Skär du avpipettspetsnär du pipetterar glycerol? Det gjorde jag under min doktorsexamen, men jag var tvungen att lära mig att detta ökar inexaktheten och oprecisionen i min pipettering. Och om jag ska vara ärlig när jag skar spetsen så kunde jag också ha hällt glycerolen från flaskan direkt i tuben. Så jag ändrade min teknik för att förbättra pipetteringsresultaten och få mer tillförlitliga och reproducerbara resultat när jag arbetar med trögflytande vätskor.
En vätskekategori som kräver särskild uppmärksamhet vid pipettering är trögflytande vätskor. Dessa används ofta i labbet, antingen i ren form eller som buffertkomponenter. Kända representanter för viskösa vätskor i forskningslaboratorier är glycerol, Triton X-100 och Tween® 20. Men också laboratorier som gör kvalitetskontroll av livsmedel, kosmetika, läkemedel och andra konsumentprodukter hanterar trögflytande lösningar dagligen.
Viskositet anges antingen som dynamisk eller kinematisk viskositet. I den här artikeln koncentrerar jag mig på vätskors dynamiska viskositet eftersom den beskriver vätskans rörelse. Graden av viskositet anges i millipascal per sekund (mPa*s). Snarare kan vätskeprover runt 200 mPa*s, såsom 85 % glycerol, fortfarande överföras med en klassisk luftkuddepipett. Vid tillämpning av en speciell teknik reduceras omvänd pipettering, aspiration av luftbubblor eller rester i spetsen kraftigt och leder till mer exakta pipetteringsresultat. Men det är ändå inte det bästa vi kan göra för att förbättra pipettering av trögflytande vätskor (se fig. 1).
När viskositeten ökar ökar svårigheterna. Medelviskösa lösningar upp till 1 000 mPa*s är svårare att överföra med klassiska luftkuddepipetter. På grund av den höga inre friktionen hos molekyler har viskösa vätskor ett mycket långsamt flödesbeteende och pipettering måste göras mycket långsamt och försiktigt. Omvänd pipetteringsteknik räcker ofta inte för exakt vätskeöverföring och många människor väger sina prover. Denna strategi innebär också att man tar hänsyn till vätskans densitet samt laboratorieförhållandena som fuktighet och temperatur för att exakt beräkna den nödvändiga vätskevolymen i vikt. Därför rekommenderas andra pipetteringsverktyg, så kallade positiva förskjutningsverktyg. Dessa har en spets med integrerad kolv, precis som en spruta. Därför kan vätska lättare aspireras och dispenseras samtidigt som noggrann vätskeöverföring ges. En speciell teknik är inte nödvändig.
Ändå når även verktyg för positiv förskjutning en gräns med mycket trögflytande lösningar som flytande honung, hudkräm eller vissa mekaniska oljor. Dessa mycket krävande vätskor behöver ytterligare ett specialverktyg som också använder den positiva förskjutningsprincipen men som dessutom har en optimerad design för att hantera högviskösa lösningar. Detta specialverktyg har jämförts med befintliga positiva förskjutningsspetsar för att få en tröskel vid vilken det är viktigt att byta från en normal dispenseringsspets till en speciell spets för högviskösa lösningar. Det visades att noggrannheten ökar och de krafter som behövs för aspiration och dispensering minskar när man använder en speciell spets för högviskösa vätskor. För ytterligare detaljerad information och vätskeexempel, ladda ner Applicaton Note 376 om optimerad prestanda för högviskösa vätskor.
Posttid: 2023-jan-23