Hur man väljer rätt kryogen förvaringsflaska för ditt laboratorium

Vad är kryovialer?

Kryogena förvaringsflaskorär små, lockade och cylindriska behållare utformade för att lagra och bevara prover vid ultralåga temperaturer. Även om dessa flaskor traditionellt har tillverkats av glas, är de nu mycket vanligare gjorda av polypropen av bekvämlighets- och kostnadsskäl. Kryovialer har noggrant designats för att motstå temperaturer så låga som -196 ℃ och för att rymma en mängd olika celltyper. Dessa varierar från diagnostiserade stamceller, mikroorganismer, primärceller till etablerade cellinjer. Utöver det kan det också finnas små flercelliga organismer som lagras inutikryogena förvaringsflaskor, såväl som nukleinsyra och proteiner som behöver lagras vid kryogena lagringstemperaturnivåer.

Kryogena förvaringsflaskor finns i olika former, och att hitta rätt typ som uppfyller alla dina behov kommer att säkerställa att du bibehåller provets integritet utan att betala för mycket. Läs igenom vår artikel för att lära dig mer om de viktigaste köpövervägandena när du väljer rätt kryovial för din laboratorieapplikation.

Egenskaper för kryogen flaska att överväga

Externa vs interna trådar

Människor gör ofta detta val baserat på personliga preferenser, men det finns faktiskt viktiga funktionella skillnader att överväga mellan de två typerna av tråd.

Många laboratorier väljer ofta invändigt gängade flaskor för att minimera lagringsutrymmet för att möjliggöra en bättre passform i frysboxar. Trots detta kan du överväga att det externt gängade alternativet är det bättre alternativet för dig. De anses ha en lägre risk för kontaminering, på grund av designen som gör det ännu svårare för något annat än provet att komma in i flaskan.

Externt gängade flaskor är i allmänhet att föredra för genomiska applikationer, men båda alternativen anses lämpliga för biobanking och andra högkapacitetstillämpningar.

En sista sak att tänka på när det gäller gängning – om ditt laboratorium använder automatisering kan du behöva överväga vilken gänga som kan användas med instrumentgriparna.

Lagringsvolym

Kryogena injektionsflaskor finns i en mängd olika storlekar för att täcka de flesta behov, men oftast sträcker de sig mellan en kapacitet på 1 mL och 5 mL.

Nyckeln är att se till att din kryovial inte är överfylld och att det finns extra utrymme tillgängligt, om provet sväller när det fryser. I praktiken innebär detta att laboratorier väljer 1 ml flaskor när de lagrar prover på 0,5 mL celler suspenderade i kryoskyddsmedel och 2,0 mL flaskor för 1,0 mL prov. Ett annat tips för att inte överfylla dina flaskor är att få dig att använda kryoflaskor med graderade markeringar, vilket kommer att se till att du förhindrar svullnad som kan orsaka sprickbildning eller läckage.

Skruvlock vs Flip Top

Vilken typ av topp du väljer beror främst på om du kommer att använda flytande kväve eller inte. Om du är det, behöver du kryovialer med skruvlock. Detta säkerställer att de inte kan öppnas av misstag på grund av felaktig hantering eller temperaturförändringar. Dessutom möjliggör skruvkork för enklare hämtning från kryogena lådor och effektivare förvaring.

Men om du inte använder flytande kväve och behöver en mer bekväm topp som är lättare att öppna, är en flip top det bättre alternativet. Detta kommer att spara mycket tid eftersom det är mycket lättare att öppna, vilket gör det särskilt användbart i operationer med högre genomströmning och de som använder batchprocesser.

Seal Security

Det bästa sättet att säkerställa en säker försegling är att se till att både din kryovala lock och flaska är tillverkade av samma material. Detta kommer att säkerställa att de krymper och expanderar unisont. Om de är gjorda av olika material, kommer de att krympa och expandera i olika hastigheter när temperaturen ändras, vilket leder till luckor och potentiellt läckage och åtföljande kontaminering.

Vissa företag erbjuder dubbla brickor och flänsar för högsta nivå av provsäkerhet på utvändigt gängade kryovialer. O-ring kryovialer anses vara de mest tillförlitliga för invändigt gängade kryovialer.

Glas vs plast

För säkerhet och bekvämlighet använder många laboratorier nu plast, vanligtvis polypropen, istället för värmeförseglingsbara glasampuller. Glasampuller anses numera vara ett föråldrat val då det under förseglingsprocessen kan uppstå osynliga pinhole-läckor, som när de tinas efter lagring i flytande kväve kan få dem att explodera. De är inte heller lika lämpliga för modern märkningsteknik, vilket är nyckeln till att säkerställa provets spårbarhet.

Självstående kontra rundade bottnar

Kryogena flaskor finns både som fristående med stjärnformad botten, eller som rundad botten. Om du behöver placera dina flaskor på en yta, se till att välja den självstående

Spårbarhet och provspårning

Detta område av kryogen lagring förbises ofta men provspårning och spårbarhet är en avgörande aspekt att överväga. Kryogena prover kan lagras i många år, under vilken tidsperiod personal kan förändras och utan korrekt underhållna register kan de bli oidentifierbara.

Se till att välja flaskor som gör providentifieringen så enkel som möjligt. Saker du bör hålla utkik efter inkluderar:

Stora skrivområden för att registrera tillräckliga detaljer så att register kan hittas om en flaska är placerad på en felaktig plats - vanligtvis är cellidentitet, datum fryst och initialer för den ansvarige personen tillräckliga.

Streckkoder för att underlätta provhantering och spårningssystem

Färgade kepsar

En notering för framtiden – ultrakylbeständiga chips håller på att utvecklas som, när de är monterade i individuella kryovialer, potentiellt kan lagra en detaljerad värmehistorik såväl som detaljerad batchinformation, testresultat och annan relevant kvalitetsdokumentation.

Förutom att ta hänsyn till de olika specifikationerna för flaskor som finns tillgängliga, måste man också tänka på den tekniska processen för lagring av kryoflaskor i flytande kväve.

Förvaringstemperatur

Det finns flera lagringsmetoder för kryogen lagring av prover, var och en arbetar vid en specifik temperatur. Alternativen och temperaturen de arbetar vid inkluderar:

Flytande fas LN2: bibehåll en temperatur på -196℃

Ångfas LN2: kan fungera vid specifika temperaturintervall mellan -135°C och -190°C beroende på modell.

Kväveångfrysar: -20°C till -150°C

Typen av celler som lagras och en forskares föredragna lagringsmetod kommer att avgöra vilket av de tre tillgängliga alternativen ditt laboratorium använder.

På grund av de extremt låga temperaturerna som används kommer dock inte alla rör eller konstruktioner att vara lämpliga eller säkra. Material kan bli extremt spröda vid extremt låga temperaturer. Användning av en flaska som inte är lämplig för användning vid din valda temperatur kan göra att kärlet splittras eller spricker under lagring eller upptining.

Kontrollera noggrant tillverkarnas rekommendationer om korrekt användning eftersom vissa kryogena flaskor är lämpliga för temperaturer så låga som -175°C, vissa -150°C andra bara 80°C.

Det är också värt att notera att många tillverkare uppger att deras kryogena flaskor inte är lämpliga för nedsänkning i flytande fas. Om dessa flaskor förvaras i vätskefasen när de återgår till rumstemperatur kan dessa flaskor eller deras lockförslutningar spricka på grund av en snabb uppbyggnad av tryck orsakad av små läckor.

Om celler ska lagras i flytande kvävefas, överväg att lagra celler i lämpliga kryogena flaskor värmeförseglade i cryoflex-slangar eller lagra celler i glasampuller som är hermetiskt stängda.