Как запечатать планшет для ПЦР

Введение

ПЦР-планшеты, которые на протяжении многих лет были основным продуктом лаборатории, становятся все более распространенными в современных условиях, поскольку лаборатории увеличивают свою производительность и все чаще используют автоматизацию в своих рабочих процессах. Достижение этих целей при сохранении точности и целостности экспериментов может оказаться затруднительным. Одной из распространенных областей, где могут возникнуть ошибки, является пломбированиеПЦР-планшеты, с плохой техникой, позволяющей испарять образцы, изменяя pH и, следовательно, нарушая ферментативные функции и вызывая загрязнение. Научимся запечатыватьПЦР-планшетправильно устраняет эти риски и обеспечивает воспроизводимые результаты.

Найдите подходящее уплотнение для вашего ПЦР-планшета

Пластинчатые колпачки, пленочные уплотнения и крышки
Кепкиявляются хорошим способом плотно запечатать вашу тарелку, в то же время предоставляя вам возможность очень легко распечатывать и повторно запечатывать тарелку по мере необходимости без каких-либо отходов. Однако у кепок есть несколько существенных недостатков.

Во-первых, вам придется купить специальную совместимую крышку, что делает их неуниверсальными. Вам нужно будет убедиться, что выбранная вами крышка подходит к пластине, что зависит от ее производителя, и выбрать куполообразную или плоскую крышку в зависимости от используемого вами термоциклера.

Во-вторых, наложение колпачков на планшет может быть очень повторяющимся и утомительным занятием, с риском перекрестного загрязнения, если вы наденете неправильный колпачок не на ту лунку.

Хотя пленочные пломбы менее гибки с точки зрения снятия и замены, они очень универсальны, поскольку подходят к любому типу ПЦР-планшета, независимо от производителя. Их можно просто обрезать по размеру, что делает их очень эффективными.

Другой вариант – крышка-тарелка. Они обеспечивают меньшую защиту, чем колпачки и уплотнения, и в основном используются только для кратковременного прикрытия для предотвращения загрязнения.

Оптические и фольгированные пленочные уплотнения

Требуется ли вам оптическая, прозрачная пломба илипленка из алюминиевой фольгизапечатывание вашей тарелки определяется форматом вашего эксперимента.Оптические герметизирующие пленкипрозрачны, что позволяет вам наблюдать за образцами, одновременно защищая их и предотвращая испарение. Они также особенно полезны в экспериментах по количественной ПЦР, которые включают высокоточные измерения флуоресценции непосредственно с планшета, и в этом случае вам понадобится герметизирующая пленка, которая отфильтровывает как можно меньше флуоресценции. Важно убедиться, что используемое вами уплотнение или колпачок имеет достаточно высокий уровень оптической прозрачности, чтобы обеспечить точность показаний.

Фольгированные пленки подходят для любых образцов, чувствительных к свету или подлежащих хранению при температуре ниже 80°C. По этой причине для большинства образцов, предназначенных для длительного хранения, потребуется пленка из фольги. Пленки фольги также прокалываются, что полезно как для исследования отдельных лунок, так и для переноса образцов иглами. Это может происходить вручную или с помощью роботизированной платформы.

Также учтите, что для агрессивных веществ, в том числе кислот, оснований или растворителей, потребуется уплотнение, способное противостоять им, и в этом случае уплотнение из фольги, вероятно, будет более подходящим.

Клей против термосвариваемой пленки
Уплотнители из клейкой пленкиочень просты и легко применяются. Все, что вам нужно, — это приложить уплотнение к пластине и с помощью простого аппликатора прижать и сформировать плотное уплотнение.

Термосварки являются более совершенными, обеспечивая более длительный срок службы и меньшую скорость испарения по сравнению с обычными клеевыми швами. Этот вариант подходит, если вы планируете хранить образцы в течение длительного времени, хотя для этого требуются дополнительные требования к оборудованию для запечатывания пластин.

Как запечатать планшет для ПЦР

Метод запечатывания пластины

Самоклеящаяся

1. Убедитесь, что вы работаете на ровной и устойчивой рабочей поверхности.

2. Достаньте пленку из упаковки и удалите подложку.

3. Осторожно поместите пломбу на планшет, убедившись, что все лунки закрыты.

4. С помощью аппликатора надавите на пластину. Начните с одного конца и продвигайтесь к другому, равномерно нажимая.

5. Повторите это несколько раз.

6. Проведите аппликатором по внешним лункам, чтобы убедиться, что они также правильно закрыты.

Тепловые уплотнения

Термосварка осуществляется путем приплавления пленки к краям каждой лунки с помощью герметика для пластин. Для работы с термосварочным аппаратом следуйте инструкциям производителя оборудования. Убедитесь, что производитель, у которого вы приобретаете свое оборудование, имеет хорошую репутацию, поскольку очень важно, чтобы уплотнение было правильным, эффективным и водонепроницаемым.

Советы по уплотнению пластин

а. Прижимая уплотнение, двигайтесь как в горизонтальном, так и в вертикальном направлении, чтобы обеспечить надлежащее уплотнение.

б. Всегда полезно провести пробный запуск всего, что вы делаете, и это не является исключением для герметизации пластин. Проведите тестирование на пустой чашке, прежде чем использовать ее с образцами.

в. При проверке снимите уплотнитель и убедитесь, что клей приклеился правильно, без зазоров. В первом справочном документе это наглядно представлено. Если вы не запечатали пластину должным образом, при снятии уплотнителя останутся зазоры, в которых клей не полностью приклеился к пластине.

д. При отправке и транспортировке образцов может оказаться полезным наклеить пластиковую пломбу поверх фольгированной пломбы для дополнительной защиты (особенно от прокалывания).

е. Всегда следите за тем, чтобы при нанесении пленки не было неровностей и складок – это приведет к протечкам и испарению.