Intee in le'eg sheybaar ayaan ku dari karnaa jawaab celinteyda PCR?

In kasta oo aragti ahaan, hal molbaule oo ka mid ah shaashadda ay ku filnaan lahayd, qadar aad u badan oo DNA ah ayaa sida caadiga ah loo isticmaalaa nooc caadi ah, illaa 1 μg oo ah 1-da Genomic Mammans DNA iyo ugu yaraan 1 pg of plasmid DNA. Lacagta ugu habboon waxay kuxirantahay tirada nuqulada taxanaha bartilmaameedka, iyo sidoo kale adkaynta kakanaanta.

Haddii shay aad u yar la isticmaalo, koror u dhigma tirada wareegga waaweyn ee wareegga ayaa loo baahan doonaa si loo helo lacag ku filan oo alaab ah. Isticmaalka taq ee taq ee loo isticmaalo inta badan tijaabooyinka PCR-da ma muujinayo shaqada sixitaanka (3'-5 'firfircoonida firfircoonaanta); Sidaa darteed, khaladaadka ka dhaca inta lagu gudajiro cod-weyne lama saxi karo. Tirada sare ee wareegga wareegga, ayaa sii kordhaya cod-weyne badeecada cilladaysan ay noqon doonto. Haddii, dhinaca kale, xaddiga shayga uu aad u sarreeyo, itimaalka aasaasiga ah ee loo yaqaan 'parters' oo loo qarinaayo kuwa kale (ma aha boqol boqolkiiba ama sidoo kale abuuritaanka samaynta hore, oo horseedi doonta cod-weyne alaabada. Xaaladaha badan, DNA waa laga goynayaa dhaqamada unugyada ama ka soo baxa sheybaarka iyo markii dambe loo adeegsaday sidii shaashad PCR. Daahirinta ka dib, waxaa lagama maarmaan ah in la go'aamiyo uruurinta DNA si loo qeexo mugga looga baahan yahay dejinta PCR. In kasta oo Enertrophoresis uu u adeegi karo si loo bixiyo qiyaas, habkan ayaa ka fog sax. UV-V V VIS Spectrophototometry waxaa loo aasaasay sida heerka dahabiga ah ee tirada acids acids nucleic; Tooska Tooska ah iyo Sidaa darteed Habka Fudud iyo Degdegga ah Tallaabooyinka muujinta muunadda ee 260 NM, iyo feejignaanta waxaa lagu xisaabiyaa iyadoo la kaashanayo qodobka beddelka.

Haddii wax-qabadku uu aad u yar yahay, si kastaba ha noqotee (<1 μg / ml dsdna), ama haddii ay ku wasakhoobeen maaddooyinka u dhexeeya 260 nm, rnna, cusbo, qaabkani wuxuu gaari doonaa xad-dhaaf. Marka laga hadlayo ururinta aad u hooseysa, akhrinta ayaa dhawaan noqon doonta si sax ah si ay u istcimaalaan, iyo sumaddu waxay horseedi doontaa (mararka qaarkood aad u weyn) ee qiimaha dhabta ah. Xaaladdan oo kale, tirinta iyadoo la adeegsanayo ifafaalaha ayaa laga yaabaa inuu soo bandhigo meel kale. Farsamadan waxay ku saleysan tahay dheeh dheeh ah oo si gaar ah u xiraya DSDNA kaliya isku dhafka ah oo ka kooban nucle acid iyo dheehdu waxay ku faraxsanaataa iftiinka, ka dibna waxay iftiimi doontaa mawjad waxyar ka sareeya. Halkan, xoogga calaamadaha iftiinka ayaa u dhigma xaddiga DNA-da, iyo go'aaminta uruurinta waxaa lagu qiimeeyaa qalooca caadiga ah. Faa'iidooyinka habkan ayaa nasan ku saabsan xisbiyada debaajiga, kaas oo ka reeba saameynta dibedda ee ay soo saartay faddaraynta, iyo sidoo kale awoodda ka dhalata ee lagu ogaado uruurinta aad u yar ee DNA. Ku habboonaanta labada qaabba waxay ku xiran tahay inta badan ee ku saabsan fiirsashada muunadda iyo daahirnimo; Xaaladaha badankood xitaa waxaa lagugula talin karaa inaad ku dabaqdo labada qaabba midka isbarbar dhiga.


Waqtiga Post: Noven-30-2022