Pipeta je jedným z najbežnejších nástrojov používaných v biologických, klinických a analytických laboratóriách, kde je potrebné presne merať a prenášať tekutiny pri vykonávaní riedení, testov alebo krvných testov. Sú dostupné ako:
① jednokanálový alebo viackanálový
② pevná alebo nastaviteľná hlasitosť
③ manuálne alebo elektronické
Čo sú to jednokanálové pipety?
Jednokanálová pipeta umožňuje používateľom prenášať naraz iba jeden alikvot. Tie sa zvyknú používať v laboratóriách s nízkou priepustnosťou vzoriek, čo môžu byť často tie, ktoré sa podieľajú na výskume a vývoji.
Jednokanálová pipeta má jednu hlavicu na nasávanie alebo dávkovanie veľmi presných hladín kvapaliny cez jednorazovýtip. Môžu byť použité pre viaceré aplikácie v laboratóriách, ktoré majú len malú priepustnosť. Často ide o laboratóriá, ktoré vykonávajú výskum súvisiaci s analytickou chémiou, bunkovou kultúrou, genetikou alebo imunológiou.
Čo sú to viackanálové pipety?
Viackanálové pipety fungujú rovnako ako jednokanálové pipety, ale využívajú viacerotipyna meranie a dávkovanie rovnakých množstiev kvapaliny naraz. Bežné nastavenia sú 8 alebo 12 kanálov, ale dostupné sú aj 4, 6, 16 a 48 kanálové sady. Je možné zakúpiť aj 96-kanálové stolové verzie.
Pomocou viackanálovej pipety je ľahké rýchlo naplniť 96-, 384- alebo 1 536-jamkovémikrotitračná platnička, ktorý môže obsahovať vzorky pre aplikácie, ako je amplifikácia DNA, ELISA (diagnostický test), kinetické štúdie a molekulárny skríning.
Jednokanálové verzus viackanálové pipety
Efektívnosť
Jednokanálová pipeta je ideálna pri experimentálnej práci. Ide totiž o to, že pri transfúzii krvi ide hlavne o použitie jednotlivých skúmaviek alebo o jedinú krížovú skúšku.
To sa však rýchlo stane neefektívnym nástrojom, keď sa zvýši priepustnosť. Ak je potrebné preniesť viacero vzoriek/reagentov, alebo ak sa vykonávajú väčšie testy96-jamkové mikrotitračné doštičkyexistuje oveľa efektívnejší spôsob prenosu tekutín ako pomocou jednokanálovej pipety. Použitím viackanálovej pipety sa počet pipetovacích krokov dramaticky zníži.
Nižšie uvedená tabuľka ukazuje počet krokov pipetovania požadovaných pre jednokanálové, 8 a 12-kanálové nastavenia.
Počet požadovaných krokov pipetovania (6 činidiel x96-jamková mikrotitračná doštička)
Jednokanálová pipeta: 576
8-kanálová pipeta: 72
12-kanálová pipeta: 48
Objem pipetovania
Jedným z kľúčových rozdielov medzi jednokanálovými a viackanálovými pipetami je objem na jamku, ktorý je možné preniesť naraz. Hoci to závisí od použitého modelu, vo všeobecnosti nemôžete preniesť toľko objemu na hlavu na viackanálovú pipetu.
Objem, ktorý môže jednokanálová pipeta preniesť, sa pohybuje medzi 0,1 ul a 10 000 ul, pričom rozsah viackanálovej pipety je medzi 0,2 a 1200 ul.
Načítanie vzorky
Historicky boli viackanálové pipety nepraktické a ťažko použiteľné. To spôsobilo nekonzistentné načítanie vzorky spolu s ťažkosťami pri načítanítipy. Teraz sú však k dispozícii novšie modely, ktoré sú užívateľsky prívetivejšie a nejakým spôsobom riešia tieto problémy. Za zmienku tiež stojí, že aj keď môže byť dávkovanie kvapaliny trochu nepresnejšie pri viackanálovej pipete, je pravdepodobnejšie, že bude celkovo presnejšie ako jednokanálová kvôli nepresnostiam, ktoré sa vyskytujú v dôsledku chyby používateľa v dôsledku únavy ( pozri nasledujúci odsek).
Zníženie ľudskej chyby
Pravdepodobnosť ľudskej chyby sa drasticky znižuje, keď sa počet krokov pipetovania znižuje. Variabilita spôsobená únavou a nudou je odstránená, výsledkom čoho sú údaje a výsledky, ktoré sú spoľahlivé a reprodukovateľné.
Kalibrácia
Na zabezpečenie presnosti a presnosti zariadení na manipuláciu s kvapalinami je potrebná pravidelná kalibrácia. Norma ISO8655 uvádza, že každý kanál musí byť otestovaný a nahlásený. Čím viac kanálov má pipeta, tým dlhšie trvá kalibrácia, čo môže byť časovo náročné.
Podľa pipettecalibration.net si štandardná 2,2-násobná kalibrácia na 12-kanálovej pipete vyžaduje 48 pipetovacích cyklov a gravimetrické váženia (2 objemy x 2 opakovania x 12 kanálov). V závislosti od rýchlosti operátora to môže trvať viac ako 1,5 hodiny na pipetu. Laboratóriá v Spojenom kráľovstve vyžadujúce kalibráciu UKAS by museli vykonať celkovo 360 gravimetrických vážení (3 objemy x 10 opakovaní x 12 kanálov). Manuálne vykonávanie tohto počtu testov sa stáva nepraktickým a v niektorých laboratóriách môže prevážiť úspory času dosiahnuté použitím viackanálovej pipety.
Na prekonanie týchto problémov sú však dostupné služby kalibrácie pipiet od niekoľkých spoločností. Príkladmi sú Gilson Labs, ThermoFisher a Pipette Lab.
Oprava
Nie je to niečo, na čo mnohí myslia pri kúpe novej pipety, ale potrubie niektorých viackanálových pipiet sa nedá opraviť. To znamená, že ak je poškodený 1 kanál, možno bude potrebné vymeniť celý rozdeľovač. Niektorí výrobcovia však predávajú náhrady za jednotlivé kanály, takže pri kúpe viackanálovej pipety si u výrobcu overte možnosť opravy.
Zhrnutie – Jedno a viackanálové pipety
Viackanálová pipeta je cenným nástrojom pre každé laboratórium, ktoré má viac ako len veľmi malý objem vzoriek. Takmer v každom scenári je maximálny objem kvapaliny potrebný na prenos v rámci kapacity každého scenáratipna viackanálovej pipete a je s tým spojených len veľmi málo nevýhod. Akékoľvek menšie zvýšenie zložitosti pri používaní viackanálovej pipety je výrazne vyvážené čistým znížením pracovného zaťaženia, ktoré umožňuje drasticky znížený počet krokov pipetovania. To všetko znamená zlepšenie užívateľského komfortu a zníženie chybovosti užívateľa.
Čas odoslania: 16. decembra 2022