Si të pipetoni vëllime të vogla me pipeta manuale manuale

Ndërsa më shumë përqendrim është duke u vendosur në uljen e reagentëve dhe kostove, vëllimet më të vogla janë në kërkesë të lartë, p.sh., për përgatitjen e PCR Mastermix ose reaksioneve të enzimës. Por pipetimi i vëllimeve të vogla nga 0.2 - 5 μl vendos sfida të reja për saktësinë dhe saktësinë e tubacionit. Pikat e mëposhtme janë thelbësore:

1. Pipeti dhe madhësia e majës: Gjithmonë zgjidhni pipetin me vëllimin më të ulët nominal të mundshëm dhe majën më të vogël për të mbajtur jastëkun e ajrit sa më të vogël të jetë e mundur. Kur pipetoni 1 μL p.sh., zgjidhni një pipetë 0.25 - 2.5 μL dhe majë përputhen sesa një pipetë 1 - 10 μL.
2. Kalibrimi dhe mirëmbajtja: isshtë thelbësore që pipetët tuaj të kalibrohen dhe mirëmbahen siç duhet. Rregullimet e vogla dhe pjesët e thyera në një pipetë çojnë në një rritje masive të vlerave sistematike dhe të rastësishme të gabimit. Një kalibrim sipas ISO 8655 duhet të kryhet një herë në vit.
3. Pipetet e zhvendosjes pozitive: Kontrolloni nëse keni një pipetë zhvendosjeje pozitive me një varg vëllimi të ulët në laboratorin tuaj. Në përgjithësi, përdorimi i këtij lloji të pipetës çon në një rezultat më të mirë të tubacionit për sa i përket saktësisë dhe saktësisë sesa me pipetet klasike të jastëkut të ajrit.
4. Mundohuni të përdorni vëllime më të mëdha: Ju mund të merrni parasysh hollimin e mostrës tuaj në pipetë vëllime më të mëdha me të njëjtën sasi në reagimin përfundimtar. Kjo mund të zvogëlojë gabimet e tubacionit me vëllime shumë të vogla të mostrës.

Përveç një mjeti të mirë, studiuesi duhet të ketë një teknikë shumë të mirë të tubave. Kushtojini vëmendje të veçantë hapave të mëposhtëm:

1. Shtojca e majës: Mos e bllokoni pipetë në majë pasi kjo mund të dëmtojë fundin e majës së mirë, shkaku që rrezja e lëngshme të ridrejtohet ose të dëmtojë gojën. Aplikoni vetëm presionin e dritës kur bashkoni një majë dhe përdorni një pipetë me një kon të tipit të ngarkuar pranverën.
2. Mbajtja e pipetës: Mos e mbani pipetin në dorën tuaj ndërsa prisni centrifugën, ciklin, etj. Brenda e pipetës do të nxehet dhe do të çojë jastëkun e ajrit për të zgjeruar duke rezultuar në devijime nga vëllimi i caktuar kur pipeton.
3. Para-lagështia: Humidifikimi i ajrit brenda majës dhe pipetës përgatit majën për mostrën dhe shmang avullimin kur aspiron vëllimin e transferimit.
4. Aspirata vertikale: Kjo është shumë e rëndësishme kur merreni me vëllime të vogla për të shmangur efektin kapilar që ndodh kur pipeta mbahet në një kënd.
5. Thellësia e zhytjes: Zhyt majën sa më pak të jetë e mundur për të parandaluar që lëngu të hyjë në majë për shkak të efektit kapilar. Rregulli i gishtit të madh: Sa më i vogël të jetë maja dhe vëllimi, aq më i ulët është thellësia e zhytjes. Ne ju rekomandojmë një maksimum prej 2 mm kur tuboni vëllime të vogla.
6. Shpërndarja në këndin 45 °: Rrjedhja optimale e lëngut garantohet kur pipeta mbahet në një kënd prej 45 °.
7. Kontakti në murin e anijes ose sipërfaqen e lëngshme: Vëllime të vogla mund të shpërndahen siç duhet vetëm kur maja mbahet kundër murit të anijes, ose zhytur në lëng. Edhe rënia e fundit nga maja mund të shpërndahet me saktësi.
8. Goditje: Një goditje e detyrueshme është e detyrueshme pas shpërndarjes së vëllimeve të ulëta për të shpërndarë edhe rënien e fundit të lëngut të pranishëm në majë. Goditja gjithashtu duhet të kryhet kundër murit të anijes. Kini kujdes që të mos sillni flluska ajri në mostër kur kryeni një goditje në sipërfaqen e lëngshme.