Skär du avpipettspetsNär pipettering glycerol? Jag gjorde det under min doktorsexamen, men jag var tvungen att lära mig att detta ökar felaktighet och imprecision av min pipettering. Och för att vara ärlig när jag klippte spetsen, kunde jag också ha direkt hällt glycerolen från flaskan i röret. Så jag ändrade min teknik för att förbättra pipetteringsresultaten och få mer pålitliga och reproducerbara resultat när jag arbetade med viskösa vätskor.
En flytande kategori som behöver särskild uppmärksamhet när pipettering är viskösa vätskor. Dessa används ofta i labbet, antingen i en ren form eller som buffertkomponenter. Kända representanter för viskösa vätskor i forskningslaboratorier är Glycerol, Triton X-100 och Tween® 20. Men också, laboratorier som gör kvalitetskontroll av livsmedel, kosmetika, läkemedel och andra konsumentprodukter handlar om viskösa lösningar dagligen.
Viskositet anges antingen som dynamisk eller kinematisk viskositet. I den här artikeln koncentrerar jag mig på den dynamiska viskositeten hos vätskor eftersom den beskriver vätskans rörelse. Graden av viskositet specificeras i Millipascal per sekund (MPA*s). Snarare vätskeprover runt 200 MPa*som 85 % glycerol kan fortfarande överföras med hjälp av en klassisk luftkuddepipett. När du applicerar en speciell teknik är omvänd pipettering, aspiration av luftbubblor eller rester i spetsen mycket reducerade och leder till mer exakta pipetteringsresultat. Men ändå är det inte det bästa vi kan göra för att förbättra pipettering av viskösa vätskor (se fig. 1).
När viskositeten ökar ökar svårigheterna. Medium viskösa lösningar upp till 1 000 MPa*s är svårare att överföras med klassiska luftkuddpipetter. På grund av den höga inre friktionen av molekyler har viskösa vätskor ett mycket långsamt flödesbeteende och pipettering måste göras mycket långsamt och försiktigt. Omvänd pipetteringsteknik räcker ofta inte för korrekt vätskefrygg och många väger sina prover. Denna strategi innebär också att ta hänsyn till vätskans densitet såväl som laboratorieförhållandena såsom fuktighet och temperatur för att exakt beräkna den nödvändiga vätskevolymen i vikt. Därför rekommenderas andra pipetteringsverktyg, så kallade positiva förskjutningsverktyg,. Dessa har ett tips med en integrerad kolv, precis som en spruta. Följaktligen kan vätska lättare sugas och dispenseras medan korrekt vätskeöverföring ges. En speciell teknik är inte nödvändig.
Ändå når också positiva förskjutningsverktyg en gräns med mycket viskösa lösningar som flytande honung, hudkräm eller vissa mekaniska oljor. Dessa mycket krävande vätskor behöver ett annat specialverktyg som också använder den positiva förskjutningsprincipen men har dessutom en optimerad design för att hantera mycket viskösa lösningar. Detta specialverktyg har jämförts med befintliga positiva förskjutningstips för att få en tröskel vid vilken det är viktigt att byta från ett normalt dispenseringsspets till ett speciellt tips för mycket viskösa lösningar. Det visades att noggrannheten ökas och krafter som behövs för aspiration och dispensering minskas när man använder ett speciellt tips för mycket viskösa vätskor. För ytterligare detaljerad information och flytande exempel, ladda ner Applicaton Note 376 om optimerad prestanda för mycket viskösa vätskor.
Posttid: jan-23-2023