5 Fautuaga Fa'afaigofie e Puipuia Mea Sese A'o Galulue ma Papatusi PCR

Polymerase chain reactions (PCR) o se tasi lea o auala lauiloa e fa'aoga i fale su'esu'e fa'asaienisi olaga.

O le PCR plates e gaosia mai le vasega muamua palasitika mo le faʻaogaina lelei ma le auiliiliga o faʻataʻitaʻiga poʻo taunuuga na aoina.

E iai a latou puipui manifinifi ma tutusa e maua ai le faʻafefe saʻo o le vevela.

I le sauniuni mo le taimi moni talosaga, vaega minute o le DNA poʻo le RNA e faʻaesea ma teuina i totonu o papatusi PCR.

O papatusi PCR e sili ona lelei i le faʻamaufaʻailogaina o le vevela ma faʻatapulaʻaina foi le tafe o le vevela.

Ae ui i lea, e pei ona lelei ma faʻatuatuaina le PCR plates, o mea sese ma mea le saʻo e faigofie ona faʻafefe aʻo faʻaogaina faʻataʻitaʻiga.

O le mea lea, afai e te manaʻo e maua se tulaga lelei ma maualugaPapatusi PCR.E lelei tele le fa'afeso'ota'i se kamupani gaosi ipu PCR faatuatuaina. Faatasi ai ma lenei mea e te mautinoa o le mauaina o le tau sili ona lelei.

O nisi nei o puipuiga e mulimulitaia e aloese ai mai le afaina o reagents poʻo faʻataʻitaʻiga ma puipuia ai le le saʻo mai le tolotolo i taunuuga.

Fa'amama le Si'osi'omaga
Le sa'o lelei po'o le lelei e tupu ona o le i ai o mea leaga, lea e te masalosalo ai i'uga.

O mea leaga ma mea fa'aleagaina e tutupu i ituaiga eseese e pei ole DNA e le feso'ota'i po'o vaila'au fa'aopoopo e iu ai ina fa'aitiitia le lelei ma le aoga o le tali.

E tele auala e faʻaitiitia ai le fua o le faʻaleagaina o le PCR plate.

O le fa'aogaina o fautuaga fa'amama fa'amama o le isi lea auala aoga e taofia ai mea leaga mai le fetolofi i totonu o au fa'ata'ita'iga e ala i paipa.

Tuuina atu se seti mama atoatoa o meafaigaluega, e aofia ai paipa ma fata, faʻapitoa mo le faʻaogaina o le PCR. Ole mea lea ole a fa'amautinoa ai le fa'amama ole fa'amama ole fa'aleaga po'o mea fa'aleagaina ile fale su'esu'e.

Fa'aaogā vaila'au, ethanol i paipa, fata ma nofoa nofoa e solo'ese ai mea leaga.

Fa'asoa se avanoa fa'apolopolo mo au tali PCR uma e fa'aitiitia ai le fa'aleagaina o vaega.

Fa'aaoga totigilima mama i laa uma ma sui soo.

Papatusi PCR
Su'esu'e le Fa'atonuga ma le Mama o le Fa'ata'ita'iga.
O le mama o le nofoa ma meafaigaluega e faʻaaogaina pe a suʻeina faʻataʻitaʻiga ma le PCR e tatau ona tausia. E taua tele le faʻamaonia o le maualuga o le mama o faʻataʻitaʻiga aʻo leʻi suʻesuʻeina ma faʻatautaia.

E masani lava, e iloilo e tagata su'esu'e le maualuga ma le tulaga mama o fa'ata'ita'iga DNA.

Taumafai le fua faatatau o le mitiia mo le 260nm/280nm e le tatau ona itiiti ifo i le 1.8. A'o fa'aogaina le umi ole galu i le va o le 230nm ma le 320nm e iloa ai mea leaga.

I se faʻataʻitaʻiga, o masima chaotropic ma isi faʻalapotopotoga faʻapitoa e iloa i le 230nm absorbance rate. A'o fa'alavelave i fa'ata'ita'iga DNA o lo'o iloa ma fa'amaonia i se fua faatatau o le 320nm.

Aloese mai le soona utaina o Papatusi PCR i oloa
E pei lava ona manaʻo e faʻatautaia le tele o oloa i le taimi e tasi, e iʻu ai i le faʻafefe o le PCR plates.

O le tele o le utaina o le PCR plates i oloa eseese o otaota ma faʻalavelave tele ai le faʻamautinoaina o faʻataʻitaʻiga.

Taofi Faamaumauga o Aliquot PCR Reagents
Ole ta'amilosaga fa'aaisa/fa'aisa faifaipea ma le fa'aaogaina faifaipea ole aliquot e ono fa'aleagaina ai le PCR reagents, enzymes ma le DNTP's e ala ile toe fa'amama.

Taumafai i taimi uma e mataʻituina le fua o le aliquot faʻaaogaina aʻo saunia faʻataʻitaʻiga e suʻeina.

E sili atu ona fetaui le LIMS mo le faʻatonutonuina o suʻesuʻega ma le aofaʻi o mea faʻafoʻi ma faʻataʻitaʻiga ua malo pe liu.

Filifili Le vevela sili ona fa'afefeteina.
O le pikiina ma le fa'aogaina o le vevela fa'afefete sese o le isi lea auala e maua ai e le PCR se mea sese.

O nisi taimi, o le tali e le alu e pei ona fuafuaina. E mana'omia le fa'aitiitia o le vevela fa'atosina ina ia faafaigofie ai se tali manuia.

Ae ui i lea, o le faʻaititia o le vevela e faʻateleina ai le avanoa o faʻamatalaga sese ma foliga muamua dimers.

E taua tele le fa'amaonia o le au'ili'iliga o le liusuavai pe a fa'aogaina papatusi PCR ona o se fa'ailoga lelei lea o le filifilia o le sa'o o le vevela.

E fesoasoani polokalama faakomepiuta muamua i le fuafuaina, saunia o le vevela sa'o fa'afefete ma fa'aitiitia sa'o mea sese i totonu o papatusi PCR.

O lo'o mana'omia se ipu PCR maualuga?
I le tulaga ua e mafaufau i le mea e maua ai se gaosi oloa faatuatuaina oPapatusi PCR. Aua le toe su'esu'e aua ua e i le nofoaga sa'o.

Fa'afetaikiliki iinei e faʻafesoʻotaʻi matoumo oloa maualuga ma auaunaga i se tau e le motusia ai le faletupe.


Taimi meli: Oke-30-2021