Si të vulosni një pllakë PCR

Hyrje


Pllakat PCR, një element kryesor i laboratorit për shumë vite, po bëhen edhe më të përhapur në mjedisin modern pasi laboratorët rritin kapacitetin e tyre dhe përdorin gjithnjë e më shumë automatizimin brenda flukseve të tyre të punës. Arritja e këtyre objektivave duke ruajtur saktësinë dhe integritetin e eksperimenteve mund të jetë e vështirë. Një nga fushat e zakonshme ku gabimet mund të zvarriten është vulosja ePllakat PCR, me teknikë të dobët që lejon avullimin e mostrave, duke ndryshuar pH dhe për rrjedhojë duke prishur funksionet enzimatike dhe duke shkaktuar ndotje. Mësoni se si të vulosni njëPllakë PCReliminon saktë këto rreziqe dhe siguron rezultate të riprodhueshme.

 

Gjeni vulën e duhur për pllakën tuaj PCR


Kapakët e pllakave kundrejt vulave të filmit kundrejt kapakëve
Kapeletjanë një mënyrë e mirë për të vulosur pjatën tuaj me një vulë të ngushtë, ndërkohë që ju japin ende fleksibilitetin për ta zhbllokuar dhe rimbyllur shumë lehtë pjatën sipas nevojës pa mbeturina. Sidoqoftë, kapakët kanë disa të meta kryesore.

Së pari, do t'ju duhet të blini kapakun specifik që është i pajtueshëm, gjë që i bën ata të mos jenë të gjithanshëm. Duhet të siguroheni që kapaku që zgjidhni t'i përshtatet pllakës, e cila varet nga prodhuesi i saj, dhe të zgjidhni ose me kube ose të sheshtë bazuar në termocikletën që po përdorni.

Së dyti, vendosja e tapave në pjatë mund të jetë shumë e përsëritur dhe e lodhshme, me rrezikun e kontaminimit të kryqëzuar nëse vendosni kapakun e gabuar në pusin e gabuar.

Ndërsa vulat e filmit janë më pak fleksibël për sa i përket heqjes dhe zëvendësimit, ato janë shumë të gjithanshme pasi përshtaten me çdo lloj pllake PCR, pa marrë parasysh se kush është prodhuesi. Ato thjesht mund të priten në madhësi, duke i bërë ato shumë efektive.

Një tjetër opsion është një kapak pjate. Këto ofrojnë më pak mbrojtje se kapaku dhe mbyllja, dhe përdoren kryesisht vetëm për mbulim afatshkurtër për të parandaluar kontaminimin.

 

Vula optike kundër filmit me fletë metalike


Nëse keni nevojë për një vulë optike, të pastër ose njëfilm me letër aluminipër të vulosur pjatën tuaj vendoset nga formati juaj eksperimental.Filma vulosje optikejanë transparente për t'ju lejuar të vëzhgoni mostrat, duke i mbrojtur ato dhe duke parandaluar avullimin. Ato janë gjithashtu veçanërisht të dobishme në eksperimentet qPCR të cilat përfshijnë matjet shumë të sakta të fluoreshencës direkt nga pllaka, në të cilin rast do t'ju duhet një film mbyllës që filtron sa më pak fluoreshencë. Është e rëndësishme të siguroheni që vula ose kapaku që po përdorni të ketë një nivel mjaft të lartë të qartësisë optike për të siguruar që leximet janë të sakta.

Filmat me fletë metalike janë të përshtatshme për çdo mostër që është e ndjeshme ndaj dritës ose që duhet të ruhet në një temperaturë nën 80°C. Për këtë arsye, shumica e mostrave të destinuara për ruajtje afatgjatë do të kërkojnë një film me fletë metalike. Filmat me fletë metalike janë gjithashtu të shpuar, gjë që është e dobishme ose për ekzaminimin e puseve individuale, ose për transferimin e mostrave me gjilpëra. Kjo mund të ndodhë me dorë ose si pjesë e një platforme robotike.

Konsideroni gjithashtu se substancat agresive që përfshijnë acide, baza ose tretës do të kërkojnë një vulë që mund t'i rezistojë atyre, në të cilin rast një vulë me folie ka të ngjarë më e përshtatshme.

 

Film ngjitës kundër vulosjes me nxehtësi
Vula me film ngjitësjanë shumë të drejtpërdrejta dhe të lehta për tu aplikuar. Gjithçka që ju nevojitet është që një përdorues të vendosë vulën në pjatë dhe të përdorë një mjet të thjeshtë aplikues për të shtypur poshtë dhe për të formuar një vulë të ngushtë.

Mbylljet e nxehtësisë janë më të avancuara, duke siguruar një mbyllje më të qëndrueshme që ka reduktuar shkallën e avullimit në krahasim me një vulë ngjitëse konvencionale. Ky opsion është i përshtatshëm nëse kërkoni të ruani mostrat për një kohë të gjatë, megjithëse kjo vjen me një kërkesë shtesë për pajisjet e vulosjes së pllakave.

 

Si të vulosni një pllakë PCR

 

Metoda e vulosjes së pllakave


Vetëngjitëse

1. Sigurohuni që jeni duke punuar në një sipërfaqe pune të sheshtë dhe të qëndrueshme

2. Hiqeni filmin nga paketimi i tij dhe hiqni suportin

3. Vendoseni me kujdes vulën në pjatë, ndërkohë që sigurohuni që të gjitha puset të jenë të mbuluara

4. Përdorni një mjet aplikues për të ushtruar presion në të gjithë pllakën. Filloni nga një skaj dhe kaloni në tjetrin, duke shtypur në mënyrë të barabartë

5. Përsëriteni këtë shumë herë

6. Vëreni aplikuesin rreth puseve të jashtme, për t'u siguruar që edhe këto të jenë të mbyllura siç duhet.

 

Vula me nxehtësi

Vulosja e nxehtësisë funksionon duke shkrirë filmin në buzë të çdo pusi, me ndihmën e një vulosjeje pjate. Për të përdorur një izolues nxehtësie, referojuni udhëzimeve të dhëna nga prodhuesi i pajisjes. Sigurohuni që prodhuesi nga i cili merrni pajisjet tuaja të jetë me reputacion, pasi është shumë e rëndësishme që vula të jetë e duhur, efektive dhe e papërshkueshme nga uji.

 

Këshilla të sipërme për mbylljen e pllakave


a. Kur ushtroni presion në vulë, shkoni në drejtimet horizontale dhe vertikale për të siguruar një vulosje të duhur

b. Është gjithmonë praktikë e mirë të kryeni një provë të çdo gjëje që po bëni, dhe kjo nuk ndryshon me vulosjen e pllakave. Provoni me një pjatë të zbrazët përpara se të përdorni një me mostra.

c. Gjatë testimit, hiqni vulën dhe shikoni që ngjitësi është ngjitur siç duhet, pa boshllëqe. Ekziston një paraqitje vizuale e kësaj në dokumentin e parë të referencës. Nëse nuk e keni mbyllur pjatën siç duhet, kur të hiqni vulën do të ketë boshllëqe ku ngjitësi nuk është ngjitur plotësisht me pllakën.

d. Për dërgimin dhe transportimin e mostrave, mund të gjeni se është e dobishme të aplikoni një vulë plastike në majë të vulës së fletës për mbrojtje shtesë (veçanërisht nga shpimi).

e. Gjithmonë sigurohuni që të mos ketë gunga ose rrudha kur aplikoni filmin - këto do të shkaktojnë rrjedhje dhe avullim


Koha e postimit: Nëntor-23-2022