Polymerase chain reactions (PCR) ke o mong oa mekhoa e tsebahalang haholo e sebelisoang lilaboratoring tsa mahlale a bophelo.
Lipoleiti tsa PCR li hlahisoa ho tloha lipolasetiki tsa boemo ba pele bakeng sa ts'ebetso e ntle haholo le tlhahlobo ea lisampole kapa liphetho tse bokeletsoeng.
Li na le marako a masesaane le a homogenous ho fana ka phetiso e nepahetseng ea mocheso.
Ha ho lokisetsoa lits'ebetso tsa nako ea 'nete, karolo ea metsotso ea DNA kapa RNA e behiloe ka thoko ebe e bolokoa lipoleiting tsa PCR.
Lipoleiti tsa PCR li sebetsa hantle haholo ho tiisa mocheso ebile li thibela ho phalla ha mocheso hape.
Leha ho le joalo, joalo ka ha lipoleiti tsa PCR li sebetsa hantle ebile li tšepahala, liphoso le ho se nepahale ha bonolo ha li ntse li sebetsa lisampole.
Ka hona, haeba u thahasella ho fumana boleng bo botle le bo phahamengLipoleiti tsa PCR.Ho loketse ho ikopanya le moetsi oa lipoleiti tsa PCR ea tšepahalang. Ka sena u tiisetsoa ho fumana thekiso e ntle ka ho fetisisa.
Mona ke tse ling tsa litemoso tse lokelang ho lateloa ho qoba tšoaetso ea li-reagents kapa disampole le ho thibela ho se nepahale ho tsoa ho sephetho.
Ho Steriizing The Potoloho
Lintho tse fosahetseng kapa tse mpe li etsahala ka lebaka la ho ba teng ha litšila, e leng se etsang hore u belaelle liphello.
Litšila le litšila li etsahala ka mefuta e fapaneng joalo ka DNA e sa amaneng kapa li-additives tsa lik'hemik'hale tse qetellang li fokotsa katleho le katleho ea karabelo.
Ho na le mekhoa e mengata ea ho fokotsa haholo sekhahla sa tšilafalo ea poleiti ea PCR.
Ho sebelisa malebela a sesefa se hloekisitsoeng ke mokhoa o mong oa bohlokoa oa ho thibela litšila hore li se ke tsa kena lisampoleng tsa hau ka lipeipi.
Fana ka lisebelisoa tse hloekileng ka ho feletseng, tse nang le li-pipette le li-racks, tse sebelisetsoang PCR feela. Sena se tla netefatsa phetisetso e sa tsotelleng ea litšila kapa litšila ho potoloha laboratoring.
Sebelisa li-bleach, ethanol holim'a lipeipi, liraka le libenche ho hlakola litšila.
Beha sebaka se bolokiloeng bakeng sa liketso tsohle tsa hau tsa PCR ho fokotsa ts'oaetso ea likaroloana.
Sebelisa liatlana tse hloekileng mohatong o mong le o mong 'me u li fetole khafetsa.
Lipoleiti tsa PCR
Lekola Boikutlo le Bohloeki ba Template.
Bohloeki ba benche le lisebelisoa tse sebelisoang ha ho hlahlojoa lisampole ka PCR li lokela ho bolokoa. Ho bohlokoa ho netefatsa tekanyo ea bohloeki ba lisampole pele ho tlhahlobo le ho sebetsa.
Ka kakaretso, bahlahlobisisi ba ela hloko boemo ba mahloriso le bohloeki ba lisampole tsa DNA.
Leka tekanyo ea ho monya bakeng sa 260nm/280nm ha ea lokela ho ba ka tlase ho 1.8. Le hoja maqhubu a latelang a pakeng tsa 230nm le 320nm a sebelisoa ho khetholla litšila.
Ka nako e 'ngoe, matsoai a chaotropic le metsoako e meng ea lintho tse phelang e fumanoa ka tekanyo ea 230nm ea ho monya. Le ha ho hlaka ho disampole tsa DNA ho boetse ho fumanwa le ho netefatswa ka lebelo la ho monya la 320nm.
Qoba ho jarisa li-PCR Plates ka sehlahisoa
Joalo ka ha ho lakatseha ho tsamaisa lihlahisoa tse ngata ka nako e le 'ngoe, ho fella ka tšilafalo ea lipoleiti tsa PCR.
Ho jarisa lipoleiti tsa PCR ka litšila tse fapaneng tsa lihlahisoa mme ho etsa hore ho be thata haholo ho fumana lisampole.
Boloka lirekoto tsa Aliquot PCR Reagents
Lipotoloho tse ntseng li tsoela pele tsa ho qhibiliha le ho sebelisoa khafetsa ha aliquot ho ka senya li-reagents tsa PCR, li-enzyme le DNTP's ka ho kopanya hape.
Kamehla leka ho beha leihlo sekhahla sa aliquot se sebelisitsoeng ha u ntse u lokisa lisampole tse tla hlahlojoa.
LIMS e ratoang e loketse haholoanyane ho laola thepa le palo ea li-reagents le lisampole tse hoammeng kapa tse qhibilihisitsoeng.
Khetha Mocheso o Molemo ka ho Fetisisa oa Anealing.
Ho khetha le ho sebelisa mocheso o fosahetseng oa annealing ke mokhoa o mong hape oa hore liphetho tsa PCR li na le phoso.
Ka linako tse ling, karabelo ha e tsamaee joalokaha e reriloe. E lakatseha ho fokotsa mocheso oa annealing e le ho tsamaisa karabelo e atlehileng.
Leha ho le joalo, ho theola mocheso ho eketsa menyetla ea ho ba le maikutlo a fosahetseng le ponahalo ea primer dimers.
Ho bohlokoa ho netefatsa tlhahlobo ea curve e qhibilihang ha u sebelisa lipoleiti tsa PCR kaha ke sesupo se setle sa ho khetha mocheso o nepahetseng.
Lisebelisoa tsa software ea ho qapa ka ho rala, ho fana ka mocheso o nepahetseng o fokotsang liphoso ka kotloloho lipoleiti tsa PCR.
Na U Hloka Letlapa la PCR la boleng bo holimo?
Haeba u ntse u nahana hore na u ka fumana moetsi ea tšepahalang oaLipoleiti tsa PCR. U se ke ua hlola u batla hobane u sebakeng se nepahetseng.
Ka mosatlanya mona ho ikopanya le ronabakeng sa lihlahisoa tsa boleng bo holimo le litšebeletso ka theko e ke keng ea senya banka.
Nako ea poso: Oct-30-2021