Hordhac
Waa maxay Asiidhka Nucleic-ka Soo Saaridda?
Sida ugu fudud ee ereyada, soo saarista aashitada nuclei-ku waa ka saarida RNA iyo/ama DNA-da muunada iyo dhammaan wixii dheeraad ah ee aan loo baahnayn. Habka soosaarku wuxuu ka soocaa asiidhyada nucleic-ka ah muunad wuxuuna u soo saaraa qaab eluate ah oo xoogaysan, oo ka madax bannaan dareerayaasha iyo wasakhooyinka saameynaya codsi kasta oo hoose.
Codsiyada Soosaarka Asiidhka Nucleic
Asiidhyada nucleic-ka ah ee la safeeyey ayaa loo adeegsadaa codsiyo kala duwan, oo u dhexeeya warshado kala duwan. Daryeel-caafimaadka ayaa laga yaabaa inay tahay meesha inta badan laga isticmaalo, oo leh RNA la safeeyey iyo DNA looga baahan yahay ujeeddooyin kala duwan oo baaritaanno ah.
Codsiyada soo saarista nucleic acid ee daryeelka caafimaadka waxaa ka mid ah:
- Taxanaha Jiilka Xiga (NGS)
- Kordhinta ku salaysan SNP Genotyping
- Genotyping-ku-saleysan
- Xannibaadda dheefshiidka Enzyme
- Waxay baartaa iyadoo la isticmaalayo wax ka beddelka Enzymes (tusaale ligation iyo cloning)
Waxa kale oo jira meelo kale oo ka baxsan daryeelka caafimaadka halkaas oo soo saarista nucleic acid la isticmaalo, oo ay ku jiraan laakiin aan ku xaddidnayn baaritaanka aabbanimada, cilmi-baadhista iyo genomics.
Taariikh Kooban Oo Ku Saabsan Soo Bixinta Asiidhka Nukliyeerka
Soo saarista DNATaariikhdu waxay soo noqonaysaa meel fog, iyada oo go'doomintii ugu horreysay ee la ogaaday uu sameeyay dhakhtar Swiss ah oo la odhan jiray Friedrich Miescher 1869. Miescher wuxuu rajaynayay inuu xalliyo mabaadi'da aasaasiga ah ee nolosha isagoo go'aaminaya halabuurka kiimikada ee unugyada. Ka dib markii uu ku guuldareystay lymphocytes, wuxuu awooday inuu helo dheecaan cayriin oo DNA ah oo ka yimid leukocytes oo laga helay malaxda faashado la tuuray. Waxa uu sidaas sameeyay isaga oo ku daray acid ka dibna alkali ku daray unuga si uu uga tago cytoplasmka unugga, ka dibna waxa uu sameeyay hab-maamuuska DNA-da iyo borotiinada kale.
Ka dib markii Miescher's cilmi-baarista dhulka-goynta ah, saynisyahano kale oo badan ayaa u dhaqaaqay si ay u hormariyaan oo ay u horumariyaan farsamooyin lagu go'doomiyo laguna nadiifiyo DNA. Edwin Joseph Cohn, oo ah saynisyahan borotiin ah ayaa soo saaray farsamooyin badan oo borotiinka lagu sifeynayo intii lagu jiray WW2. Wuxuu mas'uul ka ahaa go'doominta serum albumin qaybteeda dhiigga, taas oo muhiim u ah ilaalinta cadaadiska osmotic ee xididdada dhiigga. Tani waxay muhiim u ahayd in askarta nolol lagu sii hayo.
Sannadkii 1953-kii Francis Crick, oo ay weheliyaan Rosalind Franklin iyo James Watson, ayaa go'aamiyay qaab-dhismeedka DNA-da, taas oo muujinaysa in ay ka kooban tahay laba xadhig oo silsilado dhaadheer oo nucleotide nucleic acid ah. Helitaankan horumarku waxa uu waddada u furay Meselson iyo Stahl, kuwaas oo awooday in ay horumariyaan hab-maamuuska cufnaanta cufnaanta si ay DNA uga go'doomiyaan bakteeriyada E. Coli iyaga oo muujiyay isku-duubnida semi-conservative ee DNA-da intii lagu jiray tijaabadii 1958-kii.
Farsamooyinka Soosaarka Asiidhka Nucleic
Waa maxay 4-ta marxaladood ee soo saarista DNA?
Dhammaan hababka wax-soo-saarku waxay hoos ugu dhacaan tallaabooyin aasaasi ah oo isku mid ah.
Qalalaasaha Unugga. Marxaladdan, oo sidoo kale loo yaqaano lysis unug, waxay ku lug leedahay jebinta derbiga unugga iyo/ama xuubabka unugga, si loo sii daayo dareeraha unugyada gudaha ee ay ku jiraan asiidhka nucleic ee xiisaha leh.
Ka saarida qashinka aan la rabin Tan waxaa ku jira xuubka xuubka, borotiinnada iyo asiidhyada nukliyeerka kale ee aan la rabin kuwaas oo faragelin kara codsiyada hoose.
Karantiil. Waxaa jira dhowr siyaabood oo kala duwan oo lagu go'doomiyo asiidhyada nucleic-ka ah ee xiisaha leh lysate-ka nadiifka ah ee aad abuurtay, kuwaas oo u dhexeeya laba qaybood oo waaweyn: xalal ku salaysan ama xaalad adag (eeg qaybta xigta).
Xoog-saarid. Ka dib markii asiidhyada nucleic-ka laga soocay dhammaan wasakhooyinka kale iyo dareerayaasha, waxaa lagu soo bandhigaa eluate aad u urursan.
Labada Nooc ee Soo saarista
Waxaa jira laba nooc oo ah soo saarista aashitada nucleic-ka ah - habab ku salaysan xalalka iyo hababka xaalad adag. Habka xalka ku salaysan ayaa sidoo kale loo yaqaan habka soo saarista kiimikaad, maadaama ay ku lug leedahay isticmaalka kiimikooyinka si loo burburiyo unugga oo loo galo walxaha nukleiga ah. Tani waxay noqon kartaa mid la isticmaalayo mid ka mid ah xeryahooda organic sida phenol iyo chloroform, ama waxyeello yar oo sidaas darteed aad loogu taliyay xeryahooda aan organic sida Proteinase K ama silica jel.
Tusaalooyinka hababka kala duwan ee kiimikaad soo saarista unugyada si loo burburiyo waxaa ka mid ah:
- Xuub dillaaca Osmotic
- Dheefshiidka enzymatic ee gidaarka unugyada
- Xuubka oo xaliya
- Qalabka saabuunta leh
- Iyadoo daawaynta alkali ah
Farsamooyinka gobolka adag, oo sidoo kale loo yaqaan hababka farsamada, waxay ku lug leeyihiin ka faa'iidaysiga sida DNA-da ula falgalo substrate adag. Adiga oo dooranaya kuul ama molecule kaas oo DNA-gu ku xidhi doono laakiin falanqeeyaha ma samayn doono, waa suurtogal in la kala saaro labada. Tusaalooyinka farsamooyinka soo saarista weji adag oo ay ku jiraan isticmaalka silica iyo kuul birlab ah.
Soo saarista Biraha Birlabka ah ee La Sharaxay
Habka Soosaarida Kuul Birlabka
Suurtagalnimada soo saarista iyadoo la isticmaalayo kuul birlab ah ayaa markii ugu horreysay lagu aqoonsaday shati Maraykan ah oo uu xareeyay Trevor Hawkins, oo ah machadka cilmi-baarista ee Whitehead. Patent-kani waxa uu qiray in ay suurtagal tahay in la soo saaro walxaha hidde-sidaha iyada oo lagu xidhayo sidaha taageerada adag, kaas oo noqon kara bir birlab ah. Mabda'a ayaa ah in aad isticmaashid tuul birlabeed ah oo si heer sare ah u shaqaynaya kaas oo walxaha hidde-sidaha ay ku xidhi doonaan, kaas oo markaa laga sooci karo korka sare adiga oo isticmaalaya xoog birlab ah dibadda markabka haya saamiga.
Waa maxay sababta loo isticmaalo soo saarista birta birta ah?
Tignoolajiyada soo saarista birta magnetic ayaa noqonaysa mid sii faafsanaysa, taas oo ay ugu wacan tahay awooda ay u hayso hababka soo saarista degdega ah oo hufan. Waqtiyadii u dambeeyay waxaa jiray horumarro kuul birlabeed ah oo si heer sare ah u shaqeynaya oo leh nidaamyo ku habboon, kuwaas oo suurtageliyay in la soo saaro aashitada nucleic-ka ah iyo socodka shaqada kaas oo ah iftiin kheyraad iyo kharash badan leh. Sidoo kale, hababka soo saarista birta birlabku kuma jiraan tillaabooyinka centrifugation ee sababi kara xoogaga xiiraya kuwaas oo jebiya qaybo dhaadheer oo DNA ah. Tani waxay ka dhigan tahay in xadhkaha dhaadheer ee DNA ay sii jiraan, taas oo muhiim u ah baaritaanka genomics.
Waqtiga boostada: Nov-25-2022