Hababka habraacyada waxaa ka mid ah hagaajintooda iyo aasaaskooda xiga iyo iswaafajinta, taasoo u oggolaanaysa waxqabadka ugu wanaagsan ee muddada dheer - ka madax bannaan isticmaalaha. Habayntu waxay hubisaa natiijooyin tayo sare leh, iyo sidoo kale soo saaridooda iyo isbarbardhigga.
Hadafka (classic) PCR waa abuurista natiijo la isku halayn karo oo la soo saari karo. Codsiyada qaarkood, wax-soo-saarkaAlaabta PCRayaa sidoo kale khuseysa. Dareen-celintan, waa in taxaddar la sameeyaa si loo hubiyo in shaybaarrada aan la jabin iyo in socodka shaqada PCR uu ahaado mid deggan. Gaar ahaan, tani waxay u tarjumaysaa yaraynta hordhaca wasakheynta taasoo horseedi karta natiijooyin been abuur ah oo togan ama been ah ama xitaa hor istaagi karta falcelinta PCR. Intaa waxaa dheer, xaaladaha falcelintu waa inay ahaadaan kuwo isku mid ah intii suurtagal ah muunad kasta oo ku guda jirta orod iyo sidoo kale loo wareejin karo falcelinaha xiga (oo isku hab ah). Tani waxay tilmaamaysaa halabuurka falcelinta iyo sidoo kale nooca xakamaynta heerkulka wareegga wareegga. Khaladaadka isticmaalaha, dabcan, waa in laga fogaadaa sida ugu macquulsan.
Hoosta, waxaan ku muujin doonaa caqabadaha la kulma inta lagu jiro diyaarinta iyo inta lagu jiro socodsiinta PCR - iyo hababka xalalka jira ee la xiriira qalabka iyo alaabta loo isticmaalo jaangooyooyinka socodka shaqada PCR.
Diyaarinta falcelinta
Qaybinta qaybaha falcelinta ee maraakiibta PCR, ama taarikada, siday u kala horreeyaan, waxay ka kooban yihiin caqabado badan oo ay tahay in laga gudbo:
Xaaladaha falcelinta
Qiyaasta saxda ah iyo qiyaasta saxda ah ee qaybaha gaarka ah waa lama huraan marka la hiigsanayo xaaladaha falcelinta isku midka ah ee suurtogalka ah. Marka lagu daro farsamada wanaagsan ee tuubooyinka, xulashada qalabka saxda ah waa muhiim. PCR master-mixes inta badan waxaa ku jira walxo kordhiya viscosity ama abuura xumbo. Inta lagu jiro habka dhuumaha, kuwani waxay keenayaan qoyn la taaban karo oo ahtalooyinka pipette, sidaas darteed hoos u dhigidda saxnaanta dhuumaha. Isticmaalka hababka qaybinta tooska ah ama talooyinka pipette kale ee u nugul qoynta waxay hagaajin kartaa saxnaanta iyo saxnaanta habka dhuumaha.
Wasakhowga
Inta lagu jiro habka qaybinta, hawo-mareenada ayaa soo baxaya kuwaas oo, haddii loo ogolaado inay gaaraan gudaha pipette, waxay suurtogal u tahay inay sumeeyaan muunad kale inta lagu jiro tallaabada xigta ee tuubada. Tan waxaa looga hortagi karaa iyadoo la isticmaalo talooyinka shaandhada ama hababka barokaca tooska ah.
Alaabta la isticmaalo sidatalooyin, weelasha iyo taarikada loo isticmaalo socodka shaqada PCR waa in aysan ku jirin walxo wax u dhimaya muunada ama natiijada been abuurka ah. Kuwaas waxaa ka mid ah DNA, DNA-da, RNases iyo PCR horjoogayaasha, iyo sidoo kale qaybo laga yaabo inay ka soo baxaan walxaha inta lagu jiro falcelinta - walxaha loo yaqaanno leachables.
Khaladka isticmaalaha
Mar kasta oo muunado badan la farsameeyo, waa sii badanaysaa khatarta khaladka. Si fudud ayay u dhici kartaa in muunad tubooyinka lagu shubo weel khaldan ama ceel khaldan. Khatartan waxaa si aad ah loo yarayn karaa iyadoo si sahlan loo calaamadin karo ceelasha. Iyada oo loo marayo otomaatig ah bixinta tillaabooyinka, "cunsurka bini'aadamka", ie, khaladaadka iyo kala duwanaanshiyaha isticmaalaha, waa la yareeyaa, sidaas awgeed kordhinta taranka, gaar ahaan marka ay dhacdo qiyaas yar oo falcelin ah. Tani waxay u baahan tahay taargooyin ku filan xasilloonida cabbirka si loogu shaqeeyo goobta shaqada. Barcode-yada kuxiran waxay bixiyaan karti-akhris dheeri ah oo mashiinka ah, kaas oo fududeynaya la socodka muunada inta lagu jiro habka oo dhan.
Barnaamijaynta heerkulbeegga
Barnaamijaynta qalabku waxa ay caddayn kartaa in uu wakhti badan qaadanayo iyo sidoo kale khaladka u nugul. Astaamaha kulaylka PCR ee kala duwan ayaa wada shaqeeya si loo fududeeyo tillaabadan habkan iyo, tan ugu muhiimsan, si looga dhigo mid badbaado leh:
Hawlgalka fudud iyo hagitaan wanaagsan oo isticmaale ayaa ah aasaaska barnaamij hufan. Dhisida aasaaskan, maamulka isticmaale ee sirta lagu ilaaliyo ayaa qofka ka ilaalin doona in barnaamijyadiisa ay wax ka beddelaan isticmaalayaasha kale. Haddii baaskiillo badan (oo isku nooc ah) la isticmaalo, waa faa'iido haddii barnaamijka si toos ah looga wareejin karo hal qalab oo kale iyada oo loo marayo USB ama isku xirnaanta. Software-ka kombuyuutarku wuxuu awood u siinayaa maamulka dhexe iyo amniga ee barnaamijyada, xuquuqda isticmaalaha iyo dukumeentiyada kombiyuutarka.
PCR-ga oo ku shaqeeya
Inta lagu jiro orodka, DNA-da waxaa lagu kordhiyey weelka falcelinta, halkaas oo muunad kasta la mariyo xaalado falcelin isku mid ah oo joogto ah. Dhinacyadan soo socda ayaa khuseeya habka:
Xakamaynta heerkulka
Saxnaanta aad u fiican ee xakamaynta heerkulka iyo isku midka ahaanshaha xannibaadda wareegtada ayaa saldhig u ah qaboojinta xitaa heerkulka dhammaan shaybaarada. Tayada sare ee walxaha kuleylka iyo qaboojinta (peltier element), iyo sidoo kale habka ay kuwani ugu xiran yihiin xannibaadda, ayaa ah qodobbada go'aaminta kuwaas oo go'aamin doona khatarta heerkulka heerkulka loo yaqaan "saameynta gees"
Uumiga
Isku-duubnaanta qaybaha falcelinta shakhsi ahaaneed waa inaysan isbeddelin muddada falcelinta sababtoo ah uumiga. Haddii kale, waxaa suurtagal ah in aad u yarAlaabta PCRwaa la dhalin karaa, ama midnaba. Sidaa darteed waa muhiim in la yareeyo uumiga iyadoo la hubinayo shaabad sugan. Xaaladdan oo kale, daboolka kuleylka leh ee heerkulbeegga iyo shaabadda weelka ayaa gacanta ku wada shaqeeya. Ikhtiyaarada xidhitaannada kala duwan ayaa diyaar u ahTaarikada PCR (isku xidhka: Maqaalka Xidhitaanka), kaas oo shaabadda ugu fiican lagu gaaro daboolida kulaylka. Xiritaannada kale ayaa sidoo kale laga yaabaa inay ku habboon yihiin, ilaa inta cadaadiska xiriirka ee daboolka baaskiilka lagu hagaajin karo shaabadda la doortay.
Habaynta habraaca ayaa loo sameeyay si loo ilaaliyo natiijooyinka saxda ah iyo kuwa la soo saari karo mustaqbalka fog. Tan waxaa ku jira dayactirka joogtada ah ee qalabka si loo hubiyo in uu had iyo jeer ku jiro xaalad shaqo oo wanaagsan. Dhammaan alaabooyinka la isticmalo waa inay ahaadaan kuwo tayo sare leh oo joogto ah dhammaan alaabooyinka la soo saaro, iyo helitaankooda la isku halayn karo waa in la dammaanad qaado.
Waqtiga boostada: Nov-29-2022