Ho sebetsana le mekhoa ea ts'ebetso ho kenyelletsa ts'ebetso ea bona le ho theoa hape le khang e latelang, ho lumella tšebetso ea nako e telele ea nako e telele - e ikemetseng ea mosebelisi. Maemo a tiisa litholoana tsa boleng bo holimo, le tlhahiso ea bona le tumello ea bona le lipelaelo.
Morero oa (khale) pcr ke moloko oa tšehali ea tšepahalang le e hlahisoang. Bakeng sa likopo tse itseng, tlhahiso eaSehlahisoa sa PRe bohlokoa. Bakeng sa karabelo ena, tlhokomelo e tlameha ho nkuoa ho netefatsa hore disam e sa sireletseha le hore ho beoa ha PCR. Ka ho khetheha, ho fetoleloa hona ho nyenyefatsa kenyelletso e ka lebisang liphellong tse ntle kapa tsa bohata tsa moea kapa esita le ho thibela karabelo ea PRR. Ntle le moo, maemo a hau a ikutloa a tšoana hantle ka hohle kamoo ho ka khonehang sampole ka mong ka mokhoa o mong le o mong o matha le ho fetisetsa karabelo e latelang (ea mokhoa o tšoanang). Sena se bolela sebopeho sa karabelo le mofuta oa taolo ea mocheso ka cycler. Liphoso tsa mosebelisi, ehlile, li lokela ho qojoa ka hohle kamoo ho ka khonehang.
Ka tlaase mona, re tla bontša liphephetso tse fumanoang nakong ea boitokisetso le ho pholletsa le litopollo tsa PCR e teng bakeng sa maemo a liletsa.
Phepelo ea Reaction
Ho bala likarolo tsa karabelo tsa karabelo ho PRSS.
Maemo a karabelo
Tsela e tobileng le e nepahetseng ea likarolo tsa motho ka mong ke ea bohlokoa ha u rera maemo a boitšoaro bo tšoanang ka ho fetisisa. Ntle le mokhoa o motle oa pipetting, o khetha sesebelisoa se nepahetseng se bohlokoa. Pri-remix ea PRS hangata e na le lintho tse ke keng tsa eketsa viscosity kapa u hlahise foam. Nakong ea ts'ebetso ea pipetting, tsena li lebisa ho matla a maholo aMalebela a Pipette, ka hona ho fokotsa ho nepahala ha pipio. Tšebeliso ea litsamaiso tse tsamaisang ka kotloloho kapa malebela a fapaneng a pompo e fokolang ea ho koloba ka ho koloba ho ka ntlafatsa ho nepahala le ho nepahala ha ts'ebetso ea pipetting.
Litšila
Nakong ea ho atoloha, ho aerostels o hlahisoa ka seo, haeba a lumelloa ho fihla kahare ho pipette, a ka se silafatse sampole e 'ngoe ea pitsa. Sena se ka thibeloa ka ho sebelisa malebela a filthara kapa lits'ebetso tse tobileng tsa ho fafatsa.
E fumaneha joalo kaMalebela, likepe le li-plates tse sebelisoang ho Pricfore ha lia lokela ho ba le lintho tseo ho thoeng ke sampole kapa li qaqisa sephetho. Tsena li kenyelletsa DNA, DNOSOS, li tsikipa le li-inhibitors tse ka li keng tsa atisa ho tsoa linthong tse etsahalang nakong ea karabelo - lintho tse tsejoang e le tsona.
Phoso ea mosebelisi
Lipolelo tsa li-disampole tse ling li sebetsoa, e le kotsi e phahameng haholo. E ka etsahala habonolo hoo Sampupo e hlapolotsoeng ka sekepeng se fosahetseng kapa se fosahetseng. Kotsi ena e ka fokotsoa haholo ke ho bolaea liliba habonolo. Ka ho kenella ka methating oa ho apa, "karolo ea motho", ke hore, ho fapana le ho etsa liphoso le ho ba le kahlolo e molemo, haholo ntlheng ea libuka tse nyane tsa karabelo. Sena se hloka lipolanete tse lekaneng boko bo lekaneng bo lekaneng ho ba le mosebetsi oa mosebetsi. Li-Barcode tse khomaretsoeng li fana ka mochini o eketsehileng - ho baballoa ke ho nolofatsa mohlala ho pholletsa le ts'ebetso eohle.
Lenane la Thermocycler
Lenaneo la lisebelisoa le ka beha nako e jang nako le nako le phoso. Taolo e fapaneng ea PCR e fapaneng ea PCR e sebetsa hammoho ho nolofatsa mohato oa ts'ebetso le, ho o etsa hore o bolokehe.
Ts'ebetso e bonolo le tataiso e ntle ea mosebelisi ke motheo oa lenaneo le sebetsang. Moaho ho motheo ona, Tsamaiso ea Setjhame e sirelelitsoeng e tla thibela mananeo a motho ho aphalloa ke basebelisi ba bang. Haeba likamore tse ngata (tsa mofuta o le mong) li sebelisoa, ho molemo ha lenaneo le ka fetisetsoa ka kotloloho sesebelisoa kapa khokahano. Software ea likhomphutha e nolofalletsa li-action tsa Mananeo le polokeho ea li-acces, litokelo tsa mosebelisi le litokomane khomphuteng.
PCR e tsamaisoa
Nakong ea hona joale, DNA e amme sejana sa karabelo, moo sampole e 'ngoe le e' ngoe e lokelang ho etsoa ka mokhoa o tšoanang le o sa fetoheng. Lintlha tse latelang li bohlokoa molemong oa tšebetso:
Taolo ea mocheso
Ho nepahala haholo ho laola mocheso le homogeneity ea block ea cycler ke motheo oa maemo ohle a batho bohle. Boleng bo phahameng ba likarolo tse futhumatsang le tse futhumatsang
Mouoane
Likarolo tsa likarolo tsa karabelo ea motho ka mong ha lia lokela ho fetoha ka lebaka la karabelo ka lebaka la ho fetoha mouoane. Ho seng joalo, ho ka etsahala hore o ka etsahala o monyane haholoSehlahisoa sa PRe kanna ea hlahisoa, kapa ho hang. Ka hona, ho bohlokoa ho fokotsa mouoane ka ho netefatsa tiiso e sireletsehileng. Maemong ana, sekoaelo se futhumetseng sa thermocycler le tiiso ea letsoho la sekepe sa sekepe. Likhetho tse fapaneng tsa ho tiisa li fumaneha bakeng saPRIP PCR (sehokela: Sengoloa se qotsitsoeng), moo tiiso e ntle ka ho fetisisa e fihletsoeng ka mocheso oa mocheso. Ho koaloa ho eketsehileng ho ka boela ha e-ba le tse loketseng, ha feela khatello ea litaba ea Cycler e ka fetoloa tiisong e khethiloeng.
Methapo ea ts'ebetso e sebakeng sa ho sireletsa sephetho se nepahetseng le se hlahisoang halelele. Hona ho kenyelletsa ho boloka lisebelisoa khafetsa ho netefatsa hore e lula e le maemong a sebetsang hantle. Lintho tsohle li lokela ho ba tsa boleng bo phahameng ka ho fetisisa ho lotho tsohle tse hlahisitsoeng, 'me ho fumaneha ka ho ts'epahala ho lokela ho netefatsoa.
Nako ea poso: ho Nov-29-2022