CryovialsAnu umum ogé ngagunakeun garis cisogenik sareng bahan biologis anu kritis, di cewars anu ngeusi nitrogén cair.

Dupi sababaraha bintonan aub dina perestarian anu suksés sél sél dina nitrogén cair. Sedengkeun prinsip dasar mangrupikeun beku anu laun, téknik pasti padamelan gumantung kana jinis sél sareng kropoprotektant anu dianggo. Aya sababaraha pertimbangan kaamanan sareng praktak pangalusna pikeun nyandak kana nyimpen sél dina suhu panas sapertos kitu.

Tulisan ieu nunjukkeun masihan gambaran kumaha kritikut disimpen dina nitrogén cair.

Naon cryovials

Comovials leutik, vial anu ditingkatkeun kanggo nyimpen conto cairan dina suhu pisan rendah pisan. Aranjeunna mastikeun yén sél anu dilestarikan dina kémoproténsi anu henteu dugi ka kontak langsung kalayan nitrogén cair, ngamirtruk résiko sélular bari kéngingkeun tina nitrat cair.

Jarutan biasana sayogi dina sajumlah jilid sareng desain - aranjeunna tiasa sacara internal atanapi externals benang sareng handapeun datar atanapi bunder. Sacara steril sareng non-steril ogé sayogi.

Anu ngagunakeunSlovovialsPikeun nyimpen sél di nitrogén cair

Jangka NHS sareng heroator swasta, ogé lembaga paneliti khusus di bank pangbompos getih, Fat Biasa sareng Bonténg sareng Batos Biryovly.

Suhu anu dilestarikan ku cara kieu 2. Tél B sareng Sél, sél, sél hematisopoik sareng sél ékstrési, sél ponosin sareng sél batang, tulang pésipis sareng sél batang sareng sél pangkal sareng sél batang, tulang pésipis sareng sél batang sareng sél pangkal sareng sél pembengian spursetotes, sél anu berlorcentes, sél pangkal sareng sél sirubipotes, sél pésipis sareng sél batang sareng sél akar anu berloryces, sél pegatipotes, sél pangkal sareng sél batang, tulang pésipis sareng sél batang sareng sél pangkal sareng sél pembengian spésipasi, sél pésipis sareng sél batang sareng sél pangkal.

Itungan kumaha nyimpen cryovials dina nitrogén cair

Nampi Ericoptencle mangrupikeun prosés anu ngonsféksi sél sareng konstruk biologis sanésna ku cék panonpoé dugi ka suhu pisan. Sél anu tiasa disimpen dina nitrogén labu salami taun-kaleungitan daya maju sél. Ieu mangrupikeun garis prosedur padamelan.

Persiapan sél

Kentang leres kanggo nyiapkeun conto kompon bakal beda-beda gumantung kana tipeu sél chat, tapi sacara umum, sél dikumpulkeun sareng casrargugned. Pellet ieu teras dibenerkeun dina supernatant dicampur sareng ceurik.

Sedeng counopresiver

Medek ieu padamelan kanggo ngawétkeun sél dina lingkungan rendah-suhu aranjeunna bakal syarat ku ngahambat formasi sareng mopsikular maot. Kelangna aya pikeun nyayogikeun lingkungan anu aman, pelinduran pikeun sél sareng jaringan salami teu katirisan, panyimpen, sareng prosés taneuh.

Awas sapertos plasma seger sacara seger (FFP), solusi plasmaltive atanapi fras-gratis, solusi anu komponén dicampurkeun ku ketapopromide. Atanapi glikyon.

Parkled parked parlet anu dikirangan nyaéta aliriSawhou Ache Viebics Viers Cikalik.

Senting henteu ngala oléhoval A sabab ieu bakal nambahan résiko root sareng kamungkinan eusina (1).

Laju beku dikontrol

Sacara umum, tingkat bebas galut anu dikawasa kanggo crordoprantasi anu suksés dina sél sél.

Saatos conto aljiksed jadi lolar cliisogenik, aranjeunna disimpen dina és gugur atanapi dina kulkas 4 ℃abe sareng prosedur katirisan dimimitian dina 5 menit. Salaku pituduh umum, sél anu leuwih tiis dina laju -1 ka -3 per menit (2). Ieu kahontal nganggo cooler anu tiasa dianggo atanapi ku nempatkeun saham dina kotak anu insulated dina A -70 ° C On90 ° Comupled comkledy latihan.

Mindahkeun ka nitrogén cair

Bawang kronogenik beku saterusna teras dialihkeun ka tancat nitrogén cair pikeun période anu teu ditangtukeun dina suhu kurang ti -135 ℃ dijaga.

Suhu rendah ieu-handap tiasa diala ku sanggup cair tina rogogen haseup.

Fase cairan atanapi uap?

Panyimpenan nitrogén cair pikeun ngajaga suhu anu tiis ku konsistensi mutlak, tapi sering disarankeun pikeun alesan di handap ieu:

• Peryogikeun pikeun volume ageung (jero) nitrogén cair anu bahaya anu bahaya. Kaduruk atanapi asphypiilasi kusabab ieu mangrupikeun résiko nyata.
• Kasus dokumed kontén-kontaminasi ku agén tepa sapertos AsperGillus, HO B sareng nyebarkeun viral cair (2,3)
• Poténsial cair Nalika dipiceun tina tempat neundeun sareng parawa kana suhu kamar, nitrogén gancang ngahasilkeun. Akibatna, palaku na tiasa ngudag-usik tina panyumputan nitrogén cair, nyiptakeun bahaya anu mabur ti lebu sareng paparan kana eusi (1, 1, 1, 1).

Pikeun alesan ieu, neundeun sistem rendah ultra anu paling sering aya tina uap nitrogén. Nalika Cabtip kedah disimpen dina fase cairan, tabung cryofilator khusus kedah dianggo.

Rowloid kana fis uap nyaéta gred hawa nangtung tiasa lumangsung dina turunna suhu antara -135 ℃ sareng -190 ℃190 ℃. Ieu ngabutuhkeun aditif sareng Diles tina tingkat nitrogén cair sareng variasi suhu (5).

Seueur produsén nyarankeun yén cryovalial cocog pikeun disimpen ka -P35 ℃ atanapi kanggo dianggo dina fase uap ngan ukur.

Thawing sél ceurik anjeun

Prosedur anu ngalelepkeun strawap kanggo budaya beku, sareng téspon sareng pangémbutan sareng panangan anu aya pikeun mastikeun pangroabilitas opti, pamulihan, sareng fungsionalitas sél. Protokol pamirsa pasti gumantung kana jenis sél khusus. Tapi, thuli gancang dianggap standar ka:

• Turunkeun dampak kana pamulihan sélulér
• Bantuan ngirangan waktos paparan kana hadir dina média anu katirisan
• Ngaminimalkeun karusakan ku és recrystalasi

Mandi cai, mandi ngoréng, atanapi alat otomatis khusus anu umum dianggo pikeun montét conto.

Kaseueuran 1 jalur sél diangkat dina hiji waktos pikeun 1-2 menit, ku lembur mandi dina 37 ℃ dugi ka sedilang penjual anu saatos.

Pikeun sababaraha sél sapertos cikal mamalia, pemanasan laun penting pisan pikeun kasalametan.

Sél ayeuna tos siap pikeun budaya sél, musolemen sél, atanapi dina hal batang beusi Haematopoie - panalihan stabil tina sél bobotaan tina donyloablatif.

Éta mangrupikeun prakték normal pikeun nyandak altiquot leutik sampel Prewashed conto anu dianggo pikeun ngalaksanakeun lantungan sél pikeun nangtukeun konsentrasi sél kanggo bajakan dina budaya. Anjeun teras tiasa ngukur hasil prosedur musibina sél sareng nangtukeun daya kompaya sél.

Prakték pangsaéna pikeun neundeun cryovials

Nunggaan anu suksés dina cacad sampel gumantung kana seueur unsur di protokol kaasup neundeun sareng ngarékam tetep.

• Sél antawis antara lokasi panyimpen- Upami misinum ngamungkinkeun, sisipan dina lintahkeun sareng nyimpen aranjeunna di lokasi anu misah pikeun ngurangkeun kamampuan sampel rugi kusabab gagalna alat.
• Nyegah panyerapan cross- Pilih kanggo anu digunakeun dina vial cryiogenik atanapi autocllave sateuacan dianggo salajengna
• Anggo sora anu diciptakeun- Strials datang dina jenis volume antara 1 sareng 5mls. Hindarkeun borang overfilling pikeun ngirangan résiko renget.
• Pilih vial Cryiogenik atanapi ekstrime- VialSs internal ditebak sacara gigir ku sababaraha paguron mangrupi kanggo Ukuran kaamanan - aranjeunna ogé tiasa nyegah kontaminasi salami ngeusian atanapi disimpen dina nitrogén cair.
• Nyegah bocor- Anggo segel anu disuntikkeun BIS-Dibantruk kana Selek-Cap atanapi O-Cincin pikeun nyegah bocor sareng kontaminasi.
• Anggo barcodes 2D sareng labél labél- Pikeun mastikeun kadung, vial sareng daérah tulisan ageung ngaktifkeun unggal vial anu disendung. 2d barcodes tiasa ngabantosan manajemén neundeun sareng ngarékam ngajaga. Kodeu kodeu anu kapaké kanggo idéntitas langkung gampang.
• Pangropéa panyimpanan- Ngajtikeun sél henteu leungit, kapal panyimpen gudang kedah, tingkat suhu sareng tingkat nitrogén cair. Alarem kudu dieusian pikeun nerangkeun pangguna kasalahan.

Pancegahan kaamanan

Grat nitrogén parantos janten prakték umum dina panalungtikan modéren tapi mawa résiko parah serius upami henteu leres.

Palum pelindung pribadi anu ditampilkeun (PPE) kedah hariwang pikeun ngaminimalkeun résiko Synbite, kaduruk sareng kajadian padet anu sanésna nalika nyumput nitrogén cair. Ngagem

• Sarung tangan cryogenik
• Jas laboratorium
• Dampak tahan tameng beungeut lengkep anu ogé nyertakeun beuheung
• Sapatu ditutup-toe
• Salstrroof plastik plastik

Cubuk asam séss kedah disimpen di bursa ogé pikeun ngaminimalkeun résiko rata-rata tina nitrésosa - nguap oksigén atmosfir sami. Tanmat volume ageung kedah gaduh sistem alarem ok oksigén sareng,.

Gawe bareng pasang nalika nanganan grografg cairan mangrupikeun idéal sareng dianggo di luar jam kerja normal kedah dilarang.

Cryovials pikeun ngadukung alur kerja anjeun

Suzhou perusahaan Biomniaquicical nawiskeun pilihan produk anu nyumponan kabutuhan centrashcresi pelet pikeun jinis sél. Portopolio kalebet sajumlah tabu ogé salaku rentang cryovials steril.

Cryovials kami nyaéta:

• Selper Selper Sterce 0.5ml 1.5ML 2.0ml Valogenik Cryhovalic Cryotical Cryotube kalayan gasket

  ● 0.5ml, 1.5ML, spésifikasi 2.0ml, kalayan rok atanapi tanpa rok
  ● desain kongronis atanapi nyalira, steril atanapi henteu steril duanana sayogi
  ● tabung cap scres dilakukeun tina polipropil awak medic
  ● PP cryotubub
  ● Desesén cap éksét luar tiasa ngirangan probabilitas kontaminasi salami perlakuan sampis.
  ● Babak Crackisik Ceurik
  ● tabung pas rotor anu paling umum
  ● tabung chiogenik o-ring cincin pas standar 1 inci sareng 2 inci, 48well, 81well, 96well sareng 100well kotak freaker
  ● Autoclavable ka 121 ° C sareng katirisan ka -86 ° C

  Bag-bagian take	Material	Volume	TopiWarna	PCS /Kantong	Kantong / kasus
  Kalakuan05-bl-n	PP	0.5ml	Hideung, konéng, biru, beureum, ungu, bodas	500	10
  Act15-bl-n	PP	1,5ml	Hideung, konéng, biru, beureum, ungu, bodas	500	10
  Act15-bl-nw	PP	1,5ml	Hideung, konéng, biru, beureum, ungu, bodas	500	10
  Act20-B	PP	2.0ml	Hideung, konéng, biru, beureum, ungu, bodas	500	10