Mikropipetten är förmodligen det mest använda verktyget i laboratoriet. De används av forskare inom ett brett spektrum av sektorer, inklusive akademi, sjukhus och kriminaltekniska laboratorier samt läkemedels- och vaccinutveckling för att överföra exakta, mycket små mängder vätska
Även om det kan vara irriterande och frustrerande att upptäcka luftbubblor i engångspipettspetsen om de inte upptäcks eller ignoreras, kan det ha en enorm inverkan på resultatens tillförlitlighet och reproducerbarhet.
Den goda nyheten är att det finns några enkla åtgärder du kan vidta för att förhindra luftbubblor och förbättra laboratorieeffektiviteten, operatörens tillfredsställelse samt noggrannheten och precisionen i resultaten.
Nedan undersöker vi konsekvensen av att få en luftbubbla i din pipettspets och vad du ska göra härnäst.
Konsekvensen av bubblor iPipett Tips
Även om du använder de mest exakta, förstklassiga, väl underhållna, servade och kalibrerade pipetterna kan tillförlitligheten av dina resultat påverkas av labbfel. När bubblor kommer in idricksdet kan ha flera utfall.
● När användaren upptäcker luftbubblan måste de ägna tid åt att dispensera den aspirerade vätskan på lämpligt sätt, mata ut spetsen och starta processen igen.
● Oupptäckta luftbubblor kan resultera i låg volymöverföring, vilket förändrar koncentrationen av reaktionsblandningar, vilket leder till misslyckade experiment och tvivelaktiga eller opålitliga resultat.
Dessa utfall kan få flera konsekvenser (1).
● Minskad laboratorieeffektivitet – Tester och analyser måste upprepas, vilket medför arbets- och materialkostnader, vilket kan vara ganska betydande.
● Tveksamma eller felaktiga testresultat – Om felaktiga resultat släpps kan det få allvarligare konsekvenser inklusive feldiagnostik och dåliga patientresultat.
● Återtagande av manuskript från tidskrifter – Om kamrater misslyckas med att replikera dina resultat på grund av luftbubblor som orsakar felaktiga resultat kan uppsatser dras tillbaka.
Bästa metoder för att förhindra luftbubblor
I de flesta fall orsakas luftbubblor i pipettspetsarna av operatörsfel. Dålig teknik på grund av otillräcklig träning eller trötthet är vanligtvis det underliggande problemet.
Pipettering är en skicklig operation som kräver 110 % uppmärksamhet, ordentlig träning och övning för att uppnå konsekventa och exakta resultat.
Även om det finns flera saker du kan göra för att minska allmänna pipetteringsfel, har vi nedan lyft fram några bästa praxis som kan användas för att undvika luftbubblor ipipettspetsar.
Förbättra användartekniken
Pipettera långsamt
Om kolven släpps för snabbt vid aspiration kan luftbubblor införas i spetsen. Detta kan vara särskilt problematiskt vid överföring av trögflytande vätskor. En liknande effekt kan uppstå om kolven släpps för snabbt efter dispensering.
För att undvika luftbubblor vid aspiration, var noga med att manövrera kolven på manuella pipetter på ett jämnt och regelbundet sätt, med konstant kraft.
Använd det korrekta nedsänkningsdjupet
Om pipettspetsen inte sänks ned tillräckligt djupt under menisken på vätskebehållaren kan det leda till att luft sugs upp och därmed bubblor bildas.
Men om du sänker ned spetsen för djupt kan det suga upp mer vätska på grund av ökat tryck eller droppar kan förekomma på utsidan av spetsen, så det är viktigt att sänka ner spetsenpipettspetstill rätt djup.
Det rekommenderade djupet varierar mellan pipettstorlek, typ och fabrikat. Även om tillverkarens rekommendationer bör följas, finns här en allmän guide från National Physical Laboratory.
Guide till djup av spetsnedsänkning
Pipettvolym (µl) och nedsänkningsdjup (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1 000: 2 – 4
- 1 000 – 5 000: 2 – 5
Pre-WetPipetttips
Vid pipettering av volymer större än 10 µlpipettspetsarär vanligtvis förvätade genom att fylla dem flera gånger med vätskan som doseras och kasta ut den till avfall för att förbättra noggrannheten.
Underlåtenhet att förväta dem kan resultera i luftbubblor, särskilt när du använder trögflytande eller hydrofoba vätskor. För att undvika luftbubblor, se till att du förväter spetsarna när du pipetterar volym större än 10 µl.
Använd omvänd pipetteringsteknik om så är lämpligt
Viskösa ämnen: Ett vanligt problem vid pipettering av trögflytande ämnen som protein- eller nukleinsyralösningar, glycerol och Tween 20/40/60/80 är den frekventa bildningen av bubblor när den framåtriktade pipeteringstekniken används.
Genom att pipettera långsamt och använda den omvända pipeteringstekniken minskar risken för bubbelbildning vid överföring av viskösa lösningar.
ELISA-teknik
Omvänd pipettering rekommenderas också vid pipettering av små volymerMikrotestplattor med 96 brunnarför ELISA-tekniker. När luftbubblor dras in i pipetten eller fördelas i brunnar vid tillsats av reagens kan det påverka de optiska densitetsvärdena och resultaten. Omvänd pipettering rekommenderas för att minimera eller eliminera detta problem.
Använd ergonomiska pipetter
Pipetter i gammal stil som inte har designats med ergonomi i åtanke kräver mer fysisk ansträngning, du blir trött och din pipetteringsteknik blir slarvig och dålig. Fel som nämnts ovan, såsom snabb frigöring av kolven kan förekomma oftare.
Genom att investera i en mer ergonomisk lösning kommer du att kunna bibehålla utmärkt teknik och förhindra bildning av luftbubblor på grund av dålig teknik.
Ta dig tid att utbilda personalen
Regelbunden utbildning och utvärdering av personal i pipetteringsmetoder kan säkerställa att operatörsfel och luftbubblor minskar.
Överväg fler automatiserade lösningar
Som nämnts ovan orsakas de flesta luftbubblor av operatören. Det kan vara möjligt att minska operatörens fel och komfort genom att använda elektroniska pipetter eller en flexibel vätskehanteringsplattform som t.exAgilent Bravo vätskehanteringsrobot.
Använd bra kvalitetPipetttips
Mikropipetter köps vanligtvis med försiktighet, men ofta tänker man lite på kvaliteten på engångspipettspetsen. På grund av det inflytande som en spets har på pipetteringsresultaten, kräver standarden ISO 8655 en extra kalibrering om pipetter och spetsar från olika tillverkare används.
Detta kan bero på att många billiga spetsar kan se bra ut från början, men när du studerar dem noggrant kan de ha blixtar, utsprång, repor och luftbubblor, eller vara böjda eller innehålla föroreningar.
Att köpa spetsar av god kvalitet av högkvalitativ polypropen kan minska förekomsten av luftbubblor.
Att avsluta
Att få luftbubblor i din pipettspets har en inverkan på labbets effektivitet samt felaktigheter och oprecisioner i resultaten. Vi har noterat flera saker du kan göra för att undvika att luftbubblor kommer in ipipettspets.
Men om dålig kvalitetpipettspetsarorsakar att luftbubblor kommer in i din pipettspets, kommer du att bli glad att veta att vår universella passformpipettspetsarär gjorda enligt högsta standard och är gjorda av förstklassig ren polypropen.
Suzhou Ace Biomedicinskt företagproducera högkvalitativa 10,20,50,100,200,300,1000 och 1250 µL volymer universella pipettspetsar, 96 spetsar/ställ. Exceptionell hållbarhet – alla ACE-spetsställ klarar kraven för användning med flerkanalspipetter. Steril, filter, RNase-/DNas-fri och icke-pyrogen.
Välkommen att fråga oss för mer information.
Posttid: 2022-12-29