Увод
ПЦР плоче, главни производ лабораторије дуги низ година, постају још распрострањенији у модерном окружењу како лабораторије повећавају своју пропусност и све више користе аутоматизацију у оквиру својих токова рада. Постизање ових циљева уз очување тачности и интегритета експеримената може бити тешко. Једна од уобичајених области где се грешке могу увући је заптивањеПЦР плоче, са лошом техником која омогућава испаравање узорака, мењајући пХ и самим тим ометајући ензимске функције и изазивајући контаминацију. Учење како да запечати аПЦР плочаисправно елиминише ове ризике и обезбеђује поновљиве резултате.
Пронађите прави печат за вашу ПЦР плочу
Поклопци плоча наспрам филмских заптивки у односу на поклопце
Цапссу добар начин да запечатите своју плочу чврстим заптивачем, док вам и даље дајете флексибилност да врло лако отпечатите и поново затворите плочу по потреби без икаквог отпада. Међутим, капице имају неколико кључних недостатака.
Прво, мораћете да купите посебну капицу која је компатибилна, што их чини несвестраним. Мораћете да се уверите да поклопац који одаберете одговара плочи, што зависи од њеног произвођача, и да одаберете или куполасту или равну на основу термоциклера који користите.
Друго, наношење капица на плочу може бити веома понављајуће и заморно, са ризиком од унакрсне контаминације ако ставите погрешну капицу на погрешан бунар.
Док су филмске заптивке мање флексибилне у погледу уклањања и замене, оне су веома разноврсне јер ће одговарати било којој врсти ПЦР плоче, без обзира на то ко је произвођач. Могу се једноставно исећи на величину, што их чини веома ефикасним.
Друга опција је поклопац плоче. Они нуде мању заштиту од капица и заптивки и углавном се користе само за краткотрајно покривање како би се спречила контаминација.
Оптичке у односу на фолије од фолије
Било да вам је потребан оптички, провидни печат илифилм од алуминијумске фолиједа запечати вашу плочу одлучује ваш експериментални формат.Оптичке заптивне фолијесу провидни како би вам омогућили да посматрате узорке, а истовремено их штите и спречавају испаравање. Такође су посебно корисни у кПЦР експериментима који укључују високо прецизна мерења флуоресценције директно са плоче, у ком случају ће вам требати заптивни филм који филтрира што је могуће мање флуоресценције. Важно је да се уверите да печат или поклопац који користите има довољно висок ниво оптичке јасноће како бисте били сигурни да су очитавања тачна.
Фолије од фолије су прикладне за све узорке који су осетљиви на светлост или који треба да се чувају на температури испод 80°Ц. Из тог разлога, већина узорака намењених за дуготрајно складиштење захтева фолију. Фолије од фолије се такође могу пробити, што је корисно или за испитивање појединачних бунара или за пренос узорака иглама. Ово се може десити ручно или као део роботске платформе.
Такође узмите у обзир да ће агресивне супстанце које укључују киселине, базе или раствараче захтевати заптивку која може да их издржи, у ком случају је заптивање од фолије вероватно прикладније.
Лепак у односу на филм за заптивање топлотом
Заптивке од лепљивог филмасу веома директне и лако се примењују. Све што вам треба је да корисник нанесе заптивку на плочу и употреби једноставан апликатор да притисне и формира чврсту заптивку.
Топлотне заптивке су напредније, обезбеђујући дуготрајније заптивање које има смањену стопу испаравања у поређењу са конвенционалним лепљивим заптивачима. Ова опција је прикладна ако желите да дуготрајно складиштите узорке, иако то долази са додатним захтевом за опрему за заптивање плоча.
Како запечатити ПЦР плочу
Метода заптивања плоча
Селф-Адхесиве
1. Уверите се да радите на равној и стабилној радној површини
2. Уклоните фолију из паковања и уклоните подлогу
3. Пажљиво ставите заптивку на плочу, пазећи да су сви бунари покривени
4. Користите апликатор да извршите притисак на плочу. Почните са једног краја и прелазите на други, равномерно притискајући
5. Поновите ово више пута
6. Прођите апликатором око спољашњих отвора да бисте били сигурни да су и они добро заптивени.
Хеат Сеалс
Топлотни заптивачи раде тако што се филм отапа на ободу сваког бунара, уз помоћ заптивача плоча. Да бисте користили топлотни заптивач, погледајте упутства произвођача опреме. Уверите се да је произвођач од кога набавите своју опрему реномиран, јер је веома важно да заптивање буде исправно, ефикасно и водонепропусно.
Врхови савети за заптивање плоча
а. Када вршите притисак на заптивку, идите у хоризонталном и вертикалном смеру да бисте обезбедили правилно заптивање
б. Увек је добра пракса да покренете пробни рад шта год да радите, а ово се не разликује од заптивања плоча. Тестирајте са празном плочом пре него што употребите једну са узорцима.
ц. Приликом тестирања, скините заптивку и погледајте да ли је лепак добро залепљен, без празнина. Постоји визуелни приказ овога у првом референтном документу. Ако нисте правилно запечатили плочу, када уклоните заптивку, биће празнина где се лепак није у потпуности везао за плочу.
д. За слање и транспорт узорака, можда ће вам бити од помоћи да поставите пластичну заптивку на врх фолије за додатну заштиту (посебно од пирсинга).
е. Увек водите рачуна да нема неравнина или бора приликом наношења филма – то ће изазвати цурење и испаравање
Време поста: 23.11.2022