Када се пупети за пипетирање од 0,2 до 5 ул, тачност и прецизност пипетирања је од највеће важности, добра техника пипетирања је од суштинске важности јер су грешке у руковању очигледнијим са малим количинама.
Како се више фокуса ставља на смањење реагенса и трошкова, мањих количина су велике потражње, нпр. За припрему ПЦР Мастермик или Ензим реакција. Али пипетирање малих количина од 0,2 - 5 ул поставља нове изазове за тачност и прецизност пипетирања. Следеће тачке су од суштинског значаја:
- Величина пипете и врха: Увек одаберите пипету са најнижим могућим количинама и најмањим савјетом да се ваздушни јастук држи што је мање могуће. Када се пипетира 1 μЛ нпр. Изаберите пипету и усклађујући врх, а не са 1 - 10 μл пипете.
- Калибрација и одржавање: Од суштинског је значаја да се ваше пипете правилно калибришу и одржавају. Мала подешавања и сломљени делови на пипету доводе до масовног повећања систематских и случајних вредности грешака. Калибрација према ИСО 8655 мора се извршити једном годишње.
- Позитивно расељавање пипета: Проверите да ли имате позитивно расељавање пипетом са ниским распоном јачине звука у вашој лабораторији. Генерално, користећи ову врсту пипете доводи до бољег цевовода у погледу тачности и прецизности него са класичним ваздушним пипетама.
- Покушајте да користите веће количине: можете размотрити да разблажите узорак у пипету веће количине са истом количином у коначној реакцији. Ово може смањити грешке у цепетима са врло малим количинама узорака.
Поред доброг алата, истраживач мора имати врло добру технику пипетије. Обратите посебну пажњу на следеће кораке:
- Прилог са врховима: Не заглавите пипету на врх јер то може оштетити крајњи врх, узрокује да се течни сноп преусмера или оштети отвори. Притисак само нанесите само причвршћивање савета и користите пипету са опружним натопљеним конусом.
- Држећи пипету: Не држите пипету у руци док чекате центрифугу, бициклир, итд. Унутрашњост пипете ће се загревати и оловати ваздушни јастук да би се проширио резултирајући одступањима из постављене запремине приликом пипетирања.
- Пре-влажење: влажење ваздуха унутар врха и пипете припрема вршњак за узорак и избегава испаравање када аспирира опреми за пренос.
- Вертикална аспирација: Ово је веома важно приликом руковања малим количинама како би се избегао капиларни ефекат који се појављује када се пипета држи под углом.
- Дубина уроњења: уроните врх што је мање могуће како би се спречило течност која уђе у савет због капиларног ефекта. Правило палца: Мањи врх и запремина, нижа дубина урањања. Препоручујемо максимално 2 мм када се пипетирајуће мале количине.
- Одобрење на 45 ° угао: Оптималан проток течности је загарантован када се пипета држи на углу од 45 °.
- Контакт до зида посуде или течности: Мала количина се може правилно давати само када се врх држи на зиду посуде или уроњен у течност. Чак и последња пад са врха може се прецизно доставити.
- Издубит: Издување је обавезно након изопачења мале количине да би се исказали чак и последњу капљицу течности присутне у врсту. Износ се такође треба извести на зид посуде. Пазите да не донесете мехуриће ваздуха у узорак приликом извођења пухања на површини течности.
Вријеме поште: 18. фебруара