Ole polymerase chain reaction (PCR) ose metotia e masani ona fa'aogaina e tagata su'esu'e fa'aolaola, saienitisi fa'afoma'i ma fa'apolofesa o fale su'esu'e fa'afoma'i.
I le fa'avasegaina o nisi o ana fa'aoga, e fa'aaogaina mo le genotyping, sequencing, cloning, ma le au'ili'iliga o fa'amatalaga o kenera.
Peita'i, e faigata le fa'ailogaina o paipa PCR ona e la'ititi ma e la'ititi le avanoa e teu ai fa'amatalaga.
Ae ui i lea, e na'o le tasi itu e mafai ona fa'ailoga pepa PCR (qPCR).
E te manaʻomia se mea tumau, malō paipa PCRmo le fa'aoga i lau falesu'esu'e? Taumafai e fa'afeiloa'i se tagata gaosi ta'uta'ua.
O le afifi atoa
O le PCR-Tag Trax o loʻo faʻatali pateni o le filifiliga sili ona lata mai ma sili ona lelei mo le faʻailogaina o paipa PCR maualuga, fasi pepa, ma pepa qPCR.
O le mamanu fetuutuuna'i o le tag e le fa'apipi'i e mafai ai ona fa'ailoa 0.2 ml fa'aigoa PCR maualuga ma ipu qPCR e le fa'apipi'i i fa'asologa eseese.
O le aoga autu o le PCR-Tag Trax o lona gafatia e tuʻuina atu se aofaiga sili ona lelei mo le lolomiina poʻo, pe a manaʻomia, tusilima.
I le fa'aaogaina o se masini lomitusi fa'afefete, e mafai ona lolomi fa'ailoga fa'atasi ma fa'ailoga fa'asologa fa'apea 1D po'o le 2D barcodes ma e mafai ona tatalia le vevela e maualalo ifo i le -196°C ma le maualuga e o'o i le +150°C.
O le mea lea e fetaui lelei ai ma le tele o uila uila. Ose manatu lelei le su'eina o se fa'ata'ita'iga o fa'ailoga i au lava ta'avale vevela e fa'amautinoa ai latou te le fa'alavelave i mea e fai.
E tatau ona fa'alelei totigilima, ia vave ona va'ai mata o le manu i fa'amatalaga o lo'o tusia i fa'ailoga pe a tatala le uila uila.
O paipa PCR e mafai ona o'o mai i lanu eseese po'o le tele-lanu fa'atulagaina mo le fa'ailoga lanu faigofie.
E mafai fo'i ona fa'aogaina fa'ailoga e leai se pipi'i e fai ma lagolago mo au paipa, fa'afaigofie ona fa'apipi'i fa'ama'i i totonu ma teu i totonu o le pusaaisa po'o le pusaaisa pe a uma le tali.
Paipa PCR, 0.2mL
O paipa PCR ta'ito'atasi e mafai ona fa'ailoga i luga ole laiga eseese e lua: o fa'agaau ma lona pulou.
Mo le fa'avasegaina o lanu faigofie, o fa'ailoga pito mo tama'i paipa PCR e maua i le tele o lanu mo masini lomitusi leisa ma le vevela.
E tele atu fa'amatalaga e mafai ona lolomi i luga o nei fa'ailoga PCR tube nai lo le tusi lima, ma e mafai ona fa'aoga fa'ailoga e fa'aleleia atili ai le su'esu'eina.
O fa'ailoga e saogalemu ma e mafai ona teu i totonu o pusaaisa mo se taimi umi.
O fa'ailoga togitogi taamilo o le filifiliga sili lea mo le fa'ailogaina o pito pito i luga ole paipa PCR.
O fa'ailoga togitogi, i le isi itu, e fa'atapula'aina le vaega o le fa'agaau e lolomi pe tusi ai fa'amatalaga. O le mea lea e avea ai i latou ma se tasi o filifiliga sili ona lelei mo le faʻailogaina o paipa PCR.
Afai e tatau ona e fa'aogaina fa'ailoga togitogi mo paipa PCR ma o le a fa'ailogaina se numera tele o latou, o le pikaTAGTM.
O le pikaTAGTM o se masini fa'aoga e piki sa'o ai fa'ailoga togi mai le latou laina ma fa'apipi'i i pito i luga o paipa.
O lo'o fa'amaualuga se peni ergonomic e fa'apena e vave ma faigofie ai le fa'ailoga o togi, e aveese ai le taimi e alu ai galuega o le pikiina o tama'i igoa ma le puipuia o manu'a fa'apopoleina e mafua mai i le fa'aigoaina o paipa.
fasipepa mo paipa PCR
O fasipepa PCR e masani ona fa'aogaina i totonu o fale su'esu'e e fa'atino ai le tele o faiga PCR ma qPCR.
O le fa'ailogaina o nei fasipepa e sili atu ona lu'itau nai lo le fa'ailogaina o fa'agaau ta'itasi ona o fa'agaau ta'itasi e feso'ota'i i le isi, ma fa'aitiitia ai le vaega ua fa'asaina e iloagofie ai.
O le mea e lelei ai, e 8-tube pepa fa'ailoga e ogatusa ma paipa ta'itasi, ma avea ai le fa'ailogaina o le PCR ma se savili.
O fasi pepa nei na fausia e GA fa'avaomalo, e iai ni fa'ailoga i le va o fa'ailoga ta'itasi i totonu o le lola, e mafai ai ona e lolomi le tele o fa'ailoga pe a iai fa'agaau.
Tuu le fasi pepa uma i tafatafa o le itu o le paipa, fa'apipi'i uma igoa i le taimi e tasi, ona ta'e lea o fa'ailoga e pipii mau ai pepa i le itu.
I le va'aiga o le vevela o le -80°C i le +100°C, o nei fa'ailoga e mafai ona lolomi fa'amama e saogalemu e fa'aoga i ta'avale vevela ma e mafai ona teu malu i totonu o pusaaisa falesuesue.
O le Faiga Fa'aleaganu'u
O le tusilima o le auala sili lea ona taatele e iloa ai paipa PCR, e ui lava e mamao mai le lelei ona o le tusitusi manino i luga o paipa PCR e toetoe lava a le mafai.
O le tusilima fo'i e fa'ate'aina ai fa'asologa ma fa'amaufa'ailoga, e atili ai ona faigata ona su'e au fa'ata'ita'iga.
Afai o le tusilima e na'o le pau lea o le filifiliga mo lau su'esu'ega, o fa'ailoga cryo pito sili ona aoga e teu fa'afaigaluega talu ai e mafai ai ona e tusitusi ma le manino pe a mafai e aunoa ma le mata'utia pe faanenefu.
Fa'afeso'ota'i matou mo paipa PCR maualuga
Matou te fau ma gaosia tulaga maualugaPCR paipamo le fa'aoga i le genotyping, sequencing, cloning, ma le au'ili'iliga o kenera i su'esu'ega fa'afoma'i eseese ma su'esu'ega inisitituti.
Mo le poto sili ona lelei i paipa PCR, faiaapa atu ia i matou mo se oloa lelei ma aoga.
Taimi meli: Oke-30-2021