5 једноставних савета за спречавање грешака при раду са ПЦР плочама

Ланчане реакције полимеразе (ПЦР) су једна од широко познатих метода које се користе у лабораторијама природних наука.

ПЦР плоче се производе од првокласне пластике за одличну обраду и анализу узорака или прикупљених резултата.

Имају танке и хомогене зидове који обезбеђују прецизан топлотни пренос.

У припреми за апликације у реалном времену, минутни делови ДНК или РНК се издвајају и чувају у ПЦР плочама.

ПЦР плоче су веома ефикасне у топлотном заваривању и такође ограничавају проток топлоте.

Међутим, колико су ПЦР плоче ефикасне и поуздане, грешке и непрецизности се лако повлаче током обраде узорака.

Стога, ако сте заинтересовани да добијете добар и квалитетанПЦР плоче.Идеално је контактирати поузданог произвођача ПЦР плоча. Са овим сте сигурни да ћете добити најбољу понуду.

Ево неколико мера предострожности које треба следити да бисте избегли контаминацију реагенса или узорака и спречили да се нетачности увуку у резултате.

Стерилизација околине
Нетачни позитиви или негативи се јављају због присуства нечистоћа, због чега сумњате у резултате.

Нечистоће и загађивачи се јављају у различитим облицима као што су неповезана ДНК или хемијски адитиви који на крају смањују ефикасност и ефективност реакције.

Постоје бројни начини да се у великој мери смањи стопа контаминације ПЦР плоче.

Коришћење стерилизованих врхова филтера је још један користан начин да спречите да нечистоће уђу у ваше узорке кроз пипете.

Посветите потпуно чист сет опреме, који се састоји од пипета и носача, искључиво за употребу ПЦР. Ово ће гарантовати занемарљив пренос нечистоћа или загађивача око лабораторије.

Користите избељиваче, етанол на пипетама, полицама и клупама да обришете загађиваче.

Одредите резервисани простор за све ваше ПЦР реакције како бисте даље минимизирали контаминацију честицама.

Користите чисте рукавице на сваком кораку и често их мењајте.

ПЦР плоче
Проверите концентрацију и чистоћу шаблона.
Треба одржавати чистоћу стола и опреме која се користи приликом анализе узорака помоћу ПЦР-а. Неопходно је потврдити степен чистоће узорака пре анализе и обраде.

Генерално, анализатори узимају у обзир концентрацију и ниво чистоће ДНК узорака.

Настојте да однос апсорбанције за 260нм/280нм не сме бити мањи од 1,8. Док се накнадне таласне дужине између 230нм и 320нм користе за идентификацију нечистоћа.

На пример, хаотропне соли и друга органска једињења се детектују при брзини апсорпције од 230 нм. Док се замућеност у ДНК узорцима такође детектује и верификује при стопи апсорпције од 320 нм.

Избегавајте преоптерећење ПЦР плоча са производом
Колико год се желело истовремено покренути више производа, то доводи до унакрсне контаминације ПЦР плоча.

Преоптерећење ПЦР плоча различитим производима отпада и чини изузетно тешким утврђивање узорака.

Чувајте евиденцију аликвота ПЦР реагенса
Континуирани циклуси замрзавања/одмрзавања и честа употреба аликвота могу оштетити ПЦР реагенсе, ензиме и ДНТП кроз рекристализацију.

Увек настојте да пратите количину аликвота који се користи док припремате узорке за анализу.

Пожељни ЛИМС је погоднији за контролу инвентара и количине замрзнутих или одмрзнутих реагенаса и узорака.

Изаберите најбољу температуру жарења.
Одабир и коришћење погрешне температуре жарења је још један метод који ПЦР резултати садрже грешку.

Понекад реакција не иде по плану. Пожељно је смањити температуру жарења како би се олакшала успешна реакција.

Међутим, снижавање температуре повећава шансе за лажне позитивне резултате и појаву димера прајмера.

Значајно је потврдити анализу криве топљења када се користе ПЦР плоче јер је то добар показатељ одабира исправне температуре жарења.

Софтвер за дизајн прајмера помаже у пројектовању, обезбеђивање праве температуре жарења уз директно смањење грешке у ПЦР плочама.

Потребна вам је висококвалитетна ПЦР плоча?
У случају да сте размишљали где да пронађете поузданог произвођачаПЦР плоче. Не тражите више јер сте на правом месту.

Љубазнокликните овде да бисте нас контактирализа производе и услуге високог квалитета по цени која неће сломити банку.


Време поста: 30.10.2021