Cryovialsද්‍රව නයිට්‍රජන් වලින් පිරුණු ඩිවර් වල සෛල රේඛා සහ අනෙකුත් තීරණාත්මක ජීව විද්‍යාත්මක ද්‍රව්‍ය ක්‍රයොජනික් ගබඩා කිරීම සඳහා බහුලව භාවිතා වේ.

ද්රව නයිට්රජන් වල සෛල සාර්ථකව සංරක්ෂණය කිරීම සඳහා අදියර කිහිපයක් ඇතුළත් වේ. මූලික මූලධර්මය මන්දගාමී කැටි කිරීම වන අතර, භාවිතා කරන නිවැරදි තාක්ෂණය භාවිතා කරන සෛල වර්ගය සහ ක්‍රියෝප්‍රොටෙක්ටන්ට් මත රඳා පවතී. එවැනි අඩු උෂ්ණත්වවලදී සෛල ගබඩා කිරීමේදී සැලකිල්ලට ගත යුතු ආරක්ෂිත කරුණු සහ හොඳම භාවිතයන් කිහිපයක් තිබේ.

ක්‍රියෝවියල් ද්‍රව නයිට්‍රජන් තුළ ගබඩා කර ඇති ආකාරය පිළිබඳ දළ විශ්ලේෂණයක් ලබා දීම මෙම සටහනේ අරමුණයි.

Cryovials යනු කුමක්ද?

Cryovials යනු ඉතා අඩු උෂ්ණත්වවලදී දියර සාම්පල ගබඩා කිරීම සඳහා නිර්මාණය කර ඇති කුඩා, ආවරණ කුප්පි වේ. ක්‍රියෝප්‍රොටෙක්ටන්ට් වල සංරක්ෂණය කර ඇති සෛල ද්‍රව නයිට්‍රජන් සමඟ සෘජුව සම්බන්ධ නොවන බව ඔවුන් සහතික කරයි, ද්‍රව නයිට්‍රජන් වල අධික සිසිලන බලපෑමෙන් තවමත් ප්‍රතිලාභ ලබන අතරම සෛලීය අස්ථි බිඳීමේ අවදානම අවම කරයි.

කුප්පි සාමාන්‍යයෙන් වෙළුම් සහ මෝස්තර පරාසයකින් ලබා ගත හැකිය - ඒවා පැතලි හෝ වටකුරු පතුලකින් අභ්‍යන්තරව හෝ බාහිරව නූල් කළ හැකිය. වඳ සහ විෂබීජහරණය නොකළ ආකෘති ද තිබේ.

භාවිතා කරන්නේ කවුදසයිරොවියල්ස්ද්රව නයිට්රජන් තුළ සෛල ගබඩා කිරීමට

NHS සහ පුද්ගලික රසායනාගාර පරාසයක් මෙන්ම රැහැන් රුධිර බැංකුකරණය, අපිච්ඡ සෛල ජීව විද්‍යාව, ප්‍රතිශක්ති විද්‍යාව සහ ප්‍රාථමික සෛල ජීව විද්‍යාව පිළිබඳ විශේෂඥ පර්යේෂණ ආයතන, සෛල ක්‍රියෝප්‍රෙසර්ව් කිරීම සඳහා ක්‍රියෝවියල් භාවිතා කරයි.

මේ ආකාරයෙන් සංරක්ෂණය කර ඇති සෛල අතර B සහ T සෛල, CHO සෛල, Hematopoietic කඳ සහ ප්‍රජනක සෛල, Hybridomas, Intestinal Cells, Macrophages, Mesenchymal Stem and Progenitor Cells, Monocytes, Myeloma, NK Cells සහ Pluripotent Stem Cells ඇතුළත් වේ.

ද්රව නයිට්රජන් තුළ Cryovials ගබඩා කරන්නේ කෙසේද යන්න පිළිබඳ දළ විශ්ලේෂණය

Cryopreservation යනු සෛල සහ අනෙකුත් ජීව විද්‍යාත්මක නිර්මිතයන් ඉතා අඩු උෂ්ණත්වයකට සිසිලනය කිරීමෙන් ආරක්ෂා කරන ක්‍රියාවලියකි. සෛල ශක්‍යතාව නැති නොවී වසර ගණනාවක් ද්‍රව නයිට්‍රජන් තුළ සෛල ගබඩා කළ හැක. මෙය භාවිතා කරන ක්‍රියා පටිපාටිවල දළ සටහනකි.

සෛල සකස් කිරීම

සාම්පල සකස් කිරීමේ නිශ්චිත ක්‍රමය සෛල වර්ගය අනුව වෙනස් වේ, නමුත් සාමාන්‍යයෙන්, සෛල එකතු කර කේන්ද්‍රාපසාරී කර සෛල බහුල පෙති වර්ධනය කරයි. මෙම පෙති පසුව cryoprotectant හෝ cryopreservation මාධ්‍යයක් සමඟ මිශ්‍ර කරන ලද supernatant තුළ නැවත සවි කරනු ලැබේ.

Cryopreservation මාධ්‍යය

මෙම මාධ්‍යය භාවිතා කරනුයේ සෛල අභ්‍යන්තර හා බාහිර සෛලීය ස්ඵටික සෑදීම හා එම නිසා සෛල මිය යාම වැලැක්වීම මගින් අඩු උෂ්ණත්ව පරිසරයන් තුළ සෛල ආරක්ෂා කිරීම සඳහා ය. ඔවුන්ගේ කාර්යභාරය වන්නේ කැටි කිරීම, ගබඩා කිරීම සහ දියවන ක්රියාවලිය තුළ සෛල හා පටක සඳහා ආරක්ෂිත, ආරක්ෂිත පරිසරයක් සැපයීමයි.

නැවුම් ශීත කළ ප්ලාස්මා (FFP), හෙපරිනීකෘත ප්ලාස්මාලයිට් ද්‍රාවණය හෝ මස්තු රහිත, සත්ව සංරචක රහිත ද්‍රාවණ වැනි මාධ්‍යයක් ඩයිමෙතිල් සල්ෆොක්සයිඩ් (DMSO) හෝ ග්ලිසරෝල් වැනි ක්‍රියෝප්‍රොටෙක්ටන්ට් සමඟ මිශ්‍ර කර ඇත.

නැවත ද්‍රවීකරණය කරන ලද නියැදි පෙති පොලිප්‍රොපිලීන් ක්‍රියෝවියල් වලට මිශ්‍ර කර ඇතSuzhou Ace ජෛව වෛද්‍ය සමාගම Cryogenic Storage Vials.

ක්‍රියෝවියල් අධික ලෙස පුරවා නොගැනීම වැදගත්ය, මෙය ඉරිතැලීමේ අවදානම සහ අන්තර්ගතය මුදා හැරීම වැඩි කරයි (1).

පාලනය කළ ශීත කිරීමේ අනුපාතය

සාමාන්‍යයෙන්, සෛලවල සාර්ථක ක්‍රයෝප්‍රේසර්වේෂන් සඳහා මන්දගාමී පාලිත කැටිකිරීම් අනුපාතයක් යොදා ගනී.

සාම්පල ක්‍රයොජනික් කුප්පි වලට මිශ්‍ර කළ පසු, ඒවා තෙත් අයිස් මත හෝ 4℃ ශීතකරණයක් තුළ තබා විනාඩි 5ක් ඇතුළත ශීත කිරීමේ ක්‍රියාවලිය ආරම්භ කෙරේ. සාමාන්‍ය මාර්ගෝපදේශයක් ලෙස, සෛල විනාඩියකට -1 සිට -3 දක්වා (2) අනුපාතයකින් සිසිල් කරනු ලැබේ. මෙය ක්‍රමලේඛගත කළ හැකි සිසිලකයක් භාවිතයෙන් හෝ කුප්පි -70°C සිට –90°C දක්වා පාලනය කළ හැකි අධිශීතකරණයක තැන්පත් කර ඇති පරිවරණය කළ පෙට්ටියක තැබීමෙන් සිදු වේ.

ද්රව නයිට්රජන් වෙත මාරු කරන්න

ශීත කළ ක්‍රයොජනික් කුප්පි -135℃ ට වඩා අඩු උෂ්ණත්වයක් පවත්වා ගෙන යන්නේ නම්, දින නියමයක් නොමැතිව ද්‍රව නයිට්‍රජන් ටැංකියකට මාරු කරනු ලැබේ.

මෙම අතිශය අඩු උෂ්ණත්වයන් ද්රව හෝ වාෂ්ප අදියර නයිට්රජන් තුළ ගිල්වීමෙන් ලබා ගත හැක.

දියර හෝ වාෂ්ප අදියර?

ද්‍රව අදියර නයිට්‍රජන් වල ගබඩා කිරීම සීතල උෂ්ණත්වය නිරපේක්ෂ අනුකූලතාවයකින් පවත්වා ගැනීමට දන්නා නමුත් පහත සඳහන් හේතූන් නිසා බොහෝ විට නිර්දේශ නොකරයි:

• විභව අන්තරායක් වන ද්රව නයිට්රජන් විශාල පරිමා (ගැඹුර) සඳහා අවශ්යතාවය. මේ නිසා පිළිස්සුම් හෝ හුස්ම හිරවීම සැබෑ අවදානමකි.
• ඇස්පර්ගිලස්, හෙප් බී වැනි බෝවන කාරක මගින් හරස් දූෂණය වීමේ ලේඛනගත අවස්ථා සහ ද්‍රව නයිට්‍රජන් මාධ්‍යය හරහා වෛරස් පැතිරීම (2,3)
• ගිල්වීමේදී දියර නයිට්‍රජන් කුප්පි වලට කාන්දු වීමේ හැකියාව. ගබඩාවෙන් ඉවත් කර කාමර උෂ්ණත්වයට රත් කළ විට නයිට්‍රජන් වේගයෙන් ප්‍රසාරණය වේ. එහි ප්‍රතිඵලයක් වශයෙන්, දියර නයිට්‍රජන් ගබඩාවෙන් ඉවත් කළ විට කුප්පිය කැඩී බිඳී යා හැකි අතර, පියාසර සුන්බුන් සහ අන්තර්ගතයට නිරාවරණය වීම යන දෙකින්ම අනතුරක් ඇති කරයි (1, 4).

මෙම හේතූන් නිසා, අතිශය අඩු උෂ්ණත්ව ගබඩාව බොහෝ විට වාෂ්ප අවධියේ නයිට්‍රජන් වේ. නියැදි දියර අවධියේ ගබඩා කළ යුතු විට, විශේෂිත cryoflex නල භාවිතා කළ යුතුය.

වාෂ්ප අවධියේ අවාසිය නම් -135℃ සහ -190℃ අතර උෂ්ණත්ව උච්චාවචනයන් හේතුවෙන් සිරස් උෂ්ණත්ව අනුක්‍රමණයක් සිදුවිය හැක. මේ සඳහා දියර නයිට්‍රජන් මට්ටම් සහ උෂ්ණත්ව විචල්‍යයන් ප්‍රවේශමෙන් සහ කඩිසරව නිරීක්ෂණය කිරීම අවශ්‍ය වේ (5).

බොහෝ නිෂ්පාදකයින් නිර්දේශ කරන්නේ ක්‍රියෝවියල් -135℃ දක්වා ගබඩා කිරීමට හෝ වාෂ්ප අවධියේදී පමණක් භාවිතා කිරීමට සුදුසු බවයි.

ඔබේ Cryopreserved සෛල දියවීම

ශීත කළ සංස්කෘතියක් සඳහා දියවන ක්‍රියා පටිපාටිය ආතතියට පත්වන අතර සෛලවල ප්‍රශස්ත ශක්‍යතාව, ප්‍රකෘතිය සහ ක්‍රියාකාරීත්වය සහතික කිරීම සඳහා නිසි ලෙස හැසිරවීම සහ තාක්ෂණය අවශ්‍ය වේ. නිශ්චිත thawing protocols නිශ්චිත සෛල වර්ග මත රඳා පවතී. කෙසේ වෙතත්, වේගවත් දියවීම සම්මත ලෙස සැලකේ:

• සෛල ප්‍රතිසාධනය කෙරෙහි ඇති ඕනෑම බලපෑමක් අඩු කරන්න
• අධිශීත මාධ්‍යයේ ඇති ද්‍රාව්‍යවලට නිරාවරණ කාලය අඩු කිරීමට උදවු කරන්න
• අයිස් නැවත ස්ඵටිකීකරණයෙන් ඕනෑම හානියක් අවම කරන්න

සාම්පල දියවීම සඳහා ජල ස්නාන, පබළු නාන හෝ විශේෂිත ස්වයංක්‍රීය උපකරණ බහුලව භාවිතා වේ.

බොහෝ විට 1 සෛල රේඛාවක් මිනිත්තු 1-2 ක් සඳහා වරකට දිය වී යයි, පෙර රත් කළ වර්ධන මාධ්‍යයකින් සෝදා ගැනීමට පෙර බෝතලයේ කුඩා අයිස් ස්වල්පයක් පමණක් ඉතිරි වන තෙක් 37℃ ජල ස්නානයක මෘදු ලෙස කරකැවීමෙන්.

ක්ෂීරපායී කළල වැනි සමහර සෛල සඳහා, මන්දගාමී උනුසුම් වීම ඔවුන්ගේ පැවැත්ම සඳහා අත්යවශ්ය වේ.

සෛල දැන් සෛල සංස්කෘතිය, සෛල හුදකලා කිරීම හෝ රක්තපාත ප්‍රාථමික සෛල සම්බන්ධයෙන් - මයිලෝඇබ්ලේටිව් ප්‍රතිකාරයට පෙර දායක ප්‍රාථමික සෛලවල අඛණ්ඩතාව සහතික කිරීම සඳහා ශක්‍යතා අධ්‍යයනයන් සඳහා සූදානම් වේ.

සංස්කෘතිය තුළ ප්ලේට් කිරීම සඳහා සෛල සාන්ද්‍රණය තීරණය කිරීම සඳහා සෛල ගණනය කිරීම සඳහා භාවිතා කරන පෙර සේදූ සාම්පලයේ කුඩා ඇල්කොට් ලබා ගැනීම සාමාන්‍ය සිරිතකි. එවිට ඔබට සෛල හුදකලා ක්රියා පටිපාටිවල ප්රතිඵල තක්සේරු කර සෛල ශක්යතාව තීරණය කළ හැකිය.

Cryovials ගබඩා කිරීම සඳහා හොඳම භාවිතයන්

ක්‍රියෝවියල්වල ගබඩා කර ඇති සාම්පලවල සාර්ථක ක්‍රයෝප්‍රේසර්වේෂන් නිසි ලෙස ගබඩා කිරීම සහ වාර්තා තබා ගැනීම ඇතුළුව ප්‍රොටෝකෝලයේ බොහෝ මූලද්‍රව්‍ය මත රඳා පවතී.

• ගබඩා ස්ථාන අතර සෛල බෙදන්න- පරිමාවන් ඉඩ දෙන්නේ නම්, කුප්පි අතර සෛල බෙදීම සහ උපකරණ අසමත් වීම හේතුවෙන් නියැදි අහිමි වීමේ අවදානම අවම කිරීම සඳහා වෙනම ස්ථානවල ගබඩා කරන්න.
• හරස් දූෂණය වැළැක්වීම- පසුව භාවිතා කිරීමට පෙර තනි-භාවිත වඳ ක්‍රයොජනික් කුප්පි හෝ ස්වයංක්‍රීය ක්ලේව් තෝරා ගන්න
• ඔබේ සෛල සඳහා සුදුසු ප්රමාණයේ කුප්පි භාවිතා කරන්න- කුප්පි මිලි ලීටර් 1 ත් 5 ත් අතර පරිමාවකින් පැමිණේ. ඉරිතැලීමේ අවදානම අවම කිරීම සඳහා කුප්පි අධික ලෙස පිරවීමෙන් වළකින්න.
• අභ්‍යන්තර හෝ බාහිර නූල් සහිත ක්‍රයොජනික් කුප්පි තෝරන්න- අභ්‍යන්තරව නූල් සහිත කුප්පි සමහර විශ්ව විද්‍යාල විසින් ආරක්ෂිත පියවරයන් සඳහා නිර්දේශ කරනු ලැබේ - ඒවා පිරවීමේදී හෝ ද්‍රව නයිට්‍රජන් තුළ ගබඩා කිරීමේදී දූෂණය වීම වළක්වා ගත හැකිය.
• කාන්දු වීම වැළැක්වීම- කාන්දු වීම සහ අපවිත්‍ර වීම වැළැක්වීම සඳහා ඉස්කුරුප්පු තොප්පියට හෝ O-මුදුවලට අච්චු කරන ලද ද්වි-එන්නත් මුද්‍රා භාවිතා කරන්න.
• 2D තීරු කේත සහ ලේබල් කුප්පි භාවිතා කරන්න- සොයාගැනීමේ හැකියාව සහතික කිරීම සඳහා, විශාල ලිවීමේ ප්‍රදේශ සහිත කුප්පි එක් එක් කුප්පිය ප්‍රමාණවත් ලෙස ලේබල් කිරීමට සක්‍රීය කරයි. 2D තීරු කේත ගබඩා කළමනාකරණය සහ වාර්තා තබා ගැනීම සඳහා උපකාර කළ හැක. පහසුවෙන් හඳුනාගැනීම සඳහා වර්ණ කේතනය කළ තොප්පි ප්‍රයෝජනවත් වේ.
• ප්රමාණවත් ගබඩා නඩත්තු කිරීම- සෛල අහිමි නොවන බව සහතික කිරීම සඳහා, ගබඩා භාජන නිරන්තරයෙන් උෂ්ණත්වය සහ ද්රව නයිට්රජන් මට්ටම් නිරීක්ෂණය කළ යුතුය. දෝෂ ගැන පරිශීලකයන් දැනුවත් කිරීමට එලාම් සවි කළ යුතුය.

ආරක්ෂිත පූර්වාරක්ෂාවන්

ද්‍රව නයිට්‍රජන් නවීන පර්යේෂණවල සාමාන්‍ය භාවිතයක් වී ඇති නමුත් වැරදි ලෙස භාවිතා කළහොත් බරපතල තුවාල ඇතිවීමේ අවදානම දරයි.

දියර නයිට්‍රජන් හැසිරවීමේදී ඉෙමොලිමන්ට්, පිළිස්සුම් සහ වෙනත් අහිතකර සිදුවීම් අවදානම අවම කිරීම සඳහා නිසි පුද්ගලික ආරක්ෂක උපකරණ (PPE) පැළඳිය යුතුය. අඳින්න

• Cryogenic අත්වැසුම්
• රසායනාගාර කබාය
• ගෙල ආවරණය කරන බලපෑමට ඔරොත්තු දෙන සම්පූර්ණ මුහුණු ආවරණයක්
• සංවෘත පාවහන්
• Splashproof ප්ලාස්ටික් ඇප්රොන්

හුස්ම හිරවීමේ අවදානම අවම කිරීම සඳහා දියර නයිට්‍රජන් ශීතකරණ හොඳින් වාතාශ්‍රය ඇති ප්‍රදේශවල තැබිය යුතුය - ගැලවී ගිය නයිට්‍රජන් වායුගෝලීය ඔක්සිජන් වාෂ්ප වී විස්ථාපනය කරයි. විශාල වෙළුම් ගබඩාවල අඩු ඔක්සිජන් අනතුරු ඇඟවීමේ පද්ධති තිබිය යුතුය.

ද්රව නයිට්රජන් හැසිරවීමේදී යුගල වශයෙන් වැඩ කිරීම වඩාත් සුදුසු වන අතර සාමාන්ය වැඩ කරන වේලාවෙන් පිටත එය භාවිතා කිරීම තහනම් කළ යුතුය.

ඔබේ කාර්ය ප්‍රවාහයට සහය වීමට Cryovials

Suzhou Ace Biomedical සමාගම විවිධ වර්ගයේ සෛල සඳහා ඔබේ cryopreservation අවශ්‍යතා සපුරාලන නිෂ්පාදන රාශියක් ඉදිරිපත් කරයි. කළඹට ටියුබ් පරාසයක් මෙන්ම වඳ ක්‍රියෝවියල් පරාසයක් ඇතුළත් වේ.

අපගේ cryovials නම්:

• Lab Screw Cap 0.5mL 1.5mL 2.0mL Cryovial Cryogenic Vials කේතුකාකාර පහළ Cryotube සමග ගෑස්කට්

  ● 0.5ml,1.5ml,2.0ml පිරිවිතර, සායක් සහිත හෝ සායක් නොමැතිව
  ● කේතුකාකාර හෝ ස්වයං ස්ථාවර නිර්මාණය, වඳ හෝ වඳ නොවන දෙකම පවතී
  ● ඉස්කුරුප්පු කැප් නල වෛද්‍ය ශ්‍රේණියේ පොලිප්‍රොපිලීන් වලින් සාදා ඇත
  ● PP Cryotube කුප්පි නැවත නැවතත් ශීත කළ සහ දියකර ගත හැක
  ●බාහිර තොප්පිය නිර්මාණය මඟින් නියැදි ප්‍රතිකාරයේදී දූෂණය වීමේ සම්භාවිතාව අඩු කළ හැක.
  ● Screw cap cryogenic tubes Universal screw නූල් භාවිතය සඳහා
  ● ටියුබ් වඩාත් පොදු රෝටර් වලට ගැලපේ
  ● Cryogenic tube o-ring නල සම්මත අඟල් 1 සහ අඟල් 2, 48well, 81well，96well සහ 100well ශීතකරණ පෙට්ටිවලට ගැලපේ
  ● ස්වයංක්‍රීයව 121°C දක්වා සහ ශීත කළ හැකි -86°C

  කොටස අංක	ද්රව්ය	පරිමාව	CAPවර්ණ	PCS/බෑගය	බෑග්/කේස්
  ACT05-BL-N	PP	0.5ML	කළු, කහ, නිල්, රතු, දම්, සුදු	500	10
  ACT15-BL-N	PP	මිලි ලීටර් 1.5	කළු, කහ, නිල්, රතු, දම්, සුදු	500	10
  ACT15-BL-NW	PP	මිලි ලීටර් 1.5	කළු, කහ, නිල්, රතු, දම්, සුදු	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0ML	කළු, කහ, නිල්, රතු, දම්, සුදු	500	10