Mikropipeta je pravdepodobne najpoužívanejším nástrojom v laboratóriu. Používajú ich vedci v širokej škále sektorov vrátane akademickej obce, nemocničných a forenzných laboratórií, ako aj pri vývoji liekov a vakcín na prenos presných, veľmi malých množstiev tekutín.
Aj keď môže byť nepríjemné a frustrujúce spozorovať vzduchové bubliny v jednorazovej špičke pipety, ak nie sú spozorované alebo ignorované, môže to mať obrovský vplyv na spoľahlivosť a reprodukovateľnosť výsledkov.
Dobrou správou je, že existuje niekoľko jednoduchých opatrení, ktoré môžete prijať, aby ste zabránili vzniku vzduchových bublín a zlepšili efektivitu laboratória, spokojnosť operátora, ako aj presnosť a precíznosť výsledkov.
Nižšie sa pozrieme na dôsledok vzniku vzduchovej bubliny v špičke pipety a na to, čo by ste mali robiť ďalej.
Dôsledok bublín vPipetová špička
Aj keď používate tie najpresnejšie, najlepšie z radu, dobre udržiavané, servisované a kalibrované pipety, spoľahlivosť vašich výsledkov môže byť ovplyvnená laboratórnymi chybami. Keď sa bubliny dostanú dotipmôže to mať viacero dôsledkov.
● Keď používateľ spozoruje vzduchovú bublinu, musí stráviť čas primeraným dávkovaním nasatej kvapaliny, vysunúť špičku a spustiť proces znova.
● Nedetegované vzduchové bubliny môžu viesť k prenosu malého objemu, čím sa mení koncentrácia reakčných zmesí, čo vedie k neúspešným experimentom a pochybným alebo nespoľahlivým výsledkom.
Tieto výsledky môžu mať niekoľko dôsledkov (1).
● Znížená účinnosť laboratória – Testy a testy sa budú musieť opakovať, čo spôsobí náklady na prácu a materiál, ktoré môžu byť dosť značné.
● Spochybniteľné alebo nesprávne výsledky testov – Ak sú zverejnené nesprávne výsledky, môžu to mať vážnejšie následky vrátane nesprávnej diagnózy a zlého výsledku pre pacienta.
● Stiahnutie rukopisov z časopisov – Ak kolegovia nedokážu replikovať vaše výsledky kvôli vzduchovým bublinám, ktoré spôsobujú nepresné výsledky, papiere môžu byť stiahnuté.
Osvedčené postupy na predchádzanie vzduchovým bublinám
Vo väčšine prípadov sú vzduchové bubliny v špičkách pipiet spôsobené chybou obsluhy. Základným problémom je zvyčajne zlá technika v dôsledku nedostatočného tréningu alebo únavy.
Pipetovanie je odborná operácia, ktorá si vyžaduje 110% pozornosť, správny tréning a prax na dosiahnutie konzistentných a presných výsledkov.
Aj keď existuje niekoľko vecí, ktoré môžete urobiť na zníženie všeobecných chýb pri pipetovaní, nižšie uvádzame niektoré osvedčené postupy, ktoré možno použiť na zabránenie vzniku vzduchových bublín všpičky pipiet.
Zlepšite používateľskú techniku
Pipetujte pomaly
Ak sa piest pri nasávaní uvoľní príliš rýchlo, do hrotu sa môžu dostať vzduchové bubliny. To môže byť obzvlášť problematické pri prenose viskóznych kvapalín. Podobný efekt môže nastať, ak sa piest uvoľní príliš rýchlo po výdaji.
Aby ste predišli vzniku vzduchových bublín pri nasávaní, dbajte na to, aby ste piest manuálnych pipiet ovládali hladko a pravidelne, pričom používajte rovnomernú silu.
Použite správnu hĺbku ponoru
Ak neponoríte špičku pipety dostatočne hlboko pod meniskus nádržky na kvapalinu, môže dôjsť k nasatiu vzduchu a tým k tvorbe bublín.
Ponorenie špičky príliš hlboko však môže v dôsledku zvýšeného tlaku nasať viac tekutiny alebo sa na vonkajšej strane špičky môžu objaviť kvapky, takže je dôležité ponoriť špičkušpička pipetydo správnej hĺbky.
Odporúčaná hĺbka sa líši medzi veľkosťou pipety, typom a značkou. Aj keď by sa mali dodržiavať odporúčania výrobcu, tu je všeobecný návod, ktorý poskytuje Národné fyzikálne laboratórium.
Sprievodca hĺbkovým ponorením špičky
Objem pipety (µl) a hĺbka ponorenia (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1 000: 2 – 4
- 1 000 – 5 000: 2 – 5
Pre-WetTipy na pipety
Pri pipetovaní objemov väčších ako 10 µlšpičky pipietsa zvyčajne vopred navlhčia tak, že sa niekoľkokrát naplnia dávkovanou kvapalinou a vypustia sa do odpadu, aby sa zlepšila presnosť.
Ak ich nenavlhčíte, môžu sa vytvárať vzduchové bubliny, najmä pri použití viskóznych alebo hydrofóbnych kvapalín. Aby ste sa vyhli vzduchovým bublinám, pri pipetovaní objemu väčšieho ako 10 µl vopred navlhčite špičky.
Ak je to vhodné, použite techniky reverzného pipetovania
Viskózne látky: Bežným problémom pri pipetovaní viskóznych látok, ako sú roztoky proteínov alebo nukleových kyselín, glycerol a Tween 20/40/60/80, je častá tvorba bublín pri použití techniky priameho pipetovania.
Pomalé pipetovanie pomocou reverznej pipetovacej techniky znižuje riziko tvorby bublín pri prenose viskóznych roztokov.
Technika ELISA
Pri pipetovaní malých objemov sa odporúča aj spätné pipetovanie96-jamkové mikro testovacie doštičkypre techniky ELISA. Keď sú vzduchové bubliny nasávané do pipety alebo dávkované do jamiek pri pridávaní činidiel, môže to ovplyvniť hodnoty optickej hustoty a výsledky. Na minimalizáciu alebo odstránenie tohto problému sa odporúča reverzné pipetovanie.
Používajte ergonomické pipety
Pipety starého štýlu, ktoré neboli navrhnuté s ohľadom na ergonómiu, vyžadujú väčšiu fyzickú námahu, unavíte sa a vaša pipetovacia technika bude nedbalá a nekvalitná. Vyššie uvedené chyby, ako napríklad rýchle uvoľnenie piestu, sa môžu vyskytovať častejšie.
Investíciou do ergonomickejšieho riešenia si budete môcť zachovať vynikajúcu techniku a zabrániť tvorbe vzduchových bublín v dôsledku zlej techniky.
Nájdite si čas na zaškolenie personálu
Pravidelné školenie a hodnotenie personálu v pipetovacích technikách môže zabezpečiť, že sa zníži počet chýb operátora a tvorba vzduchových bublín.
Zvážte viac automatizovaných riešení
Ako je uvedené vyššie, väčšinu vzduchových bublín spôsobuje operátor. Môže byť možné znížiť chyby operátora a znížiť pohodlie použitím elektronických pipiet alebo flexibilnej platformy na manipuláciu s kvapalinami, ako je naprRobot na manipuláciu s tekutinami Agilent Bravo.
Používajte dobrú kvalituTipy na pipety
Mikropipety sa zvyčajne kupujú opatrne, ale často sa málo myslí na kvalitu jednorazovej špičky pipety. Vzhľadom na vplyv, ktorý má špička na výsledky pipetovania, norma ISO 8655 vyžaduje dodatočnú kalibráciu, ak sa používajú pipety a špičky od rôznych výrobcov.
Môže to byť spôsobené tým, že mnohé lacné hroty môžu spočiatku vyzerať dobre, ale keď si ich pozorne preštudujete, môžu mať záblesky, výčnelky, škrabance a vzduchové bubliny alebo môžu byť ohnuté alebo obsahovať nečistoty.
Nákupom kvalitných hrotov vyrobených z vysoko kvalitného polypropylénu môžete znížiť výskyt vzduchových bublín.
Na záver
Vniknutie vzduchových bublín do špičky pipety má vplyv na efektivitu laboratória, ako aj na nepresnosť a nepresnosť výsledkov. Zaznamenali sme niekoľko vecí, ktoré môžete urobiť, aby ste sa vyhli vniknutiu vzduchových bublínšpička pipety.
Ak však nekvalitnéšpičky pipietspôsobujú, že sa do špičky vašej pipety dostávajú vzduchové bubliny, poteší vás, že naša univerzálna pasuješpičky pipietsú vyrobené podľa najvyšších štandardov a sú vyrobené z prvotriedneho čistého polypropylénu.
Biomedicínska spoločnosť Suzhou Acevyrábať vysokokvalitné univerzálne pipetové špičky s objemom 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 a 1250 µl, 96 špičiek/stojan. Výnimočná odolnosť – všetky stojany na špičky ACE vyhovujú požiadavkám používania s viackanálovými pipetami. Sterilné, filtrované, bez RNázy/DNázy a nepyrogénne.
Vitajte a opýtajte sa nás na ďalšie podrobnosti.
Čas odoslania: 29. decembra 2022