ක්‍රියාවලීන් ප්‍රමිතිකරණයට ඒවායේ ප්‍රශස්තිකරණය සහ පසුව ස්ථාපිත කිරීම සහ එකඟතාවය ඇතුළත් වන අතර එමඟින් පරිශීලකයාගෙන් ස්වාධීනව දිගුකාලීන ප්‍රශස්ත කාර්ය සාධනයක් ලබා ගත හැකිය. ප්‍රමිතිකරණය උසස් තත්ත්වයේ ප්‍රතිඵල මෙන්ම ඒවායේ ප්‍රතිනිෂ්පාදන හැකියාව සහ සංසන්දනාත්මක බව සහතික කරයි.
(සම්භාව්‍ය) PCR හි ඉලක්කය වන්නේ විශ්වාසදායක සහ ප්‍රතිනිෂ්පාදනය කළ හැකි ප්‍රතිඵලයක් ජනනය කිරීමයි. ඇතැම් යෙදුම් සඳහා,PCR නිෂ්පාදනයද අදාළ වේ. මෙම ප්රතික්රියා සඳහා, සාම්පල අවදානමට ලක් නොවන බවටත් PCR කාර්ය ප්‍රවාහය ස්ථාවරව පවතින බවටත් සහතික වීමට සැලකිලිමත් විය යුතුය. විශේෂයෙන්, මෙය ව්‍යාජ ධනාත්මක හෝ ව්‍යාජ සෘණාත්මක ප්‍රතිඵලවලට තුඩු දිය හැකි හෝ PCR ප්‍රතික්‍රියාව වළක්වන දූෂණයන් හඳුන්වාදීම අවම කිරීමට පරිවර්තනය කරයි. තවද, ප්රතික්රියා තත්වයන් ධාවනයක් තුළ එක් එක් තනි සාම්පල සඳහා හැකි තරම් සමාන විය යුතු අතර පසුව සිදුවන ප්රතික්රියා වලට (එකම ක්‍රමයේ) මාරු කළ හැකිය. මෙය ප්රතික්රියා වල සංයුතිය මෙන්ම චක්‍රයේ උෂ්ණත්ව පාලන වර්ගයට යොමු වේ. ඇත්ත වශයෙන්ම, පරිශීලක දෝෂ හැකිතාක් වළක්වා ගත යුතුය.
පහතින්, PCR පරීක්ෂණයක් සූදානම් කිරීමේදී සහ ක්‍රියාත්මක කිරීමේදී මුහුණ දෙන අභියෝග - සහ PCR වැඩ ප්‍රවාහ ප්‍රමිතිකරණය සඳහා භාවිතා කරන උපකරණ සහ පරිභෝජන ද්‍රව්‍ය සම්බන්ධයෙන් පවතින විසඳුම් සඳහා ප්‍රවේශයන් අපි නිරූපණය කරන්නෙමු.
ප්රතික්රියා සූදානම
ප්රතික්රියා සංරචක පිළිවෙලින් PCR-යාත්‍රාවලට හෝ තහඩුවලට බෙදා හැරීමේදී ජය ගත යුතු අභියෝග කිහිපයක් ඇතුළත් වේ:
ප්රතික්රියා කොන්දේසි
හැකි තරම් සමාන ප්රතික්රියා තත්වයන් සඳහා ඉලක්ක කිරීමේදී තනි සංරචකවල නිශ්චිත හා නිරවද්‍ය මාත්‍රාව අත්‍යවශ්‍ය වේ. හොඳ පයිප්ප ඇලවීමේ තාක්ෂණයකට අමතරව, නිවැරදි මෙවලම තෝරා ගැනීම ඉතා වැදගත් වේ. PCR මාස්ටර්-මිශ්‍රණවල බොහෝ විට දුස්ස්රාවිතතාවය වැඩි කරන හෝ පෙන ජනනය කරන ද්‍රව්‍ය අඩංගු වේ. පයිප්ප ඇලවීමේ ක්‍රියාවලියේදී, මේවා සැලකිය යුතු ලෙස තෙත් කිරීමට හේතු වේ.පයිප්ප ඉඟි, එමඟින් පයිප්ප දැමීමේ නිරවද්‍යතාවය අඩු වේ. සෘජු බෙදා හැරීමේ පද්ධති හෝ තෙත් වීමට අඩු ප්‍රවණතාවක් ඇති විකල්ප පයිප්ප ඉඟි භාවිතා කිරීමෙන් පයිප්ප දැමීමේ ක්‍රියාවලියේ නිරවද්‍යතාවය සහ නිරවද්‍යතාවය වැඩි දියුණු කළ හැකිය.
දූෂණයන්
බෙදා හැරීමේ ක්‍රියාවලියේදී, එයරොසෝල් ජනනය වන අතර, ඒවා පයිප්පයේ ඇතුළතට ළඟා වීමට ඉඩ දුන්නොත්, ඊළඟ පයිප්ප දැමීමේ පියවරේදී තවත් සාම්පලයක් දූෂණය කළ හැකිය. පෙරහන් ඉඟි හෝ සෘජු විස්ථාපන පද්ධති භාවිතා කිරීමෙන් මෙය වළක්වා ගත හැකිය.
වැනි පරිභෝජන ද්‍රව්‍යඉඟි, PCR වැඩ ප්‍රවාහයේදී භාවිතා කරන යාත්‍රා සහ තහඩු වල නියැදිය අවදානමට ලක් කරන හෝ ප්‍රතිඵලය අසත්‍ය කරන ද්‍රව්‍ය අඩංගු නොවිය යුතුය. මේවාට DNA, DNases, RNases සහ PCR නිෂේධක මෙන්ම ප්‍රතික්‍රියාව අතරතුර ද්‍රව්‍යයෙන් කාන්දු විය හැකි සංරචක - කාන්දු විය හැකි ද්‍රව්‍ය ලෙස හඳුන්වන ද්‍රව්‍ය ඇතුළත් වේ.
පරිශීලක දෝෂය
සාම්පල වැඩි වැඩියෙන් සකසන තරමට දෝෂ අවදානම වැඩි වේ. වැරදි භාජනයකට හෝ වැරදි ළිඳකට නියැදියක් නල මාර්ගයෙන් ඇතුල් කිරීම පහසුවෙන් සිදුවිය හැකිය. ළිංවල පහසුවෙන් හඳුනාගත හැකි සලකුණු කිරීම මගින් මෙම අවදානම සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කළ හැකිය. බෙදා හැරීමේ පියවර ස්වයංක්‍රීය කිරීම හරහා, "මානව සාධකය", එනම් දෝෂ සහ පරිශීලක-ආශ්‍රිත වෙනස්කම් අවම කරනු ලැබේ, එමඟින් ප්‍රතිනිෂ්පාදන හැකියාව වැඩි වේ, විශේෂයෙන් කුඩා ප්රතික්රියා පරිමාවන් සම්බන්ධයෙන්. මේ සඳහා වැඩපොළක භාවිතා කිරීමට ප්‍රමාණවත් මාන ස්ථායිතාවයකින් යුත් තහඩු අවශ්‍ය වේ. අමුණා ඇති තීරු කේත මඟින් අතිරේක යන්ත්‍ර කියවීමේ හැකියාව ලබා දෙන අතර එමඟින් සමස්ත ක්‍රියාවලිය පුරාම නියැදි ලුහුබැඳීම සරල කරයි.
තාප චක්‍රය ක්‍රමලේඛනය කිරීම
උපකරණයක් ක්‍රමලේඛනය කිරීම කාලය ගතවන මෙන්ම දෝෂ සහිත විය හැකිය. මෙම ක්‍රියාවලි පියවර සරල කිරීමට සහ වඩාත්ම වැදගත් දෙය නම් එය ආරක්ෂිත කිරීමට විවිධ PCR තාප චක්‍රීය විශේෂාංග එක්ව ක්‍රියා කරයි:
කාර්යක්ෂම ක්‍රමලේඛනයේ පදනම පහසු ක්‍රියාකාරිත්වය සහ හොඳ පරිශීලක මග පෙන්වීමයි. මෙම පදනම මත ගොඩනැගීම, මුරපදයෙන් ආරක්ෂිත පරිශීලක පරිපාලනය වෙනත් පරිශීලකයින් විසින් තමන්ගේම වැඩසටහන් වෙනස් කිරීම වළක්වනු ඇත. බහු සයිකල් (එකම වර්ගයේ) භාවිතයේ තිබේ නම්, USB හෝ සම්බන්ධතාවය හරහා වැඩසටහනක් එක් උපකරණයකින් තවත් උපකරණයකට කෙලින්ම මාරු කළ හැකි නම් එය ප්‍රයෝජනවත් වේ. පරිගණක මෘදුකාංග මඟින් පරිගණකයක වැඩසටහන්, පරිශීලක අයිතිවාසිකම් සහ ලේඛන මධ්‍යම සහ ආරක්ෂිතව පරිපාලනය කිරීමට හැකියාව ලැබේ.
PCR ධාවනය
ධාවනය අතරතුර, ප්රතික්රියා භාජනය තුළ DNA විස්තාරණය කරනු ලබන අතර, එහිදී සෑම සාම්පලයක්ම සමාන, ස්ථාවර ප්රතික්රියා තත්වයන්ට යටත් කළ යුතුය. ක්‍රියාවලිය සඳහා පහත සඳහන් අංග අදාළ වේ:
උෂ්ණත්ව පාලනය
උෂ්ණත්ව පාලනයේ විශිෂ්ට නිරවද්‍යතාවය සහ සයික්ලර් බ්ලොක් එකේ සමජාතීයතාවය සියලුම සාම්පලවල ඒකාකාර උෂ්ණත්ව සැකසුම් සඳහා පදනම වේ. තාපන සහ සිසිලන මූලද්‍රව්‍යවල (පෙල්ටියර් මූලද්‍රව්‍ය) ඉහළ ගුණාත්මකභාවය මෙන්ම ඒවා බ්ලොක් එකට සම්බන්ධ කර ඇති ආකාරය, "දාර ආචරණය" ලෙස හඳුන්වන උෂ්ණත්ව විෂමතා අවදානම තීරණය කරන තීරණාත්මක සාධක වේ.
වාෂ්පීකරණය
ප්‍රතික්‍රියාව අතරතුර වාෂ්පීකරණය හේතුවෙන් තනි ප්රතික්රියා සංරචකවල සාන්ද්‍රණයන් වෙනස් නොවිය යුතුය. එසේ නොමැතිනම්, ඉතා සුළු ප්‍රමාණයක්PCR නිෂ්පාදනයජනනය විය හැකිය, නැතහොත් කිසිසේත්ම නැත. එබැවින් ආරක්ෂිත මුද්‍රාවක් සහතික කිරීමෙන් වාෂ්පීකරණය අවම කිරීම ඉතා වැදගත් වේ. මෙම අවස්ථාවේ දී, තාප චක්‍රයේ රත් වූ පියන සහ යාත්‍රාවේ මුද්‍රාව අත්වැල් බැඳගෙන ක්‍රියා කරයි. විවිධ මුද්‍රා තැබීමේ විකල්ප තිබේ.PCR තහඩු (සබැඳිය: මුද්‍රා තැබීමේ ලිපිය), එමඟින් තාප මුද්‍රා තැබීම හරහා හොඳම මුද්‍රාව ලබා ගත හැකිය. චක්‍ර පියනේ ස්පර්ශක පීඩනය තෝරාගත් මුද්‍රාවට සකස් කළ හැකි තාක් කල්, අනෙකුත් වසා දැමීම් ද සුදුසු විය හැකිය.
දිගු කාලීනව නිවැරදි සහ ප්‍රතිනිෂ්පාදනය කළ හැකි ප්‍රතිඵල ආරක්ෂා කිරීම සඳහා ක්‍රියාවලි ප්‍රමිතිකරණය ක්‍රියාත්මක වේ. උපකරණ සෑම විටම හොඳ ක්‍රියාකාරී තත්ත්වයේ පවතින බව සහතික කිරීම සඳහා නිතිපතා නඩත්තු කිරීම මෙයට ඇතුළත් වේ. නිෂ්පාදනය කරන ලද සියලුම කොටස් හරහා සියලුම පරිභෝජන ද්‍රව්‍ය අඛණ්ඩව උසස් තත්ත්වයේ තිබිය යුතු අතර, ඒවායේ විශ්වාසනීය ලබා ගැනීමේ හැකියාව සහතික කළ යුතුය.
පළ කිරීමේ කාලය: නොවැම්බර්-29-2022