Prerušili stešpička pipetypri pipetovaní glycerolu? Robil som to počas doktorandského štúdia, ale musel som sa naučiť, že to zvyšuje nepresnosť a nepresnosť môjho pipetovania. A aby som bol úprimný, keď som odrezal špičku, mohol som glycerol naliať aj priamo z fľaše do tuby. Preto som zmenil svoju techniku, aby som zlepšil výsledky pipetovania a získal spoľahlivejšie a reprodukovateľnejšie výsledky pri práci s viskóznymi kvapalinami.
Kategóriou kvapalín, ktorá si vyžaduje osobitnú pozornosť pri pipetovaní, sú viskózne kvapaliny. Tieto sa často používajú v laboratóriu, buď v čistej forme, alebo ako zložky pufrov. Známymi predstaviteľmi viskóznych kvapalín vo výskumných laboratóriách sú glycerol, Triton X-100 a Tween® 20. S viskóznymi roztokmi sa však denne stretávajú aj laboratóriá, ktoré vykonávajú kontrolu kvality potravín, kozmetiky, liečiv a iných spotrebných produktov.
Viskozita sa uvádza buď ako dynamická alebo kinematická viskozita. V tomto článku sa sústredím na dynamickú viskozitu kvapalín, pretože popisuje pohyb kvapaliny. Stupeň viskozity je špecifikovaný v milipascaloch za sekundu (mPa*s). Skôr tekuté vzorky okolo 200 mPa*s, ako napríklad 85 % glycerol, možno stále prenášať pomocou klasickej vzduchovej poduškovej pipety. Pri použití špeciálnej techniky sa reverzné pipetovanie, aspirácia vzduchových bublín alebo zvyškov v špičke výrazne zníži a vedie k presnejším výsledkom pipetovania. Napriek tomu to nie je to najlepšie, čo môžeme urobiť na zlepšenie pipetovania viskóznych kvapalín (pozri obr. 1).
Keď sa viskozita zvyšuje, ťažkosti sa zvyšujú. Stredne viskózne roztoky do 1 000 mPa*s sa ťažšie prenášajú klasickými vzduchovými vankúšikmi. Kvôli vysokému vnútornému treniu molekúl majú viskózne kvapaliny veľmi pomalý prietok a pipetovanie sa musí robiť veľmi pomaly a opatrne. Technika reverzného pipetovania často nestačí na presný prenos kvapaliny a veľa ľudí svoje vzorky váži. Táto stratégia tiež znamená brať do úvahy hustotu kvapaliny, ako aj laboratórne podmienky, ako je vlhkosť a teplota, aby sa presne vypočítal potrebný objem kvapaliny. Preto sa odporúčajú iné pipetovacie nástroje, takzvané pozitívne vytesňovacie nástroje. Tie majú hrot s integrovaným piestom, rovnako ako injekčná striekačka. Preto môže byť kvapalina ľahšie nasávaná a dávkovaná, pričom je zabezpečený presný prenos kvapaliny. Nie je potrebná špeciálna technika.
Napriek tomu aj objemové nástroje dosahujú limit pri veľmi viskóznych roztokoch, ako je tekutý med, pleťový krém alebo určité mechanické oleje. Tieto veľmi náročné kvapaliny potrebujú ďalší špeciálny nástroj, ktorý tiež využíva princíp pozitívneho výtlaku, ale navyše má optimalizovaný dizajn na riešenie vysoko viskóznych roztokov. Tento špeciálny nástroj bol porovnaný s existujúcimi objemovými hrotmi, aby sa dosiahol prah, pri ktorom je dôležité prejsť z normálneho dávkovacieho hrotu na špeciálny hrot pre vysoko viskózne roztoky. Ukázalo sa, že pri použití špeciálneho hrotu pre vysoko viskózne kvapaliny sa zvyšuje presnosť a znižujú sa sily potrebné na nasávanie a dávkovanie. Pre ďalšie podrobné informácie a príklady kvapalín si stiahnite Aplikačnú poznámku 376 o optimalizovanom výkone pre vysoko viskózne kvapaliny.
Čas odoslania: 23. januára 2023