Ako utesniť doštičku PCR

Úvod

PCR platne, ktoré sú základom laboratórií už mnoho rokov, sa v modernom prostredí stávajú ešte rozšírenejšími, pretože laboratóriá zvyšujú svoju priepustnosť a čoraz viac využívajú automatizáciu vo svojich pracovných postupoch. Dosiahnutie týchto cieľov pri zachovaní presnosti a integrity experimentov môže byť náročné. Jednou zo spoločných oblastí, kde sa môžu chyby vkradnúť, je tesneniePCR platneso zlou technikou, ktorá umožňuje odparovanie vzoriek, mení pH a tým narušuje enzymatické funkcie a vyvoláva kontamináciu. Naučiť sa pečať aPCR platňasprávne eliminuje tieto riziká a zabezpečuje reprodukovateľné výsledky.

Nájdite správne tesnenie pre vašu PCR platňu

Uzávery tanierov verzus filmové tesnenia verzus viečka
Čiapkysú dobrým spôsobom, ako utesniť platňu tesným uzáverom, pričom vám stále poskytujú flexibilitu na veľmi ľahké odlepenie a opätovné utesnenie platne podľa potreby bez akéhokoľvek odpadu. Čiapky však majú niekoľko kľúčových nevýhod.

Po prvé, budete si musieť kúpiť špecifickú čiapku, ktorá je kompatibilná, vďaka čomu nie sú univerzálne. Budete sa musieť uistiť, že viečko, ktoré si vyberiete, sedí na tanier, čo závisí od jeho výrobcu, a vyberte si buď klenutý alebo plochý podľa termocykléra, ktorý používate.

Po druhé, nanášanie uzáverov na tanier môže byť veľmi opakované a únavné, s rizikom krížovej kontaminácie, ak nasadíte nesprávny uzáver na nesprávnu jamku.

Zatiaľ čo fóliové tesnenia sú menej flexibilné z hľadiska odstraňovania a výmeny, sú veľmi univerzálne, pretože sa hodia na akýkoľvek typ PCR platne bez ohľadu na to, kto je ich výrobcom. Dajú sa jednoducho strihať na mieru, vďaka čomu sú veľmi efektívne.

Ďalšou možnosťou je veko na tanier. Tieto ponúkajú menšiu ochranu ako uzávery a tesnenia a používajú sa hlavne na krátkodobé krytie, aby sa zabránilo kontaminácii.

Optické vs. fóliové tesnenia

Či už potrebujete optické, číre tesnenie alebohliníková fóliao utesnení vašej platne rozhoduje váš experimentálny formát.Optické tesniace fóliesú priehľadné, aby vám umožnili pozorovať vzorky, pričom ich stále chránia a zabraňujú vyparovaniu. Sú tiež obzvlášť užitočné v experimentoch qPCR, ktoré zahŕňajú vykonávanie vysoko presných meraní fluorescencie priamo z platne, v takom prípade budete potrebovať tesniacu fóliu, ktorá odfiltruje čo najmenej fluorescencie. Je dôležité, aby ste sa uistili, že plomba alebo uzáver, ktorý používate, má dostatočne vysokú úroveň optickej čistoty, aby sa zabezpečila presnosť údajov.

Fóliové filmy sú vhodné pre všetky vzorky, ktoré sú citlivé na svetlo alebo sa majú skladovať pri teplote nižšej ako 80 °C. Z tohto dôvodu väčšina vzoriek určených na dlhodobé skladovanie bude vyžadovať fóliu. Fóliové filmy sú tiež prepichovateľné, čo je užitočné buď na skúmanie jednotlivých jamiek, alebo na prenos vzoriek ihlami. Môže k tomu dôjsť manuálne alebo ako súčasť robotickej platformy.

Zvážte tiež, že agresívne látky, ktoré zahŕňajú kyseliny, zásady alebo rozpúšťadlá, budú vyžadovať tesnenie, ktoré im odolá, v takom prípade je pravdepodobne vhodnejšie utesnenie fóliou.

Lepidlo vs. tepelne tesniaci film
Lepiace fólie tesneniasú veľmi priamočiare a ľahko sa aplikujú. Všetko, čo potrebujete, je, aby používateľ použil tesnenie na dosku a pomocou jednoduchého aplikačného nástroja stlačil a vytvoril tesný uzáver.

Tepelné tesnenia sú pokročilejšie a poskytujú dlhšie trvajúce tesnenie, ktoré má zníženú rýchlosť odparovania v porovnaní s konvenčným lepiacim tesnením. Táto možnosť je vhodná, ak chcete vzorky dlhodobo skladovať, hoci to prichádza s dodatočnou požiadavkou na zariadenie na utesňovanie platní.

Ako utesniť doštičku PCR

Spôsob utesnenia platní

Samolepiace

1. Uistite sa, že pracujete na rovnom a stabilnom pracovnom povrchu

2. Vyberte fóliu z obalu a odstráňte podložku

3. Opatrne umiestnite tesnenie na platňu, pričom sa uistite, že sú zakryté všetky jamky

4. Pomocou aplikačného nástroja aplikujte tlak na platňu. Začnite od jedného konca a rovnomerne zatlačte na druhý

5. Opakujte to niekoľkokrát

6. Prejdite aplikátorom okolo vonkajších jamiek, aby ste sa uistili, že sú tiež riadne utesnené.

Tepelné tesnenia

Tepelné tesnenia fungujú tak, že sa film pritaví k okraju každej jamky pomocou tesniacej dosky. Ak chcete používať tepelnú zváračku, pozrite si pokyny poskytnuté výrobcom zariadenia. Uistite sa, že výrobca, od ktorého odoberáte zariadenie, je seriózny, pretože je veľmi dôležité, aby tesnenie bolo správne, účinné a vodotesné.

Vrchné tipy na utesnenie platní

a. Pri vyvíjaní tlaku na tesnenie postupujte v horizontálnom aj vertikálnom smere, aby ste zaistili správne utesnenie

b. Vždy je dobrým zvykom spustiť skúšobnú prevádzku čohokoľvek, čo robíte, a nie je tomu inak ani pri utesňovaní dosky. Pred použitím so vzorkami otestujte s prázdnou platňou.

c. Pri testovaní odstráňte tesnenie a skontrolujte, či lepidlo správne priľnulo, bez medzier. V prvom referenčnom dokumente je to vizuálne znázornené. Ak ste platňu neutesnili správne, po odstránení tesnenia zostanú medzery, kde sa lepidlo úplne neprilepilo na platňu.

d. Pri odosielaní a preprave vzoriek môže byť užitočné použiť plastové tesnenie na hornú časť fóliového tesnenia pre dodatočnú ochranu (najmä pred prepichnutím).

e. Vždy sa uistite, že pri nanášaní fólie nie sú žiadne hrbolčeky alebo záhyby – tie spôsobia netesnosti a vyparovanie