Mikropipeta je verjetno najbolj uporabljeno orodje v laboratoriju. Uporabljajo jih znanstveniki v številnih sektorjih, vključno z akademskimi krogi, bolnišničnimi in forenzičnimi laboratoriji, pa tudi pri razvoju zdravil in cepiv za prenos natančnih, zelo majhnih količin tekočine.
Čeprav je opazovanje zračnih mehurčkov v konici pipete za enkratno uporabo lahko nadležno in frustrirajoče, če niso opazni ali prezrti, lahko močno vpliva na zanesljivost in ponovljivost rezultatov.
Dobra novica je, da obstaja nekaj preprostih ukrepov, s katerimi lahko preprečite nastanek zračnih mehurčkov in izboljšate učinkovitost laboratorija, zadovoljstvo operaterja ter točnost in natančnost rezultatov.
Spodaj raziskujemo posledice, če v konico pipete dobite zračni mehurček, in kaj morate storiti.
Posledica mehurčkov vKonica pipete
Tudi če uporabljate najbolj natančne, vrhunske, dobro vzdrževane, servisirane in kalibrirane pipete, lahko na zanesljivost vaših rezultatov vplivajo laboratorijske napake. Ko mehurčki pridejo vnapitninalahko ima več rezultatov.
● Ko uporabnik opazi zračni mehurček, mora nekaj časa ustrezno razdeliti aspirirano tekočino, izvrže konico in znova začeti postopek.
● Nezaznani zračni mehurčki lahko povzročijo majhen prenos volumna, kar spremeni koncentracijo reakcijskih mešanic, kar povzroči neuspešne poskuse in vprašljive ali nezanesljive rezultate.
Ti rezultati imajo lahko več posledic (1).
● Zmanjšana učinkovitost laboratorija – Teste in teste bo treba ponavljati, kar povzroča stroške dela in materiala, ki so lahko precejšnji.
● Vprašljivi ali nepravilni rezultati testa – če so objavljeni napačni rezultati, lahko pride do resnejših posledic, vključno z napačno diagnozo in slabimi rezultati za bolnike.
● Umik rokopisov iz revij – Če kolegi ne uspejo ponoviti vaših rezultatov zaradi zračnih mehurčkov, ki povzročajo netočne rezultate, se dokumenti lahko umaknejo.
Najboljše prakse za preprečevanje zračnih mehurčkov
V večini primerov so zračni mehurčki v konicah pipet posledica napake operaterja. Slaba tehnika zaradi nezadostnega treninga ali utrujenosti je navadno osnovni problem.
Pipetiranje je izkušen postopek, ki zahteva 110 % pozornosti, ustrezno usposabljanje in prakso za doseganje doslednih in natančnih rezultatov.
Čeprav lahko storite več stvari, da zmanjšate splošne napake pri pipetiranju, smo spodaj poudarili nekaj najboljših praks, ki jih je mogoče uporabiti za preprečevanje zračnih mehurčkov vkonice za pipete.
Izboljšajte uporabniško tehniko
Počasi pipetirajte
Če bat pri aspiraciji prehitro sprostite, se lahko v konico vnesejo zračni mehurčki. To je lahko še posebej problematično pri prenosu viskoznih tekočin. Podoben učinek se lahko pojavi, če bat po točenju prehitro sprostite.
Da bi se izognili zračnim mehurčkom pri aspiraciji, pazite, da bat ročnih pipet upravljate gladko in enakomerno ter z enakomerno silo.
Uporabite pravilno globino potopitve
Če konice pipete ne potopite dovolj globoko pod meniskus rezervoarja za tekočino, lahko pride do aspiracije zraka in s tem do nastanka mehurčkov.
Če konico potopite pregloboko, lahko zaradi povečanega tlaka vsesate več tekočine ali pa se na zunanji strani konice pojavijo kapljice, zato je pomembno, da potopitekonico pipetena pravo globino.
Priporočena globina se razlikuje glede na velikost pipete, vrsto in znamko. Medtem ko je treba upoštevati priporočila proizvajalca, je tukaj splošni vodnik, ki ga je zagotovil Nacionalni fizikalni laboratorij.
Vodnik za globino potopitve konice
Prostornina pipete (µl) in globina potopitve (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Pre-WetNasveti za pipete
Pri pipetiranju volumnov, večjih od 10 µlkonice za pipeteobičajno predhodno navlažijo tako, da jih večkrat napolnijo s tekočino, ki se dozira, in jo vržejo v odpadke, da izboljšajo natančnost.
Če jih predhodno ne namočite, se lahko pojavijo zračni mehurčki, zlasti pri uporabi viskoznih ali hidrofobnih tekočin. Da se izognete zračnim mehurčkom, poskrbite, da boste konice predhodno navlažili, ko pipetirate prostornino, večjo od 10 µl.
Če je primerno, uporabite tehnike obratnega pipetiranja
Viskozne snovi: Pogosta težava pri pipetiranju viskoznih snovi, kot so raztopine beljakovin ali nukleinskih kislin, glicerol in Tween 20/40/60/80, je pogosto nastajanje mehurčkov, ko se uporablja tehnika pipetiranja naprej.
Počasno pipetiranje z uporabo tehnike obratnega pipetiranja zmanjša tveganje za nastanek mehurčkov pri prenašanju viskoznih raztopin.
ELISA tehnika
Pri pipetiranju majhnih količin vMikro testne plošče s 96 jamicamiza tehnike ELISA. Ko se zračni mehurčki vlečejo v pipeto ali odmerjajo v vdolbinice pri dodajanju reagentov, lahko to vpliva na vrednosti optične gostote in rezultate. Za zmanjšanje ali odpravo te težave je priporočljivo obratno pipetiranje.
Uporabite ergonomske pipete
Stare pipete, ki niso bile zasnovane z upoštevanjem ergonomije, zahtevajo več fizičnega napora, postanete utrujeni in vaša tehnika pipetiranja postane površna in slaba. Zgoraj omenjene napake, kot je hitro sprostitev bata, se lahko pojavijo pogosteje.
Z naložbo v bolj ergonomsko rešitev boste lahko ohranili odlično tehniko in preprečili nastajanje zračnih mehurčkov zaradi slabe tehnike.
Vzemite si čas za usposabljanje osebja
Redno usposabljanje in ocenjevanje osebja o tehnikah pipetiranja lahko zagotovita zmanjšanje napak operaterja in nastajanja zračnih mehurčkov.
Razmislite o več avtomatiziranih rešitvah
Kot je navedeno zgoraj, večino zračnih mehurčkov povzroči operater. Morda je možno zmanjšati napake operaterja in udobje z uporabo elektronskih pipet ali prilagodljive platforme za ravnanje s tekočino, kot jeRobot za ravnanje s tekočinami Agilent Bravo.
Uporabite dobro kakovostNasveti za pipete
Mikropipete se običajno kupujejo previdno, vendar se pogosto malo razmišlja o kakovosti konice pipete za enkratno uporabo. Zaradi vpliva, ki ga ima konica na rezultate pipetiranja, zahteva standard ISO 8655 dodatno kalibracijo, če se uporabljajo pipete in konice različnih proizvajalcev.
To je lahko zato, ker so lahko številne poceni konice na začetku videti v redu, ko pa jih natančno preučite, imajo lahko bliskavice, štrline, praske in zračne mehurčke ali pa so upognjene ali vsebujejo nečistoče.
Nakup kakovostnih konic iz visokokakovostnega polipropilena lahko zmanjša nastanek zračnih mehurčkov.
Za zaključek
Zračni mehurčki v konico pipete vplivajo na učinkovitost laboratorija ter na netočnost in nenatančnost rezultatov. Omenili smo več stvari, ki jih lahko storite, da preprečite, da bi zračni mehurčki prišli vkonico pipete.
Vendar, če slabe kakovostikonice za pipetepovzročajo vdor zračnih mehurčkov v konico pipete, boste veseli, da je naše univerzalno prileganjekonice za pipeteso izdelani po najvišjih standardih in iz čistega polipropilena vrhunskega razreda.
Biomedicinsko podjetje Suzhou Aceproizvajajo visokokakovostne univerzalne konice za pipete s prostornino 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 in 1250 µL, 96 konic/stojalo. Izjemna vzdržljivost – vsa stojala za konice ACE so kos zahtevam uporabe z večkanalnimi pipetorji. Sterilno, filtrirno, brez RNaze/DNaze in apirogeno.
Dobrodošli, da nas povprašate za več podrobnosti.
Čas objave: 29. december 2022