtumiaji, hupunguzwa, hivyo kuongeza uzazi, hasa katika kesi ya kiasi kidogo cha majibu. Hii inahitaji sahani za uthabiti wa kutosha wa dimensional ili kuajiriwa katika kituo cha kazi. Misimbo pau iliyoambatishwa hutoa usomaji wa ziada wa mashine, ambao hurahisisha ufuatiliaji wa sampuli katika mchakato mzima.
Upangaji wa thermocycler
Kupanga kifaa kunaweza kuchukua muda na vile vile kukabiliwa na makosa. Vipengele tofauti vya mzunguko wa joto wa PCR hufanya kazi pamoja ili kurahisisha hatua hii ya mchakato na, muhimu zaidi, kuifanya iwe salama:
Uendeshaji rahisi na mwongozo mzuri wa mtumiaji ni msingi wa programu bora. Kwa kuzingatia msingi huu, usimamizi wa mtumiaji unaolindwa na nenosiri utazuia programu za mtu mwenyewe kubadilishwa na watumiaji wengine. Ikiwa baisikeli nyingi (za aina moja) zinatumika, ni vyema ikiwa programu inaweza kuhamishwa moja kwa moja kutoka kwa chombo kimoja hadi kingine kupitia USB au muunganisho. Programu ya kompyuta huwezesha usimamizi wa kati na salama wa programu, haki za mtumiaji na nyaraka kwenye kompyuta.
Uendeshaji wa PCR
Wakati wa kukimbia, DNA huimarishwa katika chombo cha majibu, ambapo kila sampuli inapaswa kukabiliwa na hali ya majibu sawa, thabiti. Vipengele vifuatavyo vinafaa kwa mchakato:
Udhibiti wa joto
Usahihi bora katika udhibiti wa joto na homogeneity ya kuzuia mzunguko ni msingi wa hali ya joto hata ya sampuli zote. Ubora wa juu wa vipengele vya kupokanzwa na baridi (vipengele vya peltier), pamoja na njia ambayo haya yanaunganishwa kwenye block, ni mambo ya kuamua ambayo yataamua hatari ya kutofautiana kwa joto inayojulikana kama "athari ya makali"
Uvukizi
Mkusanyiko wa vipengele vya mmenyuko wa mtu binafsi haipaswi kubadilika wakati wa majibu kutokana na uvukizi. Vinginevyo, inawezekana kwamba kidogo sanaBidhaa ya PCRinaweza kuzalishwa, au hakuna kabisa. Kwa hivyo ni muhimu kupunguza uvukizi kwa kuhakikisha muhuri salama. Katika kesi hiyo, kifuniko cha joto cha thermocycler na muhuri wa chombo hufanya kazi kwa mkono. Chaguzi tofauti za kuziba zinapatikana kwaSahani za PCR (kiungo: Kufunga makala), ambapo muhuri bora zaidi hupatikana kwa kuziba joto. Vifungo vingine vinaweza pia kufaa, mradi tu shinikizo la mawasiliano la kifuniko cha mzunguko linaweza kubadilishwa kwa muhuri uliochaguliwa.
Usanifu wa mchakato upo ili kulinda matokeo sahihi na yanayoweza kuzalishwa tena kwa muda mrefu. Hii ni pamoja na matengenezo ya mara kwa mara ya vifaa ili kuhakikisha kuwa viko katika hali nzuri ya kufanya kazi kila wakati. Bidhaa zote za matumizi zinapaswa kuwa za ubora wa juu mfululizo katika kura zote zinazozalishwa, na upatikanaji wake wa kuaminika lazima uhakikishwe.
Muda wa kutuma: Nov-29-2022